25 mai 2017
La dégénérescence des disques intervertébraux contribue grandement à la douleur dorsale et à la principale cause d'invalidité dans le monde entier. De nombreux modèles animaux de dégénérescence du disque intervertébral existent. Nous démontrons un modèle ovine de dégénérescence du disque intervertébral, en utilisant un foret, ce qui permet une lésion uniforme du disque et un niveau reproductible de dégénérescence du disque.
L’objectif global de cette approche rétropéritonéale latérale, la méthode de lésion du disque intervertébral au trépan, est de créer un modèle ovin sûr, cohérent et reproductible de disques intervertébraux dégénératifs. Ce modèle de dégénérescence du disque intervertébral lombaire ovin peut aider à répondre à des questions clés dans le domaine de la recherche translationnelle sur la colonne vertébrale en fournissant une autre méthode pour étudier le chemin ou la physiologie de la dégénérescence discale et l’étude potentielle des thérapies régénératives. Le principal avantage de cette approche est qu’elle permet d’obtenir des lésions chirurgicales cohérentes grâce à une approche chirurgicale sûre dans un modèle animal approprié.
Après avoir anesthésié et intubé un mouton et préparé la salle d’opération selon le protocole textuel, placez l’animal sur la table d’opération dans la position latérale droite. À l’aide d’une tondeuse électronique, rasez la région définie au-dessus par les côtes inférieures, en dessous par l’os iliaque, médialement par les apophyses transverses lombaires controlatérales et à environ 10 centimètres latéralement par les apophyses transversales lombaires ipsilatérales. Palper la crête iliaque, les apophyses transverses lombaires et traverser un angle vertébral pour les points de repère de ce site d’incision chirurgicale.
Ensuite, utilisez un stylo stérile pour marquer ces points de repère. Ensuite, avec de la chlorhexidine et de l’alcool iodé antiseptique, désinfectez l’abdomen latéral. Ensuite, placez un champ carré fenêtré stérile sur le site chirurgical et un grand champ carré stérile sur la table au-dessus de la table, suivi des instruments stériles.
Sous un grossissement chirurgical de la loupe et une lampe frontale, injectez un anesthésique local, puis utilisez une lame de scalpel de 22 fixée à un manche à quatre scalpels pour faire une incision longitudinale parallèle et un centimètre en avant d’un à deux apophyses transverses lombaires au-dessus et au-dessous des niveaux de disque intervertébral d’intérêt. À l’aide de la diathermie monopolaire, divisez le tissu sous-cutané sous-jacent et la face latérale de la musculature de la paroi abdominale. Diriger la dissection vers les extrémités des apophyses transverses lombaires, au-dessus et au-dessous des disques intervertébraux d’intérêt.
Ensuite, divisez le fascia thoraco-lombaire longitudinalement au niveau de son attachement aux apophyses transverses. Visualisez et préservez le quadratus lombaire sous-jacent, les muscles soléaires et les faisceaux neurovasculaires traversants. En utilisant la diathermie, maintenez l’hémostase tout au long de la procédure.
Balayez les doigts entre le plan du péritoine et la musculature de la paroi abdominale postérieure au niveau du disque intervertébral exposé pour effectuer une dissection contondante digitale. Maintenant, à l’aide d’un écarteur de diva, rétractez le carré des lombes et les muscles soléaires postérieurs latéralement pour exposer davantage les disques intervertébraux. Ensuite, palpez les corps intervertébraux concaves et les disques intervertébraux convexes.
Positionnez les écarteurs immédiatement sur les disques et assurez-vous que les vaisseaux lombaires ne sont pas endommagés. Ensuite, à l’aide d’un grossissement chirurgical de la loupe avec la lampe frontale, identifiez les vaisseaux lombaires qui sont situés à environ un centimètre caudal de la plaque d’extrémité inférieure. Après avoir effectué une radiographie latérale peropératoire pour confirmer le niveau du disque, en fonction des niveaux de disques souhaités, exposez les disques intervertébraux en séparant les structures environnantes.
