Name: Enregistrement simultané d’électroencéphalographie co localisée et le potentiel de champ Local dans rongeurs (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2017-11-30T12:30:00.000+00:00
Duration: 8 min 31 s
Description: Apprenez à enregistrer simultanément l'électroencéphalographie et le potentiel de champ local chez le rat anesthésié. Cette méthode permet d'étudier les interactions entre signaux corticaux sans distorsion significative.

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Nous tenons à remercier Andrew Cripps et l’unité de BioResource à l’Université de Reading. Cette recherche a été financée par le BBSRC (numéro de licence : BB/K010123/1). Données associées à cet ouvrage sont disponibles gratuitement depuis Y.Z. (ying.zheng@reading.ac.uk).

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Les auteurs n’ont rien à divulguer.

Nous avons décrit une procédure expérimentale pour l’enregistrement simultané des signaux EEG et LFP co localisée d’un rat anesthésié isoflurane en réponse à la stimulation de coussin moustaches. Une microélectrode a été insérée dans le néocortex par une ouverture dans l’électrode EEG araignée a été alignée sur un trou foré dans le crâne. L’électrode a été fixé au crâne par un conducteur et adhésif EEG coller23. Le cône de nez pour l’administration d’isoflurane a été modifié afin que les électrodes de stimulation pourrait être insérée dans le coussin moustache avec facilité.
La pâte de l’EEG a été efficace pour monter l’électrode araignée solidement sur le crâne, tout en offrant l’excellente conductivité électrique toute la journée expérimentale sans la nécessité d’une application supplémentaire de pâte. Il a remplacé l’utilisation indésirable de colle pour fixer la périphérie de l’électrode d’araignée sur le crâne, car la colle est non-conducteur et peut augmenter l’impédance de l’électrode, si elle s’étend entre le crâne et l’électrode. Pâte d’EEG a un certain nombre d’avantages par rapport aux gel EEG qui est difficile à forme autour du trou de trépan et puisse sécher au cours de l’expérience, ayant pour résultat des signaux EEG pauvres.
Comme le rat a été placé dans une cage de Faraday, bruit électrique en raison de l’environnement a été considérablement atténuée. Cependant, parfois le signal neuronal était encore assez bruyant. Dans la plupart des cas, cela était dû à l’électrode de référence pas solidement positionné et devait donc être réajustée ou EEG plus pâte utilisée. Un autre problème courant est que la LFP évoquée était faible amplitude. Cela pourrait être dû à la microélectrode ne pas positionnée au centre de la région corticale activée par les électrodes stimulants. Au lieu de ré-insérer la microélectrode, qui pourrait causer plus de dommages aux neurones les, nous avons ajusté habituellement la position des électrodes stimulants du coussin moustaches jusqu'à une amplitude raisonnable de la LFP (> 3 mV) a pu être observée.
Une des limites de la technique est la faible résolution spatiale de l’électrode de l’araignée, qui a un diamètre de 6 mm. C’est grand par rapport à la taille du crâne du rat. Malheureusement, l’électrode d’araignée utilisé ici est le plus petit disponible à la vente. Il sera souhaitable de réduire le diamètre de l’électrode de l’araignée à 2-4 mm, ce qui augmente la spécificité spatiale des enregistrements EEG, faisant la comparaison entre le signal EEG et la supragranular de LFP signal moins ambiguë.
Plusieurs étapes cruciales dans le protocole requièrent une attention particulière. Le premier est l’insertion de la microélectrode à travers le trou de trépan. La dure-mère est autrement intacte, la précision de l’insertion est cruciale. Une légère résistance à la pointe de l’électrode signifie généralement que l’électrode n’est pas positionné correctement. Il doit être relevé, position ajustée et réinsérés. La seconde est la position du cône de nez sur le rat. Il ne doit pas être trop lâche, comme l’isoflurane s’échappera du cône. Il également est trop serré, car cela peut obstruer les narines du rat et causer des difficultés respiratoires. Une attention particulière est également tenue de veiller à ce que l’amplitude de l’enregistrement de l’EEG est beaucoup plus petit (habituellement de 5 à 10 fois moins) que l’enregistrement de canal du haut du LFP. Si elles sont similaires, c’est une indication que la sonde de l’EEG est entré en contact direct ou indirect avec la microélectrode. Un contact indirect est habituellement par l’intermédiaire du liquide céphalorachidien (LCR) qui parfois se remplit le trou foré dans le crâne. La conductivité du CSF est généralement 100 fois celui du crâne24,25. Ainsi, si le niveau du LCR à l’intérieur du trou de trépan est suffisamment élevé, il peut faire contact avec l’électrode de l’araignée. Pour éviter cela, le trou doit être nettoyé fréquemment avec des éponges de coton super absorbant comme les lances d’absorption.
L’effet d’un trou (diamètre < 2 mm) dans le crâne sur l’EEG enregistrement entourant le trou a été étudiée en plaçant une autre électrode araignée sur le crâne intact au sommet du cortex ipsi-latérale baril afin que les enregistrements d’EEG bilatérales pourraient être comparées. Les résultats affichés dans la Figure 9 et Figure 10, suggèrent l’effet négligeable au niveau de signification de 0,05. Autres facteurs affectant l’amplitude de l’EEG comprennent bien la pâte de l’EEG a été en contact avec le crâne, comment ferme l’électrode a été pressé à la pâte et l’étendue spatiale de la pâte d’EEG sur le crâne.
Il convient également de noter que le protocole décrit ici enregistré crâne EEG, qui diffère du cuir chevelu EEG utilisé dans les études chez l’homme EEG. Le cuir chevelu se comporte comme une résistance ou un filtre passe-bas, qui permettra de réduire le rapport signal sur bruit de l’EEG d’enregistrement supplémentaires.
Enfin, la comparaison de la dynamique temporelle de l’ERP et celui de la LFP évoquée à travers les couches corticales suggèrent que les potentiels évoqués somatosensoriels reflètent mieux la LFP dans la couche supragranular du cortex que celle dans le granulé et infragranular couches. C’est en accord avec notre précédent travail6, démontrant que le segment initial (P1) de l’ERP est lié à l’actuel retour résultant de l’afflux au excitateurs synaptique actuel se trouvant dans la couche granuleuse, tandis que la baisse) N1) en ERP peut être liée à l’arrivée tardive des couches afférente à la corticale thalamiques II/III ou anticipatif signaux de couches corticales plus profondes. En conclusion, les enregistrements simultanés d’EEG/LFP peuvent améliorer la compréhension de la genèse de neurones de l’EEG et faciliter la modélisation mathématique de l’EEG en ce qui concerne les signaux neuronaux entre couches corticales.

