Name: Analyse dimmunofluorescence de la formation de granules de stress après le dépistage bactérien des cellules de mammifères (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-07-03T13:00:00.000+00:00
Duration: 11 min 37 s
Description: Découvrez une méthode d'immunofluorescence pour analyser la formation de granules de stress dans des cellules de mammifères infectées par des bactéries. Cette approche automatisée permet une quantification rigoureuse des réponses cellulaires au stress.

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PS est récipiendaire de la subvention Grand Challenge de Bill et Melinda Gates OPP1141322. PV a été soutenu par une bourse de mobilité postdocale de la Fondation nationale de la science nationale suisse et une bourse postdoctorale Roux-Cantarini. PJS est soutenu par une subvention HHMI et ERC-2013-ADG 339579-Decrypt.

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</ol>

Les auteurs n&#39;ont rien à dévoiler.

Le protocole décrit ici décrit l&#39;induction, la localisation et l&#39;analyse des SG dans les cellules non infectées et les cellules infectées par le pathogène cytosolique S. flexneri en présence ou en l&#39;absence de stress exogène. En utilisant un logiciel d&#39;imagerie gratuit, les protocoles permettent une analyse qualitative et quantitative précise de la formation SG pour identifier et analyser statistiquement les différences dans les phénotypes donnés. Il existe plusieurs...