Pour les niveaux L trois, quatre et supérieurs, utilisez la dissection contondante numérique pour balayer les attaches musculaires sur les disques. Pour les niveaux L quatre, cinq et inférieurs, utilisez des ciseaux diathermiques bipolaires pour diviser nettement les attaches musculaires tendineuses les plus épaisses sur le disque. Définissez le point de blessure du trépan en observant les extrémités latérales et intérieures gauches du disque intervertébral.
Le niveau du disque doit être confirmé par une radiographie latérale avant que le trépan ne se blesse. Insérez un foret à pointe de finition dans la perceuse électrique. Assurez-vous que le diamètre du foret est légèrement inférieur à la hauteur du disque intervertébral.
Par exemple, 3,5 millimètres pour les disques intervertébraux lombaires chez les moutons de 60 à 70 kilogrammes. Appliquez une butée de foret pour obtenir une longueur de foret non protégée d’environ la moitié du diamètre du disque intervertébral lombaire. Par exemple, 12 millimètres pour les disques intervertébraux lombaires chez les moutons de 60 à 70 kilogrammes.
Ensuite, appliquez le foret sur le point d’entrée et dirigez-le dans la trajectoire légèrement crânienne vers le centre du disque intervertébral, ce qui minimisera le risque de blessure à la plaque d’extrémité. Avec la perceuse à faible puissance, avancez lentement la mèche dans le disque intervertébral pendant une seconde. Si une résistance excessive est rencontrée, ajustez la trajectoire de manière légèrement crânienne ou caudale.
Une fois l’hémostase obtenue, utilisez la solution de Ringer pour irriguer la plaie. Ensuite, effectuez une fermeture en couches, de préférence à l’aide de sutures tressées synthétiques résorbables 2-0 sur les tissus de la paroi abdominale latérale et de sutures sous-cuticulaires synthétiques résorbables continues 3-0 non teintées sur la peau. La photo ci-dessous montre une coupe préopératoire du plan sagittal d’une IRM 3T d’une moitié lombaire ovine au disque intervertébral lombo-sacré, sans signe de dégénérescence significative du disque intervertébral préopératoire.
Cette radiographie latérale peropératoire confirme le niveau du disque intervertébral et permet de calculer l’indice de hauteur du disque. L’aspect morphologique grossier présenté ici montre que le trépan pénètre dans l’anneau fibreux et s’étend dans le noyau pulpeux. La blessure est également évidente dans cette IRM 9,4T.
Lors de cette approche, il est important de diriger le foret vers le crâne et d’avancer lentement le foret pour minimiser le risque de blessure à la plaque d’extrémité. Après avoir regardé cette vidéo, vous devriez avoir une bonne compréhension de la façon de produire des lésions de foret dans le modèle ovin par une approche rétropéritonéale latérale. N’oubliez pas que travailler avec des scalpels et des cautères peut être dangereux.
L’équipement de protection individuelle et les précautions de sécurité appropriées doivent être suivis en tout temps. Il est important de maintenir la stérilité chirurgicale.
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Cette étude présente un nouveau modèle ovins de dégénérescence du disque intervertébral utilisant une technique de perçage. Ce modèle vise à faciliter la recherche sur la physiopathologie de la dégénérescence discale et sur des thérapies régénératives potentielles.
La mise en place de modèles précliniques fiables est essentielle pour réduire les risques liés à la validation des cibles thérapeutiques dans le domaine des traitements musculosquelettiques. Ce modèle de dégénérescence discale ovine offre un système reproductible pour évaluer les mécanismes physiopathologiques et les interventions thérapeutiques. Sa pertinence translationnelle soutient les tests d'hypothèses en phase précoce ainsi que la priorisation des portefeuilles de recherche et développement dans le domaine de la colonne vertébrale.
Le modèle s'intègre aux flux de travail de découverte en fournissant un système biologique validé pour l'évaluation ciblée orientée par des hypothèses et le criblage mécanistique.