Il est généralement admis que le LFPs enregistrés principalement par l’intermédiaire de microélectrodes reflètent la somme pondérée des synchronisée activités synaptiques excitatrices et inhibitrices des populations locales de neurones pyramidaux1,2,3 , 4. nos recherches récentes ont démontré que le profil du signal LFP pourrait être divisé en composants de l’excitation et l’inhibition de5,6. Cependant, LFP est normalement mesurée via une procédure invasive, elle ne convient pas pour la plupart des études du cerveau humain.
En revanche, l’EEG est une technique non invasive pour mesurer l’activité électrique du cerveau. Il est largement utilisé comme un outil de diagnostic pour certains types de maladies neurologiques comme l’épilepsie et comme un outil de recherche en études cognitives humaines. Malgré sa popularité, une limitation majeure de l’EEG est l’incapacité d’interpréter ses profils temporels précisément en ce qui concerne les signaux neuronaux sous-jacents7,8,9.
De plus en plus, les modèles mathématiques de l’EEG sont développées pour améliorer la compréhension du cerveau fonction10,11,12,13,14,15. La plupart des modèles existants de EEG est élaborée en fonction sur le montage caractéristiques de domaine de fréquence du modèle prédit la sortie vers le spectre de données EEG au cours de l’activité spontanée, et très peu de modèles EEG peut générer des potentiels évoqués sensitifs réalistes. Dans ce contexte, des enregistrements simultanés d’EEG et LFP fournira un aperçu important et contraintes pour développer des modèles mathématiques plus précis de l’EEG.
Pour répondre à ce besoin d’enregistrements simultanés afin d’étudier l’origine neurale de l’EEG, nous avons développé une méthodologie permettant d’enregistrer simultanément les EEG et multi-laminaire LFP signaux dans le néocortex du rat anesthésié. La configuration est similaire à des études antérieures de EEG/LFP simultanées menées en primates16,17. Nous avons examiné l’effet d’un trou foré dans le crâne sur les enregistrements EEG entourant le trou, en comparant les enregistrements EEG bilatérales (c.-à-d., un hémisphère avec un trou de trépan, l’autre hémisphère intact) en l’absence de sensoriel stimulation. Nos résultats démontrent que concurrentes enregistrements EEG/LFP peuvent être effectuées simplement et efficacement, avec petite distorsion du signal EEG depuis le trou dans le crâne.