La visualisation des interactions hôte-pathogène au niveau cellulaire est une méthode puissante pour obtenir des idées sur les stratégies pathogènes et pour identifier les voies cellulaires clés. En effet, les agents pathogènes peuvent être utilisés comme outils pour identifier des cibles ou des structures cellulaires importantes, car les agents pathogènes ont évolué pour subvertir les processus cellulaires centraux en tant que stratégie pour leur propre survie ou propagation. La visualisation des composants cellulaires peut être obtenue par l&#39;expression recombinante de protéines hôtes marquées par fluorescence. Bien que cela permette une analyse en temps réel, la génération de lignées cellulaires avec des protéines hôtes spécifiquement étiquetées est très laborieuse et peut entraîner des effets secondaires indésirables. Plus pratique est la détection de facteurs cellulaires à l&#39;aide d&#39;anticorps spécifiques, car plusieurs facteurs d&#39;hôte peuvent être analysés simultanément et l&#39;un n&#39;est pas limité à un type de cellule particulier. Un inconvénient est que seule une vue statique peut être capturée car l&#39;analyse d&#39;immunofluorescence nécessite une fixation de cellule hôteion. Cependant, un avantage important de l&#39;imagerie immunofluorescente est qu&#39;il se prête facilement à l&#39;analyse qualitative et quantitative. Ceci à son tour peut être utilisé pour obtenir des différences statistiquement significatives pour fournir de nouvelles idées sur les interactions hôte-pathogène. Les programmes d&#39;analyse d&#39;image fluorescente sont des outils analytiques puissants pour effectuer des analyses 3D et 4D. Cependant, le coût élevé du logiciel et de sa maintenance rend les méthodes basées sur des logiciels open source gratuits plus largement attrayantes. Une analyse d&#39;image minutieuse utilisant un logiciel de bioannalyse est précieuse car elle confirme l&#39;analyse visuelle et, lorsqu&#39;on attribue des significations statistiques, augmente la confiance dans l&#39;exactitude d&#39;un phénotype donné. Auparavant, les SG ont été analysés à l&#39;aide du logiciel ImageJ gratuit, ce qui nécessite l&#39;identification manuelle des SG individuels 4 . Ici, nous fournissons un protocole pour l&#39;induction et l&#39;analyse de la formation de SG cellulaire dans le contexte du bacInfections tertiaires en utilisant le logiciel d&#39;analyse de bio-image libre open source ICY (http://icy.bioimageanalysis.org). Le logiciel d&#39;analyse de bio-image dispose d&#39;un programme intégré de détection de points qui est très adapté à l&#39;analyse SG. Il permet le réglage précis du processus de détection automatisé dans les régions d&#39;intérêt spécifiées (ROI). Cela surmonte la nécessité d&#39;une analyse manuelle des SG individuels et supprime le biais d&#39;échantillonnage. Beaucoup de contraintes environnementales induisent la formation de SG, qui sont des structures cytosoliques, non membranées densément denses, de 0,2 à 5 μm de diamètre 5 , 6 . Cette réponse cellulaire est évolutive conservée dans les levures, les plantes et les mammifères et se produit lorsque la traduction globale des protéines est inhibée. Il implique l&#39;agrégation des complexes d&#39;initiation de traduction bloqués en SG, qui sont considérés comme des lieux de maintien pour les ARNm traductionnellement inactifs, permettant la traduction sélective d&#39;un sous-ensemble d&#39;ARNm cellulaires.Après élimination du stress, les SG se dissolvent et les taux globaux de synthèse des protéines reprennent. Les SG sont composés de facteurs d&#39;initiation à l&#39;allongement de la traduction, des protéines impliquées dans le métabolisme de l&#39;ARN, des protéines liées à l&#39;ARN, ainsi que des protéines d&#39;échafaudages et des facteurs impliqués dans la signalisation 2 de la cellule hôte, bien que la composition exacte puisse varier en fonction du stress appliqué. Les facteurs environnementaux qui induisent la formation de SG comprennent la famine des acides aminés, l&#39;irradiation UV, les chocs thermiques, le choc osmotique, le stress du réticulum endoplasmique, l&#39;hypoxie et l&#39;infection virale 2 , 7 , 8 . De nombreux progrès ont été réalisés dans la compréhension de la façon dont les virus induisent et subent également la formation de SG, alors que peu de choses sont encore connues sur la façon dont d&#39;autres agents pathogènes, tels que les agents pathogènes bactériens, fongiques ou protozoaires, affectent cette réponse de stress cellulaire 1 , 7 . ShigeLla flexneri est un agent pathogène cytosolique facultatif gram-négatif des humains et l&#39;agent causal de la diarrhée sévère ou de la shigellose. La shigellose est un fardeau majeur de la santé publique et entraîne 28 000 décès par année chez les enfants de moins de 5 ans 9 , 10 ans . S. flexneri infecte l&#39;épithélium colique et se propage de cellule à cellule en détournant les composants cytosquelettiques de l&#39;hôte 11 , 12 . L&#39;infection de l&#39;épithélium soutient la réplication de S. flexneri dans le cytosol, mais les macrophages infectés meurent à travers un processus de mort inflammatoire cellulaire appelé pyroptose. L&#39;infection entraîne un recrutement massif de neutrophiles et une inflammation sévère accompagnée de chaleur, de stress oxydatif et de destruction des tissus. Ainsi, alors que les cellules infectées sont soumises à des contraintes internes induites par une infection, telles que la perturbation de Golgi, le stress génotoxique et le réarrangement cytosquelettiqueS, les cellules infectées sont également soumises à des contraintes environnementales dues au processus inflammatoire. La caractérisation de l&#39;effet de l&#39;infection par S. flexneri sur la capacité des cellules à répondre aux contraintes environnementales en utilisant un certain nombre de marqueurs SG a démontré que l&#39;infection entraîne des différences qualitatives et quantitatives dans la composition SG 3 . Cependant, on connaît peu d&#39;autres agents pathogènes bactériens. Nous décrivons ici une méthodologie pour l&#39;infection des cellules hôtes avec le pathogène cytosolique S. flexneri , le stress des cellules avec différents contraintes environnementales, l&#39;étiquetage des composants SG et l&#39;analyse qualitative et quantitative de la formation et de la composition du SG dans le contexte des infections Et des cellules non infectées. Cette méthode est largement applicable à d&#39;autres agents pathogènes bactériens. En outre, l&#39;analyse d&#39;image de la formation SG peut être utilisée pour les infections par des virus ou d&#39;autres agents pathogènes. Il peut être utilisé pour analyser SGFormation sur l&#39;infection ou l&#39;effet de l&#39;infection sur la formation de SG en réponse à des contraintes exogènes.

