Un modèle de souris de blessures cérébrales traumatiques légères et répétitives légères

L’objectif global de ce modèle murin de lésion cérébrale traumatique (TCC) est de créer une méthode fiable et reproductible pour examiner les mécanismes qui sous-tendent les lésions cérébrales commotionnelles et sous-commotionnelles. Cette méthode facilite l’étude de questions clés dans le domaine des traumatismes crâniens chez la souris, telles que les changements physiologiques qui se produisent dans le cerveau après une commotion cérébrale unique ou répétée. Le principal avantage de cette technique est que le dispositif de blessure est spécialement conçu pour permettre des impacts répétitifs à la tête sans risque de fracture du crâne ou de lésions cérébrales structurelles.

Avant de commencer la procédure, allumez l’air comprimé et initialisez l’impacteur pneumatique à grande vitesse à une pression de 861,85 kilo pascals. Calibrez la machine à la vitesse et au temps de séjour souhaités. Placez la base remplie de gel, de sorte que la ligne médiane soit perpendiculaire à la trajectoire de l’extrémité de l’impacteur et notez les poids de toutes les souris à utiliser.

Ensuite, transférez et anesthésiez la souris dans l’appareil MTBI, en plaçant la tête sur le coussinet de gel avec le crâne perpendiculaire à la pointe de l’impacteur et en collant sur la tête de la souris, pour créer une surface plane et pour vous assurer que les oreilles sont éloignées du site d’impact. Abaissez l’extrémité de l’impacteur en polytétrafluoroéthylène pour l’aligner avec la ligne médiane sagittale au centre de la tête, juste derrière les yeux. La pointe de l’impateur a un diamètre de 10 millimètres et couvrira la majorité de la surface de la tête.

Ajustez l’impacteur jusqu’à ce qu’il touche juste la surface de la tête de la souris. Ensuite, rétractez la pointe et réduisez manuellement la profondeur de déflexion requise à 7,5 millimètres. Maintenant, armez le système de contrôle d’acquisition de données et appuyez sur le bouton de déclenchement pour frapper la tête de la souris.

Immédiatement après l’impact final, transférez la souris sur le plan de travail en position couchée, sans le cône nasal et utilisez un chronomètre pour mesurer la latence du retour du réflexe de redressement afin de déterminer le temps de perte de conscience et le temps de retour, de déambulation spontanée. Une fois qu’il a retrouvé un comportement normal, retournez l’animal dans sa cage d’origine. Le retour du temps du réflexe de redressement est une évaluation neurologique aiguë de la gravité de la blessure qui peut être utilisée pour quantifier la perte de conscience après un TCLC.

Par exemple, les animaux qui reçoivent un seul TCCL présentent une perte de conscience et des temps de déplacement significativement plus élevés que les animaux fictifs. Dans les paradigmes de blessures répétées, la perte de conscience et les temps de marche sont considérablement augmentés tous les jours de test. La coloration IBA 1 pour la microglie et les macrophages révèle des changements dans les profils inflammatoires expérimentaux de souris, après un TCCL répété, par rapport à un seul TCLC ou à des animaux fictifs.

Les animaux TCLC répétés présentent une forte immunoréactivité IBA qui est limitée au tractus optique, sans signe d’inflammation de la matière grise dans le cortex, l’hippocampe ou d’autres zones du cerveau. Une fois maîtrisée, cette technique peut être réalisée en cinq minutes si elle est exécutée correctement.