<table><tbody><tr><td>Femelle Lister Hood rats</td><td>Charles Rivers</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Spider électrode</td><td>Unimed Electrode Supplies Ltd</td><td>SCS24-426</td><td></td></tr><tr><td>Pâte EEG : Ten20</td><td>Unimed Electrode Supplies Ltd</td><td>10-20-S</td><td></td></tr><tr><td>Support stéréotaxique avec bras micromanipulateurs doubles : Cadre stéréotaxique à double manipulateur avec 18&deg ; Barres d’oreille</td><td>WPI (World Precision Instruments)</td><td>502603</td><td></td></tr><tr><td>Isoflurane</td><td>National Vet Services Limited</td><td>50878</td><td></td></tr><tr><td>Cône nasal en plastique dur : Masque à gaz d’anesthésie pour rat</td><td>WPI</td><td>502054</td><td></td></tr><tr><td>Système d’anesthésie isoflurane pour petits animaux</td><td>WPI</td><td>EZ-B800A</td><td></td></tr><tr><td>Coussin chauffant thermostatique : Système de couverture pour rats 230V</td><td>Harvard Apparatus UK</td><td>50-7221-F</td><td></td></tr><tr><td>Pommade ophtalmique : Optixcare lubrifiant pour les yeux</td><td>Viovet</td><td>203865</td><td></td></tr><tr><td>chlorhydrate de lidocaïne (injection 2 %)</td><td>Larkmead Vets</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Jacquette Scaler #1SSE, 18cm, creux</td><td>WPI</td><td>503421</td><td></td></tr><tr><td>Pince à dissection dentelée et incurvée</td><td>WPI</td><td>15915</td><td></td></tr><tr><td>Soie tressée, suture non résorbable : Mersilk Suture W502H</td><td>National Vet Services Limited</td><td>153746</td><td></td></tr><tr><td>Foret dentaire : BONE MICRO DRILL SYST 230 VAC</td><td>Harvard Apparatus UK</td><td>72-4860</td><td></td></tr><tr><td>Saline stérile : Chlorure de sodium 0.9 %</td> <td>Animalcare Ltd</td><td>14K26BT</td><td></td></tr><tr><td>Foret #4 : Broyeur à boulets, Carbure, #4</td><td>Harvard Apparatus UK</td><td>72-4958</td><td></td></tr><tr><td>Foret #4 : Broyeur à boulets, carbure, #1/4</td><td>Harvard Apparatus UK</td><td>72-4962</td><td></td></tr><tr><td>Cage de Faraday</td><td>Newport Corporation</td><td>VIS-FDC-3600</td><td></td></tr><tr><td>Poste de travail d’isolation vibratoire : Vision IsoStation</td><td>Newport Corporation</td><td>M-VIS3660-RG4-325A</td><td></td></tr><tr><td>Unité de contrôle de l’oxymètre et capteur : MouseOxPlus, Starr Life Sciences Corp.</td><td>WPI</td><td>O15001</td><td></td></tr><tr><td>Cône de nez souple transparent : Unité Microflex Non-Rebreathing avec un Nosecone de rat</td><td>WPI</td><td>EZ-103A</td><td></td></tr><tr><td>Électrodes de stimulation en acier inoxydable</td><td>PlasticsOne</td><td>E363/1/SPC</td><td></td></tr><tr><td>Stimulateur de courant isolé</td><td>Made in House</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Micro-électrode à 16 canaux, 100 &mu ; m espacement, aire de chaque site 177 &mu ; m2</td><td>NeuroNexus</td><td>A1x16-10mm-100-177-A16</td><td></td></tr><tr><td>16 Aiguë 16 canaux</td><td>Tucker David Technologies Inc., TDT</td><td>RA16AC-Z</td><td></td></tr><tr><td>Préamplificateur : Z-Series 64 canaux Préampli neuro-numérisant</td><td>TDT</td><td>PZ5-64</td><td></td></tr><tr><td>Séparateur de signal passif : Boîtier de séparation 32 canaux pour PZ5</td><td>TDT</td><td>S-BOX_PZ5</td><td></td></tr><tr><td>Unité d’acquisition de données : processeur RZ2 BioAmp. Processeur ultra haute performance 4-DSP série Z</td><td>TDT</td><td>RZ2-4</td><td></td></tr><tr><td>Logiciel pour la neurophysiologie : OpenEX</td><td>TDT</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Matlab</td><td>MathWorks</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Lances d’absorption</td><td>Outils de science fine 18105-01</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

enregistrement simultané d’électroencéphalographie co localisée et le potentiel de champ local dans rongeurs

