Amélioré l’Hydrogel 3D des Cultures de cellules gliales primaires pour In Vitro la modélisation du neuro-inflammation

L’objectif global de ce protocole de culture cellulaire 3D est de modéliser l’événement cicatriciel glial du système nerveux central à l’aide de cellules indicatrices clés : microglie, astrocytes et oligodendrocytes. Cette méthode peut aider à répondre à des questions clés dans le domaine de la neuro-inflammation, telles que le potentiel des cellules gliales à améliorer les stratégies de régénération et à démêler la cicatrice gliale. Le principal avantage de cette technique est que la biologie gliale peut être rapidement caractérisée dans un micro-environnement 3D avec des manipulations systématiques et à haut débit. Pour préparer les lamelles de recouvrement pour l’ensemencement, commencez par ajouter un millilitre de méthacrylate de 3-propyle à 49 millilitres d’eau distillée pour obtenir une solution à 2 %. Placez ensuite des lamelles en verre de 18 millimètres dans la solution et basculez-les pendant une heure à température ambiante. Au bout d’une heure, rincez les lamelles en trempant en série chaque lamelles dans trois béchers de 100 millilitres d’eau déminéralisée. Ensuite, séchez les lamelles de couverture sous vide avec un dessiccateur et un four à 40 degrés Celsius pendant la nuit. Le lendemain, à l’aide d’une pince, immergez rapidement les lamelles individuelles dans de l’éthanol à 70 %. Ensuite, sans sécher, déposez chaque lame de couvercle dans un puits d’une plaque de 12 puits. Ensuite, lavez chaque puits avec un millilitre d’eau déminéralisée stérile. Ajoutez ensuite un millilitre de poly stérile