25 mai 2017
La dégénérescence des disques intervertébraux contribue grandement à la douleur dorsale et à la principale cause d'invalidité dans le monde entier. De nombreux modèles animaux de dégénérescence du disque intervertébral existent. Nous démontrons un modèle ovine de dégénérescence du disque intervertébral, en utilisant un foret, ce qui permet une lésion uniforme du disque et un niveau reproductible de dégénérescence du disque.
L'objectif général de cette méthode d'approche rétropéritonéale latérale avec lésion du disque intervertébral au foret est de créer un modèle ovins sûr, constant et reproductible de disques intervertébraux dégénératifs. Ce modèle de dégénérescence du disque intervertébral lombaire chez l'ovin peut aider à répondre à des questions clés dans le domaine de la recherche translationnelle sur la colonne vertébrale en proposant une méthode supplémentaire pour étudier la physiopathologie de la dégénérescence discale et permettre l'exploration potentielle de thérapies régénératrices. Le principal avantage de cette approche est qu'elle permet d'induire une lésion chirurgicale reproductible par une voie chirurgicale sûre, dans un modèle animal approprié.
Après avoir anesthésié et intubé un mouton et préparé la salle d'opération conformément au protocole décrit, placer l'animal sur la table d'opération en position latérale droite. À l’aide de tondeuses électriques, raser la région délimitée supérieurement par les dernières côtes, inférieurement par l’os iliaque, médialement par les apophyses transverses lombaires controlatérales et environ 10 centimètres latéralement aux apophyses transverses lombaires homolatérales. Palper la crête iliaque, les apophyses transverses lombaires et un angle vertébral afin d’identifier les repères anatomiques pour ce site d’incision chirurgicale.
Ensuite, utilisez un stylo stérile pour marquer ces repères. Puis, désinfectez l'abdomen latéral à l'aide d'une solution antiseptique à base de chlorhexidine et d'iode alcoolé. Placez ensuite un champ opératoire stérile fenêtré sur le site chirurgical et un grand champ opératoire stérile carré sur la table située au-dessus, suivis des instruments stériles.
Sous amplification chirurgicale au loupe et avec un éclairage frontal, injecter un anesthésique local, puis utiliser une lame de scalpel n°22 fixée à un manche de scalpel n°4 pour pratiquer une incision longitudinale parallèle et située à un centimètre en avant d'un à deux apophyses transverses lombaires situées au-dessus et au-dessous des niveaux discaux intervertébraux d'intérêt. À l’aide d’un bistouri diathermique monopolaire, diviser le tissu sous-cutané sous-jacent et la partie latérale de la musculature de la paroi abdominale. Orienter la dissection vers les extrémités des apophyses transverses lombaires, situées au-dessus et au-dessous des disques intervertébraux d’intérêt.
Ensuite, diviser longitudinalement l'aponévrose thoracolombaire au niveau de son insertion sur les apophyses transverses. Visualiser et préserver le muscle carré des lombes, les muscles soléaires ainsi que les faisceaux neurovasculaires traversants. À l'aide de la diathermie, maintenir l'hémostase tout au long de la procédure.
Passer les doigts entre le plan du péritoine et la musculature de la paroi abdominale postérieure au niveau des disques intervertébraux exposés afin d'effectuer une dissection émoussée digitale. Ensuite, à l’aide d’un rétracteur diva, rétracter postéro-latéralement les muscles carré des lombes et soléaire pour mieux exposer les disques intervertébraux. Puis, palper les corps vertébraux concaves et les disques intervertébraux convexes.
Positionner les rétracteurs directement au-dessus des disques et veiller à ne pas endommager les vaisseaux lombaires. Ensuite, à l’aide d’une loupe chirurgicale éclairée par une lampe frontale, repérer les vaisseaux lombaires situés à environ un centimètre en position caudale par rapport à la plaque inférieure. Après avoir effectué une radiographie latérale peropératoire afin de confirmer le niveau discal, exposer les disques intervertébraux en séparant les structures environnantes, selon les niveaux discaux souhaités.