Concurrent Recording of Co-localized Electroencephalography and Local Field Potential in Rodent

Bien que l’électroencéphalographie (EEG) est largement utilisé comme une technique non invasive pour l’enregistrement des activités neuronales du cerveau, notre compréhension de la neurogenèse de l’EEG est encore très limitée. Potentiels de champs locaux (LFPs), enregistrées via une microélectrode multi-laminaire peuvent fournir un compte rendu plus détaillé de l’activité neurale simultanée à travers différentes couches corticales dans le néocortex, mais la technique est envahissante. Combinant des mesures EEG et la LFP dans un modèle préclinique peut grandement améliorer la compréhension des mécanismes neurones impliqués dans la génération de signaux EEG et faciliter l’obtention d’un modèle mathématique biologiquement précis et plus réaliste de l’EEG. Une simple procédure d’acquisition EEG simultané et co localisée et multi-laminaire LFP signaux chez le rongeur anesthésié est présentée ici. Nous avons aussi étudié si des signaux EEG ont été significativement affectés par un trou foré dans le crâne pour l’insertion d’une microélectrode. Nos résultats suggèrent que le trou de trépan a un impact négligeable sur les enregistrements EEG.

Données des 4 rats étaient en moyenne pour obtenir la moyenne série le cas échéant. L’amplitude de la réponse d’EEG évoquée, également connu sous le nom de l’événement lié potentiel (ERP), est généralement beaucoup plus petit que celui de la LFP. La figure 6 montre par moyenne et PDD dans le supragranular, granulaire et infragranular couches du cortex baril, respectivement. La bande d’erreur à chaque parcelle est l’écart-type correspondant. On voit que les ERP est environ 10 fois plus petite que la LFP évoquée.
<img alt="Figure 6" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56447/56447fig6.jpg"> Figure 6 : moyenne (n = 4) les signaux neuronaux des ERP, supragranular, granulaire et infragranular LFP. Ombre indique erreur standard. <a href="//cloudflare.jove.com/files/ftp_upload/56447/56447fig6large.jpg" target="_blank">S’il vous plaît cliquez ici pour visionner une version agrandie de cette figure.</a>
Comparaisons de la dynamique temporelle de l’ERP et le PDD sont indiquées à la Figure 7. Directe superposition d’ERP et de la supragranular LFP à la Figure 7 a illustre l’ordre des différences d’amplitude entre ces deux types de signaux neuronaux. Pour comparer la dynamique temporelle, les ERP et la LFP sont normalisées en ce qui concerne leur amplitude de crête négative. Figure 7 b et 7C montrent que l’ERP normalisée superposée avec le supragranular normalisé LFP et normalisée LFP granulaire, respectivement.
Il peut être vu de Figure 7 b que les pics de P1 et N1 pour ERP sont plus tardive que les pics correspondants de LFP dans la couche supragranular. Cependant, les profils temporels de ces deux signaux neuronaux sont similaires, avec P1 précédant N1. En revanche, le profil temporel de l’ERP est nettement différent de celle de la (couche granulaire IV du cortex baril) LFP (Figure 7). Surtout ils ne sont pas des images de miroir de l’autre, avec LFP granulaire dominées par un seul pic négatif (reflétant un évier majeur dans la couche corticale IV), alors que les ERP se composait principalement de deux pics avec polarité opposée.
<img alt="Figure 7" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56447/56447fig7.jpg"> Figure 7 : Comparaison de la dynamique temporelle de l’ERP et le PDD. (A) ERP (trait plein) superposée avec supragranular LFP (ligne pointillée). Ombre indique erreur standard. (B) normalisé ERP (trait plein) superposées avec normalisée supragranular LFP (ligne pointillée). (C) normalisé ERP (trait plein) superposées avec LFP granulaire normalisée (ligne pointillée). <a href="//cloudflare.jove.com/files/ftp_upload/56447/56447fig7large.jpg" target="_blank">S’il vous plaît cliquez ici pour visionner une version agrandie de cette figure.</a>
