Four-color Fluorescence Immunohistochemistry of T-cell Subpopulations in Archival Formalin-fixed, Paraffin-embedded Human Oropharyngeal Squamous Cell Carcinoma Samples

Simone Punt; Robert J. Baatenburg de Jong; Ekaterina S. Jordanova

doi:10.3791/55589

Immunohistochimie à fluorescence à quatre couleurs des sous-populations de lymphocytes T dans des...

JoVE Journal
Cancer Research

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JoVE Journal Cancer Research

Four-color Fluorescence Immunohistochemistry of T-cell Subpopulations in Archival Formalin-fixed, Paraffin-embedded Human Oropharyngeal Squamous Cell Carcinoma Samples

Immunohistochimie à fluorescence à quatre couleurs des sous-populations de lymphocytes T dans des échantillons de carcinome épidermique humain ou opharyngé humain fixé à la formaline, à base de formaline

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07:43 min

July 29, 2017

DOI: 10.3791/55589-v

Simone Punt¹, Robert J. Baatenburg de Jong², Ekaterina S. Jordanova^1,3

¹Department of Pathology,Leiden University Medical Center, ²Department of Otorhinolaryngology and Head and Neck Surgery,Erasmus University Medical Center, ³Center for Gynecological Oncology Amsterdam,VU Medical Center

Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Overview

This study utilizes multiparameter fluorescence immunohistochemistry to analyze T-cell subpopulations in oropharyngeal cancer. The technique allows for the assessment of immune cell populations within the tumor microenvironment.

Key Study Components

Area of Science

Immuno-oncology
Fluorescence microscopy
Cancer research

Background

Understanding immune cell distribution in tumors is crucial for cancer prognosis.
Oropharyngeal squamous cell carcinoma is a type of cancer that can be analyzed using this method.
Immune cell subpopulations may influence patient outcomes.
Multiparameter techniques enable visualization of multiple biomarkers simultaneously.

Purpose of Study

To visualize and enumerate T lymphocyte subpopulations in cancer tissue.
To explore the relationship between immune cell presence and patient prognosis.
To enhance patient stratification for immune therapies.

Methods Used

Utilization of archival formalin-fixed paraffin-embedded tissue sections.
Application of multicolor immunohistochemistry for visualization.
Enumeration of various T lymphocyte subpopulations.
Preparation of tissue sections using a micro tongue technique.

Main Results

Successful visualization of multiple immune cell markers in one section.
Identification of T-cell subpopulations in oropharyngeal cancer samples.
Potential correlation between immune cell distribution and patient outcomes.
Insights into patient stratification for targeted immune therapies.

Conclusions

Multiparameter fluorescence immunohistochemistry is effective for analyzing immune cells in tumors.
This technique can provide valuable prognostic information in cancer therapy.
Future studies may further elucidate the role of immune cells in cancer progression.

Frequently Asked Questions

What is the significance of T-cell subpopulations in cancer?

T-cell subpopulations can influence tumor immunity and patient prognosis, making their analysis crucial for understanding cancer outcomes.

How does multiparameter fluorescence immunohistochemistry work?

This technique allows for the simultaneous visualization of multiple biomarkers in tissue sections, providing a comprehensive view of immune cell populations.

What types of cancer can this method be applied to?

While this study focuses on oropharyngeal cancer, the technique can be adapted for various types of tumors in cancer research.

What are the implications of this research for cancer therapy?

The findings may help in patient stratification for specific immune therapies, potentially improving treatment outcomes.

Can this method be used on fresh tissue samples?

This study specifically uses archival formalin-fixed paraffin-embedded tissue sections, but similar techniques can be adapted for fresh samples.

What are the challenges associated with this technique?

Challenges may include the complexity of tissue preparation and the need for precise imaging techniques to accurately visualize multiple markers.

L'immunohistochimie à fluorescence multiparamètre peut être utilisée pour évaluer le nombre, la répartition relative et la localisation des populations de cellules immunitaires dans le micro-environnement de la tumeur. Ce manuscrit décrit l'utilisation de cette technique pour analyser les sous-populations de cellules T dans le cancer de l'oropharynx.

L’objectif global de cette expérience est d’effectuer une visualisation immunohistochimique multicolore et un dénombrement de diverses sous-populations de lymphocytes T dans des coupes de tissus d’archives fixés au formol et inclus dans la paraffine à partir d’échantillons de carcinome épidermoïde de l’oropharynx. Cette méthode peut aider à répondre à des questions clés dans le domaine de l’immuno-oncologie, telles que : existe-t-il un lien entre les sous-populations de cellules immunitaires infiltrant le tissu tumoral et le pronostic du patient ? Avec cette technique, vous pouvez visualiser plusieurs biomarqueurs dans une coupe de tissu.

Les implications de cette technique s’étendent au traitement du cancer, car l’évaluation simultanée de plusieurs cellules immunitaires ou de facteurs immunitaires pourrait aider à la stratification des patients pour des thérapies immunitaires spécifiques. Commencez par utiliser une micro-langue pour obtenir des sections de tissu de quatre micromètres d’épaisseur fixées au formol et incluses dans de la paraffine, en posant les rubans de tissu à la surface d’un bain d’eau désionisée de 45 degrés Celsius au fur et à mesure de leur acquisition. Pour capturer les sections, placez une lame de verre dans l’eau, directement sous l’échantillon de tissu et déplacez soigneusement la lame vers le haut en biais.

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