Une introduction à la mort cellulaire

Paradoxalement, la mort cellulaire contribue à façonner la vie de l’organisme. À l’instar de n’importe quel ensemble de l’organisme, les cellules peuvent mourir en raison du vieillissement, en raison d’une blessure accidentelle, ou suite à une infiltration d’agents pathogènes unicellulaires peut sacrifier elle-même pour empêcher la propagation de l’infection. Dans ces circonstances, cellules peuvent suivre des voies différentes de la mort comme l’apoptose, autophagie ou nécrose. Tous ces types présentent des caractéristiques morphologiques spécifiques. L’apoptose ou mort cellulaire programmée conduit à membrane « blebbing » et de la fragmentation nucléaire. Autophagie, qui est également réglementée, conduit à la formation de grandes vacuoles contenant des composants cellulaires. Enfin, nécrose, c'est-à-dire les « imprévus » ou accidentels, se termine par la lyse cellulaire.

Cette vidéo va discuter des découvertes importantes qui ont conduit à l’identification de ces voies, explorer des questions auxquelles les chercheurs sont toujours poser des questions sur la mort cellulaire, discuter des outils qu’ils utilisent pour y répondre et enfin en revue quelques expériences d’exemple.

Tout d’abord, passons en revue certains des chercheurs qui a aidé à déchiffrer des voies cellulaires de la mort.

Des termes modernes utilisés pour décrire ces chemins remonte à Hippocrate, un médecin dans la Grèce antique. Il a utilisé le terme apoptose, ce qui signifie « falling off, » pour décrire les os « déchiquetage » observé après une fracture. Venir à l’époque moderne, la première mention notable de « nécrose » a eu lieu en 1859, quand Rudolf Virchow — dans sa compilation appelée Pathologie cellulaire— utilisé ce terme pour décrire la « dégradation des tissus avancé. »

Avec les progrès de la microscopie et l’histologie au cours de la prochaine décennie, en 1877 Carl Weigert et Julius Cohnheim ont pu étudier la nécrose au niveau cellulaire. Ils ont donné un aperçu des caractéristiques morphologiques associées à ce type de mort, comme la perte des noyaux.

Près de 70 ans plus tard, Christian de Duve découvert « autophagie, » un processus dans lequel les composants cellulaires sont engloutis et ventilées par organites membranaires appelées autophagosomes, qui fusionnent avec un autre type d’organite — lysosomes — pour détruire davantage leur contenu. Nous savons maintenant que l’autophagie joue un double rôle dans la cellule, facilite la survie ou induisant la mort.

En 1972, John Kerr, Andrew Wyllie et A. R. Currie a observé un autre type de mort cellulaire à la morphologie bien particulière. Depuis ce processus impliqués morceaux « tomber » des cellules mortes, ils lui a donné l’apoptose ancien nom grec. Plus tard, l’apoptose a été reconnu comme une forme de « mort cellulaire programmée » en 1977, quand H. R. Horvitz et John Sulston étudiaient développement de c. elegans . Ils ont constaté que des cellules spécifiques subirait l’apoptose en même temps chez les vers différents.

Étant donné que cela est arrivé très tôt au cours du développement, il a laissé entendre que les gènes peuvent guider l’apoptose. Cette hypothèse a été confirmée par le groupe de Horvitz dans les années 1980, quand ils ont observé que les cellules présentant des mutations dans certains Dec ou gènes « Mort dec. elegans » n’est pas mort lors de l’élaboration de ces vers. Plus tard, Horvitz a montré que le gène de ced-3 code pour une enzyme dégradant les protéines appelée une caspase. Maintenant, nous savons qu’il existe plusieurs caspases, et ils jouent un rôle important dans la mort cellulaire.

Ces avancées dans le domaine de la mort cellulaire ouvert de nouvelles routes pour les chercheurs à explorer. Regardons certains d'entre eux.

Il y a toujours eu intérêt à savoir quels facteurs déclenchent la mort cellulaire. Pour les identifier, les chercheurs sont actuellement exposer aux radiations, produits chimiques, les cellules et molécules de signalisation, et puis la recherche de changements dans le degré ou le type de la mort.

D’autres scientifiques sont intéressent à élucider les voies biochimiques impliquées dans chaque mécanisme de mort cellulaire. Actuellement, nous savons que l’apoptosis suit une voie où les caspases sont les enzymes clés, considérant que l’autophagie suppose des protéines qui sont nécessaires pour la formation de l’autophagosome. Cependant, il y a des composants dans ces voies qui ne sont pas connus, et les chercheurs tentent de trouver des façons de les expliquer. En outre, les chercheurs étudient également que n’importe quel « crosstalk » intervienne entre les voies de mort cellulaire. Si la diaphonie est présent, puis le même signal peut interviennent dans l’apoptose, mais aussi d’autophagie.