Le signal de l’ERP a été mesuré à une araignée électrode placée sur le crâne avec un trou de trépan foré dedans. Pour étudier l’effet du trou sur les enregistrements EEG, une autre électrode araignée a été placé sur le crâne intact au-dessus du cortex de baril ipsi-latérale. A veillé à s’assurer que les impédances des électrodes deux araignées étaient comparables en ampleur en ajustant la quantité de pâte EEG utilisé. Données provenant de quatre rats (pas les mêmes rats utilisés ci-dessus) sont présentés ici.
La figure 8 montre les enregistrements d’EEG État repos simultanés de deux électrodes d’un rat, avec 100 s de données affichées dans la Figure 8 aet les données dans le cadre rectangulaire (20 s) sont développés dans la Figure 8 b. Les deux signaux EEG largement covarient, au sein de la même gamme d’amplitude. La figure 9 montre le PSD des quatre rats, avec la ligne du haut à l’aide d’une échelle linéaire sur l’axe de la fréquence et la ligne du bas à l’aide d’une échelle logarithmique sur l’axe des fréquences pour fournir un affichage développé dans la gamme de fréquence inférieure. Figure 9, il ne semble pas être compatible partialité dans le PSD dans l’ensemble de sujets. Cela a été confirmé en réalisant un échantillon test-t sur les différences normalisées dans le PSD en moyenne dans les cinq bandes, illustré à la Figure 10. Aucune des différences PSD normalisées dans ces bandes de fréquences ont été significativement différent de zéro (p = 0,32, 0,46, 0,85, 0,69 et 0,97, respectivement).
<img alt="Figure 8" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56447/56447fig8.jpg"> Figure 8 : enregistrements EEG bilatérales. EEG de crâne (A) enregistrement durant le repos État avec un trou dans le crâne (noir) et un enregistrement EEG simultané sur l’hémisphère opposé avec le crâne intact (gris). (B) Expanded Découvre les formes d’onde au sein de l’encadrement rectangulaire en (A). <a href="//cloudflare.jove.com/files/ftp_upload/56447/56447fig8large.jpg" target="_blank">S’il vous plaît cliquez ici pour visionner une version agrandie de cette figure.</a>
<img alt="Figure 9" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56447/56447fig9.jpg"> Figure 9 : densité de puissance spectrale (PSD) de la contra-(bleu) et l’EEG ipsi-latérale (rouge). Chaque colonne affiche le PSD d’un rat. Les panneaux haut de la page utilisent échelle de fréquence linéaire, tandis que les panneaux de fond utilisent l’échelle logarithmique de fréquence pour permettre au PSD dans la gamme de fréquence inférieure à visualiser. <a href="//cloudflare.jove.com/files/ftp_upload/56447/56447fig9large.jpg" target="_blank">S’il vous plaît cliquez ici pour visionner une version agrandie de cette figure.</a>
<img alt="Figure 10" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/56447/56447fig10.jpg"> Figure 10 : analyse de groupe. Normalisé de différence entre le contra - et le PSD ipsi-latérale avec les bandes de cinq fréquences : Delta, Theta, Alpha, bêta et Gamma. Chaque barre montre les différences moyennes normalisées au sein de la bande de fréquences, avec l’erreur-type représenté par la barre d’erreur. <a href="//cloudflare.jove.com/files/ftp_upload/56447/56447fig10large.jpg" target="_blank">S’il vous plaît cliquez ici pour visionner une version agrandie de cette figure.</a>

Ce protocole décrit une méthode simple pour l’enregistrement simultané de co localisée électroencéphalographie (EEG) et multi-laminaire champ local potentiel chez un rat anesthésié. Un trou foré dans le crâne pour l’insertion d’une microélectrode est montré pour produire une distorsion négligeable du signal EEG.

Enregistrement simultané d’électroencéphalographie co localisée et le potentiel de champ Local dans rongeurs

Although electroencephalography (EEG) is widely used as a non-invasive technique for recording neural activities of the brain, our understanding of the ...

