Utilisant le labyrinthe en t modifiés afin d’évaluer les résultats fonctionnels de mémoire après un arrêt cardiaque

L’objectif global de ce labyrinthe en T modifié est d’évaluer l’apprentissage fonctionnel et la mémoire après un arrêt cardiaque, une ischémie cérébrale induite. Ces coéquipiers modifiés peuvent aider à répondre à la fonction de l’hippocampe dans les maladies qui causent des déficits de mémoire à court terme, tels que l’arrêt cardiaque. Le principal avantage du labyrinthe en T modifié est sa conception relativement simple.

C’est assez puissant pour mesurer la mémoire d’apprentissage fonctionnelle après une ischémie. De plus, l’analyse des données est simple et directe. Étant donné que l’arrêt cardiaque asphyxié entraîne principalement des déficits de mémoire à court terme, le labyrinthe en T modifié peut également être appliqué à d’autres maladies du système nerveux central, qui provoquent des déficits de mémoire à court terme.

Tels que la maladie d’Alzheimer, la maladie de Parkinson et l’accident ischémique transitoire. Après un cathétérisme fémoral, artériel et veineux, ajustez les paramètres physiologiques au besoin en modulant le volume systolique, les niveaux d’oxygène ou de protoxyde d’azote. Ensuite, utilisez une seringue d’un millilitre reliée à un adaptateur de leurre de calibre 23 pour administrer du bromure de vecuronium par la veine fémorale et attendez deux minutes.

Assurez-vous que la pression artérielle est égale ou autour de 100 millimètres de mercure. Induisez l’apnée pendant six minutes en déconnectant le tube endotrachéal du ventilateur. Bloquez davantage le tube endotrachéal à l’aide d’une seringue d’un millilitre pour assurer une apnée complète.

Au cours de la dernière minute de l’apnée, ajustez la fréquence respiratoire du ventilateur à 80 respirations par minute et augmentez l’oxygène à deux litres par minute avec zéro pour cent de protoxyde d’azote pour expulser l’isoflurane ou le protoxyde d’azote restant dans le ventilateur. Après les six minutes d’apnée, retirez la seringue d’un millilitre de la sonde endotrachéale. Reconnectez la sonde endotrachéale au ventilateur.

Ensuite, utilisez une seringue d’un millilitre reliée à un adaptateur de leurre de calibre 23 pour administrer de l’épinéphrine par la veine fémorale. Administrer des compressions thoraciques manuelles avec le pouce, l’index et le majeur sur la poitrine de l’animal, dans un léger mouvement circulaire sur les axes X et Z, jusqu’au retour de la circulation spontanée. Ensuite, utilisez une autre seringue d’un millilitre reliée à un adaptateur de leurre de calibre 23 pour administrer du bicarbonate de sodium par la veine fémorale, immédiatement après le retour à la circulation spontanée, afin de soulager l’acidose respiratoire.

10 minutes après la réanimation, mesurez à nouveau les gaz sanguins pour déterminer l’état acido-basique. Utilisez un hémostat pour clamper l’artère et la veine fémorales. Retirez lentement et doucement les cathéters artériels et veineux à l’aide d’une pince à pointe émoussée.

Ensuite, légatez l’artère et la veine fémorales avec une suture en soie 5 O pour éviter les saignements. Fermez la peau recouvrant le site chirurgical avec une suture en soie 3 O à l’aide de la technique de suture interrompue, afin de minimiser le risque de réouverture de la plaie. Une fois que le rat a commencé à respirer par lui-même, 30 à 60 minutes après la réanimation, débranchez-le du ventilateur et retirez doucement le tube endotrachéal.

Placez le rat dans l’incubateur pour bébé pendant la nuit. Enfin, transférez le rat dans la cage individuelle et ramenez-le à l’animalerie avec de la nourriture et de l’eau ordinaires. La veille de l’opération, manipulez chaque rat pendant cinq minutes et ne l’élevez jamais de la cage lors de la manipulation.

Ensuite, ramassez-le doucement par la queue d’une main, tandis que l’autre main soutient ses pattes, et laissez-le sauter de la main à la cage cinq fois. Séparez chaque rat dans des cages individuelles afin qu’il ne domine pas pour la nourriture et/ou le combat. Puis, trois jours après une chirurgie simulée ou ACA, transférez le rat avec la cage dans une pièce calme et sombre avant le début de la première course.

N’allumez qu’une lampe de bureau de faible puissance et placez-la dans un coin de la salle d’essai pour maintenir un éclairage minimal. Laissez le rat s’adapter à l’obscurité pendant 10 minutes. Ensuite, étalez une fine couche de litière pour couvrir tout le sol du labyrinthe et placez le rat au niveau du bras de départ.

Accordez à chaque rat trois minutes pour explorer le bras droit ou gauche. Une fois que le rat s’est engagé dans l’un des bras de but, lorsque les quatre pattes du rat sont entrées dans le bras de but, verrouillez la jonction en T entre le bras de départ et le bras de but adverse pour empêcher le rat d’entrer dans le bras de but adverse. Laissez le rat dans le labyrinthe pendant 30 secondes.

Ensuite, prenez le rat et remettez-le dans sa cage pendant environ 30 secondes. Retirez ensuite le bloc de jonction en T du labyrinthe en T. Placez à nouveau le rat au niveau du bras de départ et répétez le test pour déterminer l’alternance spontanée.

Demandez aux rats d’effectuer quatre passages par jour avec une pause de 10 minutes après les deux premiers passages. Enfin, changez la litière pendant la pause de 10 minutes et entre les animaux pour éliminer le biais olfactif. Nettoyez le labyrinthe en T avec de l’éthanol à 75 % suivi d’eau distillée à la fin de chaque journée expérimentale.

Les résultats du test d’alternance spontanée suggèrent que le taux d’alternance de trois jours consécutifs dans le groupe ACA était significativement plus faible que dans le groupe témoin. Cela est dû au fait que les rats soumis à l’ACA ont développé une augmentation de la préférence latérale par rapport aux témoins. Après avoir regardé cette vidéo, vous devriez avoir une bonne compréhension de la façon d’utiliser ce labyrinthe en T modifié pour évaluer le déficit de mémoire à court terme après une ischémie cérébrale chez un rongeur.

Lors de la tentative de ce labyrinthe en T modifié, il est important de bloquer doucement le bras opposé après que le rat soit entré dans l’un des bras de but. De plus, le labyrinthe en T doit être effectué dans une pièce sombre avec un éclairage minimal, ce qui réduit l’anxiété des rats.