<table><tbody><tr><td>Anticorps primaires <forts>/forts</forts></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>eIF3b (N20), origine chèvre</td><td>Santa Cruz</td><td>sc-16377</td><td>Marqueur SG robuste et largement utilisé. La coloration cytosolique permet la délimitation cellulaire. Dilution 1:300</td></tr><tr><td>eIF3b (A20), origine chèvre</td><td>Santa Cruz</td><td>sc-16378</td><td>Même cible que eIF3b (N20) et dans nos mains était identique à eIF3b (N20). Dilution 1:300</td></tr><tr><td>eIF3A (D51F4), origine lapin (MC : monoclonal)</td><td>Signalisation cellulaire</td><td>3411</td><td>Partie du complexe multiprotéique eIF3 avec eIF3b . Dilution 1:800</td></tr><tr><td>eIF4AI, origine chèvre</td><td>Santa Cruz</td><td>sc-14211</td><td>Recommandé par (Réf # 13). Dilution 1:200</td></tr><tr><td>eIF4B, origine lapin</td><td>Abcam</td><td>ab186856</td><td>Bon marqueur de granule de stress entre nos mains. Dilution 1:300</td></tr><tr><td>eIF4B, origine lapin</td><td>Signalisation cellulaire</td><td>3592</td><td>Recommandée par Ref # 13. Dilution 1:100</td></tr><tr><td>eIF4G, origine lapin</td><td>Santa Cruz</td><td>sc-11373</td><td>Marqueur SG largement utilisé. (Réf # 13) : peut ne pas bien fonctionner dans les lignées cellulaires de souris. Dilution 1:300</td></tr><tr><td>G3BP1, origine lapin (MC : monoclonal)</td><td>BD Biosciences</td><td>611126</td><td>Marqueur SG largement utilisé. Dilution 1:300</td></tr><tr><td>Tia-1, origine chèvre</td><td>Santa Cruz</td><td>sc-1751</td><td>Marqueur SG largement utilisé. Peut également être trouvé dans les corps P lorsque des SG sont présents (Ref # 13). Dilution 1:300</td></tr><tr><td>Alexa-conjugual Secondary Antibodies</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>A488 anti-chèvre, origine âne</td><td>Thermo Fisher</td><td>A-11055</td><td>Cross absorbé. Dilution 1:500</td></tr><tr><td>A568 anti-chèvre, origine âne</td><td>Thermo Fisher</td><td>A-11057</td><td>Croix absorbée. Dilution 1:500</td></tr><tr><td>A488 anti-souris, origine âne</td><td>Thermo Fisher</td><td>A-21202</td><td>Dilution 1:500</td></tr><tr><td>A568 anti-souris, origine âne</td><td>Thermo Fisher</td><td>A10037</td><td>Dilution 1:500</td></tr><tr><td>A647 anti-souris, origine âne</td><td>Thermo Fisher</td><td>A31571</td><td>Dilution 1:500</td></tr><tr><td>A488 anti-lapin, origine âne</td><td>Thermo Fisher</td><td>A-21206</td><td>Dilution 1:500</td></tr><tr><td>A568 anti-lapin, origine âne</td><td>Thermo Fisher</td><td>A10042</td><td>Dilution 1:500</td></tr><tr><td><fort>Autres réactifs</fort></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Shigella flexneri</td><td></td><td></td><td>Disponible auprès de différents laboratoires sur demande</td></tr><tr><td>Tryptone Caséine Bouillon de soja (TCS)</td><td>BD Biosciences</td><td>211825</td><td>Milieu de croissance standard pour Shigella, application - croissance bactérienne</td></tr><tr><td>Gélose TCS</td><td>BD Biosciences</td><td>236950</td><td>Gélose de croissance standard pour Shigella, application - croissance bactérienne</td></tr><tr><td>Rouge Congo</td><td>SERVA Electrophoresis GmbH</td><td>27215.01</td><td>Outil de distrimination pour Shigell qui ont perdu le plasmide de virulence, application - croissance bactérienne</td></tr><tr><td>Poly-L-Lysine (PLL)</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>P1274</td><td>Utile pour enrober les bactéries afin d’augmenter l’infection, application - infection</td></tr><tr><td>Gentamicine</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>G1397</td><td>Destruction sélective des bactéries extracellulaires mais non cytosoliques, application - infection</td></tr><tr><td>HEPES</td><td>Life Technologies</td><td>15630-056</td><td>Tampon de PH utile lorsque les cellules sont incubées à RT, application - culture cellulaire</td></tr><tr><td>Dulbecco’s