L’objectif global de cette méthodologie est d’enregistrer simultanément l’électroencéphalographie colocalisée et le potentiel de champ local chez le rat anesthésié. Pour commencer cette procédure, notez le poids du rat sur une balance de laboratoire. Anesthésier le rat dans une chambre d’isoflurane.Ensuite, placez-le sur un support stéréotaxique, avec une serviette en papier sous son corps et posez ses dents sur la barre de morsure. Ensuite, administrez l’isoflurane en continu à l’aide d’un cône de nez en plastique dur monté sur le collier de serrage. Connectez le cône à un système d’anesthésie à l’isoflurane pour petit animal.Après cela, insérez un coussin chauffant thermostatique sous l’essuie-tout sur lequel le rat se repose, puis fixez la tête du rat avec deux barres d’oreille. Surveillez la température corporelle à l’aide d’un thermomètre rectal. Maintenant, rasez le haut de la tête de l’animal.Ensuite, appliquez une pommade ophtalmique sur les yeux pour prévenir le dessèchement de la cornée. Avant d’exposer le crâne, appliquez des gouttes de lidocaïne sur le cuir chevelu et massez doucement la peau. Après cela, faites une incision médiane d’environ deux à trois centimètres sur le cuir chevelu à l’aide d’un scalpel pour exposer le crâne.Séparez soigneusement le muscle temporal, controlatéral au coussinet de moustaches, à stimuler du crâne à l’aide d’un détartreur de veste et d’une paire de pinces de dissection dentelées et incurvées. Nettoyez le crâne avec des cotons-tiges chaque fois que nécessaire. À l’aide d’une suture tressée, en soie et non résorbable, attachez le muscle séparé au cuir chevelu avec un nœud serré, puis attachez solidement la suture au cadre stéréotaxique.Ensuite, utilisez les coordonnées stéréotaxiques pour localiser le cortex du baril, qui est de deux virgule cinq millimètres caudale à bregma et de six millimètres latéraux à la ligne médiane. Tracez ensuite un point à l’emplacement du cortex somatosensoriel à l’aide d’une pointe fine, marqueur permanent. Percez un trou d’un diamètre inférieur à deux millimètres dans le crâne.Veillez à ne pas percer dans la dure-mère. Diluez le fond du trou jusqu’à ce qu’il soit translucide. Pour éviter que le crâne ne surchauffe pendant le forage, appliquez une solution saline stérile sur la zone de travail toutes les 10 à 15 secondes.Utilisez ensuite une aiguille de calibre 27 pour percer la dure-mère afin de permettre l’insertion d’une microélectrode. Ensuite, transférez le cadre stéréotaxique avec le rat dans une cage de Faraday montée au-dessus d’un poste de travail d’isolation des vibrations. Fixez une pince de capteur d’oxymètre, reliée à une unité de commande d’oxymètre, à la patte arrière du rat pour surveiller en permanence les paramètres physiologiques.Après cela, remplacez le cône nasal en plastique dur et le collier de nez par un reniflard micro flexible équipé d’un cône de nez souple transparent pour permettre une stimulation facile des moustaches d’un côté du coussinet de moustaches sans compromettre l’administration d’isoflurane. Ensuite, insérez deux électrodes de stimulation en acier inoxydable dans le coussinet à moustaches exposé par la découpe sur le cône nasal. Ensuite, connectez les électrodes de stimulation à un stimulateur de courant isolé.Par la suite, soulevez la peau de la ligne médiane du cou à l’aide d’une pince et faites une incision d’un à deux centimètres avec des ciseaux, prête pour la mise en place d’électrodes de référence. Dans cette procédure, nettoyez et séchez le crâne entourant le trou de la bavure à l’aide d’un coton-tige. Appliquez soigneusement la pâte EEG conductrice sur un côté plat d’une électrode d’araignée EEG.Laissez un petit trou dégagé de pâte EEG sur l’électrode araignée pour permettre à une microélectrode multilamellaire de passer à travers le trou sans entrer en contact avec la pâte et l’électrode araignée. Alignez l’électrode de l’araignée avec le trou de bavure dans le crâne avec la pâte EEG face au crâne. Appuyez délicatement l’électrode de l’araignée sur le crâne, en établissant un contact ferme avec le crâne via la pâte EEG.Retirez toute pâte masquant le trou de la bavure, à l’aide d’une aiguille sur une seringue et retirez l’excès de pâte EEG au-delà de la périfia de l’électrode d’araignée de sorte que le contact entre l’électrode d’araignée et le crâne soit limité à la taille de l’électrode. Ensuite, étalez de la pâte EEG sur l’électrode de référence pour l’EEG et placez-la solidement à l’intérieur de l’incision à l’arrière du cou du rat. Ensuite, connectez les électrodes EEG au préamplificateur via un séparateur de signal passif pour les signaux à faible impédance.