A Standardized Approach for Multispecies Purification of Mammalian Male Germ Cells by Mechanical Tissue Dissociation and Flow Cytometry

Ana C. Lima; Min Jung; Jannette Rusch; Abul Usmani; Alexandra M. Lopes; Donald F. Conrad

doi:10.3791/55913

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Une approche standardisée pour la purification multispécifique des cellules germinales masculines de mammifères par dissociation mécanique des tissus et cytométrie de flux

A Standardized Approach for Multispecies Purification of Mammalian Male Germ Cells by Mechanical Tissue Dissociation and Flow Cytometry

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Biologie du développement

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A Standardized Approach for Multispecies Purification of Mammalian Male Germ Cells by Mechanical Tissue Dissociation and Flow Cytometry

Une approche standardisée pour la purification multispécifique des cellules germinales masculines de mammifères par dissociation mécanique des tissus et cytométrie de flux

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08:46 min

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July 12, 2017

DOI:

10.3791/55913-v

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10.3791/55913-v

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08:46 min

July 12, 2017

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Ana C. Lima*^1,2,3,4, Min Jung*¹, Jannette Rusch¹, Abul Usmani¹, Alexandra M. Lopes^3,4, Donald F. Conrad¹

¹Department of Genetics,Washington University School of Medicine ²Graduate Program in Areas of Basic and Applied Biology (GABBA), Abel Salazar Institute of Biomedical Sciences,University of Porto ³Instituto de Investigação e Inovação em Saúde,University of Porto ⁴IPATIMUP – Instituto de Patologia e Imunologia Molecular da Universidade do Porto ⁵Department of Pathology & Immunology,Washington University School of Medicine

Summary

Ce travail décrit la standardisation d'une méthode pour obtenir des populations de cellules germinales purifiées à partir d'un tissu testiculaire de différentes espèces de mammifères. C'est un protocole simple qui combine la dissociation des testicules mécaniques, la coloration avec Hoechst-33342 et l'iodure de propidium, et le triage FACS, avec de larges applications dans des études comparatives de la biologie de la reproduction masculine.