Modified Eagle Medium (DMEM)</td><td>Life Technologies</td><td>31885</td><td>Milieu de culture standard pour cellules HeLa, application - culture cellulaire</td></tr><tr><td>Sérum de veau fœtal (FCS)</td><td>Biowest</td><td>S1810-100</td><td>Supplémentation à 5 % utilisée pour le milieu de culture cellulaire HeLa, application - culture cellulaire</td></tr><tr><td>Acides aminés non essentiels (NEAA)</td><td>Life Technologies</td><td>11140</td><td>Dilution 1:100 utilisée pour le milieu de culture cellulaire HeLa, application - culture cellulaire</td></tr><tr><td>DMSO</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>D2650</td><td>Diluant réactif, application - culture cellulaire</td></tr><tr><td>Arsénite</td> <td>de sodiumSigma-Aldrich</td><td>S7400</td><td>Inducteur de stress granulaire puissant (Remarque : hautement toxique, manipulation et élimination spéciales requises), application - inducteur de stress</td></tr><tr><td>Clotrimazole</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>C6019</td><td>Inducteur de granules de stress puissant (Remarque : danger pour la santé, manipulation et élimination spéciales requises), application - inducteur</td></tr><tr><td>de stress Paraformaldéhyde (PFA</td><td>Electron Microscopy Scences</td><td>15714</td><td>4 % de PFA est utilisé pour la fixation standard des cellules, application - fixation</td></tr><tr><td>Triton X-100</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>T8787</td><td>Utilisé à 0,03 % pour la perméabilisation des cellules hôtes avant coloration immunofluorescente, application - perméabilisation</td></tr><tr><td>A647-phalloidin Thermo</td><td>Fisher</td><td>A22287</td><td>La dilution est à 1:40, mieux ajouté lors de la coloration secondaire des anticorps, application - coloration</td></tr><tr><td>DAPI</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>D9542</td><td>Coloration à l’acide nucléide utilisée pour visualiser à la fois le noyau de l’hôte et les bactéries, application - coloration Parafilm</td></tr><tr><td></td><td>Sigma-Aldrich</td><td>BR701501</td><td>film de paraffine utile pour la coloration immunofluorescente des lamelles, application - coloration Prolong</td></tr><tr><td>Gold</td><td>Thermo Fisher</td><td>36930</td><td>Milieu de montage robuste qui fonctionne bien pour la plupart des fluorophores , application - montage</td></tr><tr><td>Mowiol</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>81381</td><td>Support de montage bon marché et robuste qui fonctionne bien pour la plupart des fluorophores, application - montage</td></tr><tr><td>de plaque de culture cellulaire 24 puits</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>CLS3527</td><td>Plaques de culture tissulaire standard, application - culture cellulaire</td></tr><tr><td>12 mm lamelles en verre</td><td>NeuVitro</td><td>1001/12</td><td>Support de culture cellulaire pour applications immunofluorescentes, application - pince de support cellulaire</td></tr><tr><td></td><td>Sigma-Aldrich</td><td>81381</td><td>Support de montage bon marché et robuste qui fonctionne bien pour la plupart des fluorophores, application - montage</td></tr><tr><td><fort>Programmes et équipements</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Prism</td><td>GraphPad Logiciel</td><td></td><td>d’analyse de données et de graphiques avec des options de test statistique robustes, application - analyse de données</td></tr><tr><td>Leica SP5</td><td>Leica Microsystems</td><td></td><td>Microsope confocale, application - image acquisition</td></tr><tr><td>Imaris</td><td>Bitplane</td><td></td><td>Programme professionnel d’analyse d’images, application - analyse de données</td></tr><tr><td>Excel</td><td>Microsoft</td><td></td><td>Programme d’analyse de données et de graphiques, application - analyse de données</td></tr></tbody></table>