À ce stade, testez la résistance de la sonde EEG pour vous assurer qu’elle est inférieure à cinq kilo-ohms. Si ce n’est pas le cas, ajoutez plus de pâte EEG et assurez-vous que l’électrode de l’araignée entre bien en contact avec le crâne. Par la suite, montez un bras micromanipulateur sur le cadre stéréotaxique.Connectez une microélectrode linéaire à 16 canaux à un étage de tête aiguë à 16 canaux, solidement fixé sur le bras du micromanipulateur. Ensuite, étalez de la pâte EEG sur l’électrode de référence de la microélectrode, puis placez-la solidement à l’intérieur de l’incision, à côté de l’électrode de référence pour l’EEG. Ajustez l’angle du bras du micromanipulateur de manière à ce que la microélectrode soit perpendiculaire à la surface corticale.Maintenant, abaissez la microélectrode sous un microscope, de sorte que la pointe de la microélectrode soit dirigée vers la minuscule ouverture au fond du trou de bavure jusqu’à ce que l’électrode la plus haute pénètre à peine la surface corticale. Il faut veiller à ne pas forcer la microélectrode sur la surface de la dure-mère, car cela casserait l’électrode. Insérez la microélectrode dans la surface corticale à une profondeur de 1 500 micromètres.Microajustez la profondeur en appliquant une série de stimulas sur le coussin de moustaches et en observant le LFP évoqué à 16 canaux sur un moniteur de PC. Tournez avec précaution le bouton de l’axe z du micromanipulateur jusqu’à ce que l’amplitude la plus élevée de la LFP invoquée se produise, car celle-ci coïncide avec la couche quatre du cortex. Cette figure montre que l’ERP, enregistrée par la sonde EEG, est d’un ordre de grandeur plus petit que le LFP enregistré par la microélectrode dans la couche supragranulaire du cortex en baril.Le profil temporel de l’ERP est similaire à celui de la LFP dans la couche supragranulaire lorsqu’il est normalisé à l’aperçu négatif et super-imposé. Cependant, les latences d’aperçu de l’ERP sont plus longues que les latences d’aperçu correspondantes dans LFP. D’autre part, le profil temporel de l’ERP est nettement différent de celui de la couche granulaire LFP.Il est important de noter qu’ils ne sont pas des images miroir l’un de l’autre avec une LFP granulaire dominée par un seul coup d’œil négatif. Alors que l’ERP se compose principalement de deux aperçus de polarité opposée. Enfin, les signaux EEG collectés autour d’un trou de bavure dans le crâne ne sont pas significativement différents des enregistrements EEG d’un crâne intact.Une fois maîtrisée, cette technique peut être réalisée en une heure si elle est exécutée correctement. Après son développement, cette technique a ouvert la voie aux chercheurs dans le domaine de l’EEG et des neurosciences computationnelles pour explorer la neurogenèse des potentiels évoqués sensoriels. Ainsi, fournissant des contraintes pour la modélisation mathématique des ERP.Après avoir regardé cette vidéo, vous devriez avoir une bonne compréhension de la façon d’enregistrer simultanément l’EEG et le LFP co-localisés.

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Nous avons développé une méthode pour l'imagerie simultanée par résonance magnétique fonctionnelle et l'enregistrement électrophysiologique dans le cerveau de rongeurs, en fournissant une plateforme pour l'étude de la relation entre l'activité neuronale et le niveau d'oxygénation du sang dépendantes (BOLD) du signal IRM.

IRMf simultanées et l&#39;électrophysiologie dans le cerveau de rongeurs

Une procédure est décrite pour la manipulation de l'activité du cortex cérébral neurones pyramidaux optogenetically tandis que l'électroencéphalogramme, électromyogramme, et la concentration de lactate cérébral sont surveillés. Enregistrements expérimentaux sont effectués sur les câbles attachés-souris tandis qu'ils subissent spontanément veille / sommeil cycles. Optogenetic matériel est assemblé dans notre laboratoire, le matériel d'enregistrement est disponible dans le commerce.

Électroencéphalographie simultanée, en temps réel Mesure de la concentration de lactate et manipulation optogenetic de l&#39;activité neuronale dans le cortex cérébral des rongeurs

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Enregistrement du potentiel de champ local dans des coupes de cortex hippocampique-entorhinal de souris

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