Enfin, un quartier populaire de recherche traite de comprendre pourquoi certaines cellules, comme les cellules cancéreuses — devenir immortel. Les scientifiques sont constamment à la recherche de mutations dans les cellules cancéreuses et déterminer si un quelconque d'entre eux touchent des gènes codant des facteurs impliqués dans les voies de la mort.

Autant de questions complexes, mais heureusement les chercheurs ont une variété d’outils à leur disposition pour y répondre.

L’essai de bleu trypan est un outil de dépistage couramment utilisés pour évaluer l’effet d’un composé sur la mort cellulaire. L’analyse se fonde sur une tache qui ne peut pas entrer dans des cellules vivantes, car ils possèdent « membranes sélectives », mais peut facilement entrer dans les cellules mortes que leurs membranes sont « rompus ». Ce test identifie la mort cellulaire, mais ne parvient pas à identifier la voie de la mort cellulaire spécifique.

Par conséquent, scientifiques ont conçu des techniques comme les tests d’activité caspase. Puisque les caspases sont activés pendant l’apoptosis, scientifiques peuvent ajouter des substrats de ces enzymes qui réagissent lorsqu’ils sont activés par des caspases. Ce qui contribue à l’identification de cellules apoptotiques.

De même, fragmentation de l’ADN qui se passe pendant l’apoptosis peut être facilement identifiée à l’aide de l’essai TUNEL, qui s’appuie sur les réactifs de cette balise les extrémités « entaillées » de l’ADN endommagé. Comme cette méthode est relativement facile à réaliser, c’est un test couramment utilisé dans le domaine.

Lorsque les scientifiques veulent déterminer le mécanisme de mort cellulaire dans leur population, ils peuvent associer annexine V et l’iodure de propidium (PI) les taches avec analyse en cytométrie en flux. Annexine V se lie à des résidus de phosphatidylsérine dans la membrane, tandis que PI pénètre à travers les membranes endommagées à associer avec l’ADN. En étudiant les données résultantes, scientifiques peuvent séparer des cellules subissant les voies différentes de la mort.

Enfin, scientifiques peuvent utiliser l’imagerie de cellules vivantes pour visualiser le processus de mort cellulaire en temps réel. Il s’agit d’une technique globale qui peut être utilisée pour identifier l’autophagie, nécrotiques ou cellules apoptotiques basés sur des caractéristiques morphologiques uniques.

Comme vous l’avez vu, il existe plusieurs méthodes pour détecter la mort des cellules, dont certaines ne sont pas spécifiques, d’autres qui peuvent aider à identifier les cellules apoptotiques, et certains qui distinguent entre les différentes voies.

Maintenant, nous allons voir comment les scientifiques utilisent ces techniques pour étudier plus sur la mort cellulaire.

Régime alimentaire joue un rôle important dans la santé et peut affecter la mort cellulaire dans différents tissus. Dans cet essai in vitro , les chercheurs exposés des neurones de souris à l’acide palmitique, un acide gras saturé présent dans les produits laitiers et viande et ensuite utilisé une analyse du caspase pour évaluer l’apoptose. Ils ont découvert que les cellules traitées à l’acide palmitique démontré caspase accru l’activité et la mort cellulaire.

D’autres chercheurs utilisent ces tests pour déterminer comment médicaments induisent des mécanismes différents de la mort. Ici, les souris transgéniques avec les cellules cancéreuses fluorescent étiquetés ont été injectés avec la doxorubicine, un médicament contre le cancer. Les cellules scientifiques puis photographiés dans les animaux vivants et en recherchant des changements dans la morphologie des cellules du cancer, déterminé que le traitement de la toxicomanie déclenchée tant l’apoptose et nécrose.

Enfin, certains scientifiques étudient si la mort cellulaire peut être inversée. Dans cette expérience, les chercheurs exposés à l’éthanol, les cellules cancéreuses humaines et confirment à travers une variété d’épreuves que ce traitement amenés à se lancer sur la voie de l’apoptose. Après lavage au large de l’éthanol, les cellules affectées ont été en mesure de récupérer de l’apoptose par un processus appelé « anastasis ». Cela donné un aperçu de comment les cancers peuvent retourner après traitement de la toxicomanie.

Vous avez juste regardé introduction de JoVE pour voies de mort cellulaire. Cette vidéo a examiné la riche histoire de la recherche sur les cellules mort — de l’Antiquité au XXe siècle — et ensuite discuté quelques questions actuelles. Nous a expliqué les méthodes populaires pour doser la mort cellulaire et a démontré comment ces techniques servent à mieux comprendre le lien entre l’environnement, la maladie et la mort cellulaire. Comme toujours, Merci pour regarder !