Une approche standardisée pour la purification multispécifique des cellules germinales masculines de mammifères par dissociation mécanique des tissus et cytométrie de flux

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12 juillet 2017

10.3791/55913-v

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Ana C. Lima^*¹^,²^,³^,⁴ , Min Jung^*¹ , Jannette Rusch¹ , Abul Usmani¹ , Alexandra M. Lopes³^,⁴ , Donald F. Conrad¹

¹Department of Genetics, Washington University School of Medicine, ²Graduate Program in Areas of Basic and Applied Biology (GABBA), Abel Salazar Institute of Biomedical Sciences, University of Porto, ³Instituto de Investigação e Inovação em Saúde, University of Porto, ⁴IPATIMUP - Instituto de Patologia e Imunologia Molecular da Universidade do Porto, ⁵Department of Pathology & Immunology, Washington University School of Medicine

^* These authors contributed equally

Ce travail décrit la standardisation d'une méthode pour obtenir des populations de cellules germinales purifiées à partir d'un tissu testiculaire de différentes espèces de mammifères. C'est un protocole simple qui combine la dissociation des testicules mécaniques, la coloration avec Hoechst-33342 et l'iodure de propidium, et le triage FACS, avec de larges applications dans des études comparatives de la biologie de la reproduction masculine.