Pour les niveaux L3, L4 et supérieurs, utilisez une dissection émoussée numérique pour écarter les insertions musculaires situées au-dessus des disques. Pour les niveaux L4, L5 et inférieurs, utilisez des ciseaux diathermiques bipolaires pour sectionner précisément les insertions musculaires tendineuses plus épaisses recouvrant le disque. Définissez le point de lésion par forage en observant les extrémités latérales gauches et antérieures du disque intervertébral.
Le niveau du disque doit être confirmé par une radiographie latérale avant de percer. Insérez un foret à pointe hélicoïdale dans la perceuse électrique. Veillez à ce que le diamètre du foret soit légèrement inférieur à la hauteur du disque intervertébral.
Par exemple, 3,5 millimètres pour les disques intervertébraux lombaires chez des moutons de 60 à 70 kilogrammes. Appliquer un butée de foret afin d'obtenir une longueur de foret non protégée d'environ la moitié du diamètre du disque intervertébral lombaire. Par exemple, 12 millimètres pour les disques intervertébraux lombaires chez des moutons de 60 à 70 kilogrammes.
Ensuite, appliquez le foret au point d'entrée et dirigez-le selon une trajectoire légèrement crâniale par rapport au centre du disque intervertébral, ce qui minimisera le risque de lésion de la plaque vertébrale. Avec le foret en puissance faible, faites progresser lentement le foret dans le disque intervertébral pendant une seconde. Si une résistance excessive est rencontrée, ajustez la trajectoire légèrement vers le haut ou vers le bas.
Une fois l'hémostase obtenue, utiliser la solution de Ringer pour irriguer la plaie. Ensuite, réaliser une fermeture en couches, de préférence avec des fils synthétiques résorbables tressés de calibre 2-0 pour les tissus de la paroi abdominale latérale et un point continu sous-cutané résorbable synthétique non teint de calibre 3-0 pour la peau. On voit ici une coupe sagittale préopératoire provenant d'une IRM à 3 T d'une moitié lombaire ovine allant jusqu'au disque intervertébral lombo-sacré, sans signe de dégénérescence discale intervertébrale préopératoire significative.
Cette radiographie latérale peropératoire confirme le niveau du disque intervertébral et permet le calcul de l'indice de hauteur du disque. L'aspect morphologique macroscopique présenté ici met en évidence le trajet de la lésion provoquée par le foret traversant l'anneau fibreux et s'étendant jusqu'au noyau pulpeux. La lésion est également visible sur cette IRM à 9,4 T.
Lors de la mise en œuvre de cette approche, il est important de diriger le foret en direction crâniale et de faire avancer lentement le foret afin de minimiser le risque de lésion de la plaque vertébrale. Après avoir visionné cette vidéo, vous devriez bien comprendre comment provoquer une lésion par foret sur un modèle ovins par une approche rétropéritonéale latérale. N’oubliez pas que le travail avec des scalpels et des instruments de cautérisation peut présenter des dangers.
Les équipements de protection individuelle et les précautions de sécurité appropriées doivent être respectés en tout temps. Il est important de maintenir la stérilité chirurgicale.
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Cette étude présente un nouveau modèle ovins de dégénérescence du disque intervertébral utilisant une technique de perçage. Ce modèle vise à faciliter la recherche sur la physiopathologie de la dégénérescence discale et sur des thérapies régénératives potentielles.
La mise en place de modèles précliniques fiables est essentielle pour réduire les risques liés à la validation des cibles thérapeutiques dans le domaine des traitements musculosquelettiques. Ce modèle de dégénérescence discale ovine offre un système reproductible pour évaluer les mécanismes physiopathologiques et les interventions thérapeutiques. Sa pertinence translationnelle soutient les tests d'hypothèses en phase précoce ainsi que la priorisation des portefeuilles de recherche et développement dans le domaine de la colonne vertébrale.
Le modèle s'intègre aux flux de travail de découverte en fournissant un système biologique validé pour l'évaluation ciblée orientée par des hypothèses et le criblage mécanistique.