analyse d&#39;immunofluorescence de la formation de granules de stress après le dépistage bactérien des cellules de mammifères

Immunofluorescence Analysis of Stress Granule Formation After Bacterial Challenge of Mammalian Cells

L&#39;imagerie fluorescente des composants cellulaires est un outil efficace pour étudier les interactions hôte-pathogène. Les agents pathogènes peuvent affecter de nombreuses caractéristiques différentes des cellules infectées, y compris l&#39;ultrastructure des organelles, l&#39;organisation du réseau cytosquelettique, ainsi que les processus cellulaires tels que la formation du granulé du stress (SG). La caractérisation de la façon dont les agents pathogènes subversent les processus hôtes est une partie importante et intégrante du domaine de la pathogenèse. Bien que les phénotypes variables puissent être facilement visibles, l&#39;analyse précise des différences qualitatives et quantitatives dans les structures cellulaires induites par le défi des agents pathogènes est essentielle pour définir des différences statistiquement significatives entre les échantillons expérimental et les témoins. La formation du SG est une réponse au stress évolutive qui conduit à des réponses antivirales et a longtemps été étudiée en utilisant des infections virales 1 . La formation SG affecte également les cascades de signalisation et peut avoir d&#39;autres conséquences encore inconnues2 . La caractérisation de cette réponse au stress par des agents pathogènes autres que les virus, tels que les agents pathogènes bactériens, est actuellement un domaine émergent de recherche 3 . Pour l&#39;instant, l&#39;analyse quantitative et qualitative de la formation SG n&#39;est pas encore utilisée de manière routinière, même dans les systèmes virales. Nous décrivons ici une méthode simple pour induire et caractériser la formation de SG dans les cellules non infectées et dans les cellules infectées par un agent pathogène bactérien cytosolique, ce qui affecte la formation de SG en réponse à divers contraintes exogènes. L&#39;analyse de la formation et de la composition du SG est obtenue en utilisant un certain nombre de marqueurs SG différents et le plug-in détecteur spot de ICY, un outil d&#39;analyse d&#39;image open source.

Pour expliquer et démontrer le protocole décrit dans ce manuscrit, nous avons caractérisé l&#39;image des SGs induites par le clotrimazole dans les cellules HeLa infectées ou non avec le pathogène cytosolique S. flexneri . Un schéma de la procédure est présenté dans la figure 1 , et comprend S. flexneri virulent et avirulent rayé sur les plaques rouges du Congo, la préparation des bactéries, l&#39;infection, l&#39;ajout de stress environnem...

Nous décrivons une méthode pour l&#39;analyse qualitative et quantitative de la formation de granules de stress dans des cellules de mammifères après que les cellules sont confrontées à des bactéries et à un certain nombre de contraintes différentes. Ce protocole peut être appliqué pour étudier la réponse des granules de stress cellulaire dans une large gamme d&#39;interactions hôtes-bactéries.

Analyse d&#39;immunofluorescence de la formation de granules de stress après le dépistage bactérien des cellules de mammifères

Fluorescent imaging of cellular components is an effective tool to investigate host-pathogen interactions. Pathogens can affect many different features of ...

L'objectif général de cette expérience est d'évaluer les effets d'une infection bactérienne sur la capacité des cellules hôtes à former des granules de stress en réponse à un stress exogène. Cette méthode constitue un outil précieux dans le domaine de la microbiologie cellulaire pour déterminer si un pathogène donné est capable ou non de modifier ou de subvertir l'ensemble de la voie de formation des granules de stress. Le principal avantage de cette technique réside dans le fait que les granules de stress peuvent être analysés de manière qualitative et quantitative de façon rigoureuse et automatisée à l'aide de programmes gratuits d'analyse d'images.Cette méthode permet d'obtenir des informations sur la dynamique de la formation et de la composition des granules de stress, ainsi que sur la manière dont ces paramètres sont influencés par un pathogène spécifique. Merci. Avant de commencer le test, inoculez une colonie rouge de bactéries S.flexneri M90T provenant d'une boîte de gélose au tryptone-soja additionnée de 1 % de rouge Congo récemment striée dans un tube conique de 15 millilitres contenant huit millilitres de bouillon de culture au tryptone-soja.Après avoir serré le couverc

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Immunology and Infection

Immunologie et infection

Source : Cayron, J., et al. Analyse multi-échelle de la croissance bactérienne sous traitement de stress. J. Vis. Exp. (2019).Cette vidéo montre comment préparer et utiliser une plaque microfluidique pour l’imagerie des cellules bactériennes dans des conditions de stress. Il décrit le processus d’introduction d’une culture bactérienne et d’un milieu antibiotique induisant un stress, suivi d’une charge cellulaire et d’une configuration microscopique. L’imagerie time-lapse en mode contraste de...

Analyse microscopique de la croissance bactérienne sous stress à l’aide de chambres microfluidiques

Source : Vonaesch, P. et al., Analyse immunofluorescence de la formation de granules de stress après un défi bactérien sur les cellules de mammifères. J. Vis. Exp. (2017)Cette vidéo montre l’infection des cellules épithéliales par la bactérie pathogène Shigella flexneri et la réponse cellulaire de l’hôte qui en résulte. Les protéines effectrices bactériennes perturbent la traduction de l’hôte, déclenchant la formation d’organites sans membrane appelés granules de stress, qui reflètent la...

