Échec de la vérification dans l’industrie pharmaceutique en raison de la malpropreté de Surface en acier inoxydable de nettoyage

L’objectif global de ce travail est d’obtenir des récupérations élevées et reproductibles de résidus pharmaceutiques à la surface des coupons d’acier inoxydable en appliquant les meilleures pratiques pour le développement de méthodes de nettoyage analytique pour les petites molécules, les protéines thérapeutiques et les anticorps. Cette méthode peut aider à répondre à des questions clés dans le domaine de la vérification du nettoyage dans l’industrie pharmaceutique, par exemple pourquoi la vérification du nettoyage des équipements de fabrication échoue. Le principal avantage de cette étude est qu’elle montre la procédure à suivre pour nettoyer correctement la surface des coupons d’acier inoxydable utilisés pour la validation des méthodes analytiques.

Pour commencer cette expérience, préparez des solutions d’échantillon du médicament dissous dans le diluant de votre choix après avoir calculé la limite de nettoyage d’un médicament. Nettoyez les coupons en acier inoxydable en les rinçant à l’eau et en essuyant la surface deux fois pendant 10 à 15 secondes. Ensuite, répétez cette étape de rinçage et d’essuyage avec du méthanol pour éliminer tout dépôt résiduel.

Pour effectuer l’approche de nettoyage avancée à l’aide de solutions propres en place, plongez les coupons dans de l’eau de chromatographie liquide haute performance ou de qualité HPLC et sonicate pendant deux minutes. Plongez les coupons dans une solution détergente alcaline à 0,1 % dans de l’eau de qualité HPLC et du sonicate pendant deux minutes. Plongez à nouveau les coupons dans de l’eau HPLC et répétez la sonication pendant deux minutes.

Ensuite, immergez-les dans une solution détergente acide à 0,1 % dans de l’eau HPLC et du sonicate pendant deux minutes. Terminez par une sonication de deux minutes dans de l’eau HPLC. Ensuite, à l’aide d’un ruban adhésif double face, montez les coupons en acier inoxydable au fond d’un bécher en plastique de 250 millilitres.

Tenez le bécher pendant la procédure pour faciliter l’épilation et l’écouvillonnage et pour éviter les accidents. À l’aide d’une pipette à déplacement positif, perfuser un volume de médicament défini, à la concentration et dans la formulation souhaitées, en un tourbillon sur la surface du coupon. Une fois que la surface du coupon est sèche, trempez un coton-tige sec dans un flacon avec deux millilitres de diluant.

Appuyez l’écouvillon contre l’intérieur du flacon pour éliminer l’excès de solvant. Utilisez des mouvements réguliers et chevauchants d’un côté à l’autre pour essuyer fermement la surface du coupon avec un côté de l’écouvillon humide, jusqu’à ce que la surface d’essai totale de 50 centimètres carrés soit essuyée. Utilisez le même côté de l’écouvillon pour répéter le processus d’essuyage.

Tamponnez deux fois chacun des quatre bords du coupon. Faites pivoter le coupon de 90 degrés et utilisez l’autre côté de l’écouvillon, en tournant maintenant le sens de l’essuyage de 90 degrés. Répétez le nettoyage en utilisant ce côté de l’écouvillon de la même manière, en vous assurant d’essuyer deux fois les quatre bords du coupon.

Après l’essuyage de la surface, utilisez des ciseaux pour couper la tête de l’écouvillon dans le flacon de solvant. Après cela, répétez toute la procédure d’écouvillonnage à l’aide d’un deuxième écouvillon, tout en tournant le coupon de 90 degrés vers la même direction choisie précédemment. Ensuite, sonicez le flacon contenant deux têtes d’écouvillon pendant cinq minutes.

Ensuite, faites tourbillonner la fiole pendant 10 secondes. Enfin, transférez la solution dans un flacon HPLC et étiquetez-le comme solution de travail. Pour récupérer l’échantillon, préparez les solutions de contrôle en mélangeant 200 microlitres de chaque dopation de coupon ou solution d’échantillon avec 1 800 microlitres de diluant.

Utilisez ces solutions pour exécuter la chromatographie selon le protocole texte. Calculez la récupération de la solution de travail par écouvillon en fonction de la surface relative sous les pics des solutions de travail et de contrôle. Répétez ce processus pour trois coupons afin de calculer le taux de récupération moyen et l’écart-type relatif.

Avant que les coupons n’aient été nettoyés, les résultats de récupération pour les différents niveaux de pics étaient incohérents, indépendamment du taux d’excipient de l’ingrédient pharmaceutique actif ou de l’API, des analystes différents ou même du jour différent pour le même analyste. La majorité des résultats de récupération présentaient un écart-type relatif élevé. La variabilité observée dans la récupération n’a pas été éliminée lorsque plusieurs paramètres différents ont été ajustés, notamment la technique d’écouvillonnage, le diluant, le solvant de dopage, le pH du spike et du diluant, la technique de dopage et la technique d’extraction.

La différence entre la récupération individuelle à chaque surface du coupon et la récupération moyenne montre que la récupération moyenne est différente d’une surface de coupon à une autre, par conséquent, il est très probable que la variabilité observée provienne des différences entre les surfaces du coupon. Après avoir suivi le nettoyage des coupons décrit dans ce protocole, les résultats de récupération ont été reproductibles d’un essai à l’autre, avec une différence minimale de récupération entre les coupons. Le nettoyage des coupons effectué ici a permis d’obtenir des taux de récupération supérieurs à 90 %De plus, les valeurs d’écart-type relatif pour chaque niveau de dopage étaient acceptables et inférieures aux résultats obtenus avant le nettoyage.

Une fois maîtrisé, le nettoyage des coupons peut se faire en moins de 30 minutes, s’il est effectué correctement. Lors de la tentative de cette procédure, il est important de se rappeler comment augmenter et récupérer correctement sans perdre l’analyse de l’intérêt. Après avoir regardé cette vidéo, vous devriez avoir une bonne compréhension de la façon de nettoyer correctement les surfaces en acier inoxydable pour obtenir des récupérations élevées et reproductibles des résidus.

Après son développement, cette technique a ouvert la voie aux chercheurs de l’industrie pharmaceutique pour fournir des données de nettoyage fiables pour les processus de fabrication.