27 septembre 2017
Nous décrivons ici des méthodes pour le traitement néonatal capsaïcine induire la dermatite atopique chez les rats et exposition de formaldéhyde vaporisé pour étudier les effets de l’inhalation du formaldéhyde sur la dermatite atopique.
L’objectif global de cette procédure est d’induire des symptômes semblables à ceux de la dermatite atopique par un traitement néonatal à la capsaïcine. Et pour mesurer l’effet du formaldéhyde sur les symptômes de type dermatite atopique. Cette méthode peut aider à répondre à une question clé liée à la physiopathologie de la dermatite atopique dans le domaine dermatologique.
L’avantage majeur de cette technique est l’induction de symptômes semblables à ceux de la dermatite atopique et la mise en place d’un système d’exposition important avec les incréments. Pour préparer une solution de capsaïcine de cinq milligrammes par millilitre, ajoutez un millilitre de Tween 80, un millilitre d’éthanol à 100 % et 50 milligrammes de capsaïcine dans un tube conique de 15 millilitres. Ajoutez ensuite huit millilitres de solution saline normale dans le tube conique.
Fermez et secouez vigoureusement le tube jusqu’à ce qu’aucune couche séparée ne soit visible. Il est essentiel d’administrer la capsaïcine entre 12 et 48 heures après la naissance. Injectez la solution de capsaïcine dans le tissu sous-cutané sur la ligne médiane et l’arrière du cou d’un rat néonatal Sprague Dawley.
Pour éviter l’arrêt respiratoire dû à l’injection de capsaïcine, placez les nouveau-nés dans une chambre à oxygène jusqu’à ce que la respiration redevienne normale. Si nécessaire, poussez la poitrine des nouveau-nés pour favoriser la respiration. Commencez par préparer des chambres en plastique équipées d’un miroir pour permettre une couverture complète pour l’observation et des trous pour permettre aux rats de respirer.
Placez les rats dans la chambre en plastique et couvrez le plafond de la chambre avec un objet lourd pour empêcher le couvercle de s’ouvrir. Ensuite, installez une caméra vidéo numérique pour enregistrer simultanément les vues miroir et les vues de face des rats. Enregistrez ensuite les comportements spontanés des rats pendant une heure.
Lisez les clips vidéo et comptez le nombre de comportements de grattage tels que ceux présentés par le rat à droite. Et le rat au centre. Pour noter les lésions, identifiez l’étendue et la gravité de la dermatite dans les oreilles et d’autres parties d’un rat anesthésié.
Définissez la taille unitaire de l’étendue des lésions cutanées comme étant de 0,25 centimètre carré. Et la gravité des lésions cutanées à l’aide de ce tableau. Préparez une boîte en verre acrylique dotée de deux connecteurs sur les côtés opposés.
Pour la circulation du gaz formaldéhyde, la sortie de ventilation doit être placée plus haut que la sortie d’admission de gaz. Connectez les tubes aux deux connecteurs. Faites passer le tube de sortie de ventilation jusqu’à la hotte de circulation ou à l’extérieur du bâtiment pour l’émission du gaz.
Et connectez l’autre tube d’entrée à un régulateur d’oxygène médical. Placez une cage à rats conventionnelle à l’intérieur de la boîte en verre acrylique. Mettez les rats d’une semaine dans la cage, puis fermez la boîte en verre acrylique aussi hermétiquement que possible pour éviter les fuites de gaz.
Appliquez un film alimentaire pour envelopper la chambre et fermez la chambre avec un couvercle caoutchouté pour une étanchéité étanche. Ajoutez une solution de formaldéhyde à 0,5 % dans la bouteille de l’humidificateur connectée au régulateur d’oxygène médical. N’oubliez pas que travailler dans le formaldéhyde peut être extrêmement dangereux.
Et des précautions telles que des masques et des gants doivent toujours être prises en effectuant cette procédure. Ensuite, allumez le régulateur et réglez le débit sur cinq litres par minute. Exposez les rats au gaz formaldéhyde pendant une période de deux heures.
Voici des photographies représentatives d’une inflammation cutanée chez le rat traité à la capsaïcine. L’évolution chronologique de la dermatite chez les rats traités à la capsaïcine est illustrée ici. Cette image retrace le développement chronologique des comportements de grattage chez les rats traités à la capsaïcine.
Il s’agit d’une image représentative des lésions cutanées récurrentes de rats de 16 semaines traités à la capsaïcine. Les taux sériques d’IgE sont significativement élevés chez les animaux traités à la capsaïcine. Une élévation significative de l’expression de l’ARNm de l’IL-4 est également observée chez les animaux traités à la capsaïcine.
Une élévation significative de l’expression de l’ARNm de l’IL-13 chez les animaux traités à la capsaïcine est illustrée ici. Ces photographies représentatives montrent une dermatite atopique après la cinquième semaine de traitement à l’aide de 1,2 partie par million. Et 0,8 partie par million de formaldéhyde par rapport au traitement contrôlé à l’air.
L’exposition à 1,2 partie par million de formaldéhyde mais pas à 0,8 partie par million de formaldéhyde a considérablement exacerbé le prurit dans le modèle de dermatite atopique traité à la capsaïcine. Des résultats similaires ont été observés lorsque la dermatite a été mesurée. Une augmentation des taux sériques d’IgE a été observée dans le modèle de rat MA traité à la capsaïcine avec une exposition au formaldéhyde de 1,2 partie par million.
Après cette procédure, d’autres matériaux comme la solution de gylcol peuvent être utilisés pour répondre à des questions supplémentaires liées aux effets de certaines matières sur la dermatite atopique. Après ces développements, cette technique a ouvert la voie aux chercheurs dans le domaine de la dermatologie pour explorer le rôle des facteurs environnementaux dans la pathogenèse de la dermatite atopique.
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Cet article décrit des méthodes permettant d'induire des symptômes semblables à ceux de la dermatite atopique chez des rats par un traitement néonatal à la capsaïcine et d'étudier les effets de l'inhalation de formaldéhyde. L'étude vise à améliorer la compréhension de la physiopathologie de la dermatite atopique.
Les facteurs environnementaux déclencheurs dans la dermatite atopique restent un élément inconnu essentiel en dermatologie translationnelle, affectant la fiabilité prédictive du développement thérapeutique. Ce modèle chez le rat permet une évaluation systématique des expositions environnementales, telles que le formaldéhyde, sur l'évolution de la maladie et la réponse des biomarqueurs. Cette approche soutient la réduction des risques mécanistiques et éclaire les décisions précoces relatives au portefeuille de projets dans les filières de dermatologie.
Ce modèle fait le lien entre la découverte précoce et la validation préclinique en permettant un test d'hypothèses contrôlé des facteurs environnementaux dans la progression de la dermatite atopique.