Formation des granules de stress lors de l’infection à Shigella des cellules épithéliales cancéreuses

Cette vidéo présente un test de caractérisation et de quantification des granules de stress chez les mammifères, qui sont constitués d’ARNm, de protéines de liaison à l’ARN (RBP) et de diverses autres protéines.

Un test d’immunofluorescence pour caractériser et quantifier les granules de stress chez les mammifères

Deux méthodes complémentaires basées sur la cytométrie en flux et la microscopie sont présentées qui permettent la quantification, au niveau de la cellule unique, de la dynamique de l'expression génique induits par l'activation d'une voie de MAPK dans la levure.

Quantification temporelle d&#39;expression MAPK induite en simples cellules de levure

Nous avons développé une plateforme microfluidique pour des tests rapides de sensibilité aux antibiotiques. Le fluide est passé à grande vitesse sur les bactéries immobilisées au fond d’un canal microfluidique. En présence de stress et d’antibiotiques, les souches sensibles de bactéries meurent rapidement. Cependant, les bactéries résistantes peuvent survivre à ces conditions stressantes.

Tests de sensibilité aux antibiotiques induits par le stress sur une puce

granules de stress (SG) sont des granules d'ARN cytoplasmiques contenant des particules bloquées ribonucléoprotéiques (RNP), et important dans la réponse cellulaire à différents stress. Dynamique de SG peuvent être suivies dans les cellules vivantes en visualisant la localisation d'un composant marqué de SG dans des cellules primaires transfectées après le stress.

Visualisation de G3BP stress Granules dynamique dans les cellules primaires en direct

Les granules de stress (SG) sont des structures cytoplasmiques non moulues qui se forment dans des cellules exposées à une variété de contraintes. Les SG contiennent des ARNm, des protéines de liaison à l'ARN, des petites sous-unités ribosomales, des facteurs liés à la traduction et diverses protéines de signalisation cellulaire. Ce protocole décrit un flux de travail qui utilise plusieurs approches expérimentales pour détecter, caractériser et quantifier les SG de bonne foi .

Méthodes pour classer les foyers cytoplasmiques sous forme de granulés de stress mammalien

Nous présentons un protocole pour microscopie STED simultanément les structures image actine, microtubules et protéines microtubule bout plus contraignantes dans les cellules de B qui se sont propagés sur lamelles recouvertes d’anticorps dirigés contre le récepteur des cellules B, un modèle pour la phase initiale de formation de la synapse immunitaire.

Visualisation de l’actine et microtubules cytosquelettes à la Synapse immunitaire de B-cellule émission stimulée par épuisement (STED) microscopie

Nous avons développé un test multipuits format polyacrylamide pour sonder l’effet de la rigidité de la matrice extracellulaire sur une infection bactérienne de cellules adhérentes. Ce dosage est compatible avec la cytométrie en flux, immuno-coloration et microscopie de force de traction, ce qui permet des mesures quantitatives des biomécaniques interactions entre cellules, leur matrice extracellulaire et des bactéries pathogènes.

Un test multipuits Format Polyacrylamide pour étudier l’effet de la rigidité de la matrice extracellulaire sur l’Infection bactérienne de cellules adhérentes

Nous présentons un flux de travail librement disponible construit pour l’exploration rapide et l’analyse précise des corps cellulaires dans des compartiments cellulaires spécifiques dans des images de microscopie de fluorescence. Ce flux de travail convivial est conçu sur le logiciel open-source Icy et utilise également les fonctionnalités ImageJ. Le pipeline est abordable sans connaissance dans l’analyse d’image.

Analyseur de sous-structure : Un flux de travail convivial pour l’exploration rapide et l’analyse précise des corps cellulaires dans les images de microscopie de fluorescence

Découvrez une méthode d'immunofluorescence pour analyser la formation de granules de stress dans des cellules de mammifères infectées par des bactéries. Cette approche automatisée permet une quantification rigoureuse des réponses cellulaires au stress.

Analyse d'immunofluorescence de la formation de granules de stress après le dépistage bactérien des cellules de mammifères

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