Le sauvetage et la caractérisation du virus recombinant à partir d'un nouveau clone infectieux du virus Zika du monde

L’objectif global de cette procédure est de récupérer le virus infectieux à partir d’un clone d’ADN Z du virus Zika en deux parties. Cette méthode peut répondre à des questions clés dans le domaine de la flavivirologie, telles que les stratégies vaccinales, la pathogenèse, la transmission et l’évolution du virus. Le principal avantage de cette technique est que le système en deux parties est plus stable que les approches pleine longueur.

Bien que cette méthode puisse donner un aperçu du virus Zika, elle peut également être appliquée à d’autres systèmes viraux qui se sont avérés difficiles à cloner en raison de l’instabilité plasmidique. James Weger, un post-doctorant de mon laboratoire, fera la démonstration de la procédure. Commencez par mettre en place des réactions de digestion pour les deux plasmides codant pour le génome du virus Zika, P1 et P2. Digérer 3,3 microgrammes de P1 avec ApaL1 et BamH1 High Fidelity en présence d’une phosphatase compétente dans un volume final de 100 microlitres.