Sténose de la veine cave inférieure : un modèle murin de la thrombose veineuse profonde

L’objectif global de cette intervention chirurgicale est de créer une sténose de la veine cave inférieure afin d’imiter la distorsion du flux sanguin pour l’initiation de la thrombose veineuse profonde. Cette méthode peut aider à répondre à des questions clés dans le domaine de la thrombose veineuse sur les mécanismes d’initiation de la thrombose veineuse profonde. Le principal avantage de cette technique est qu’elle simule une perturbation de la circulation sanguine, un mécanisme clé de l’initiation de la thrombose dans les veines.

La démonstration visuelle de cette méthode est essentielle car séparer la veine cave inférieure de l’aorte et faire le trou entre ces tissus sont difficiles à expliquer verbalement. Commencez par raser l’abdomen d’une souris anesthésiée de 19 à 25 grammes âgée de huit à 12 semaines et placez la souris en position couchée sur un coussin chauffant. À l’aide d’un coton-tige stérile, désinfectez la peau exposée trois fois avec une solution antibactérienne.

Confirmez le niveau de sédation approprié par l’absence de réponse au pincement des orteils et couvrez la souris avec un champ stérile avec un trou sur le site chirurgical. À l’aide d’un microscope à dissection, faites une incision le long de la ligne médiane de l’abdomen, à partir de 1,5 centimètre sous le sternum, et utilisez des cotons-tiges pour extérioriser les intestins du côté gauche de l’animal. Couvrez le tissu intestinal avec de la gaze stérile imbibée d’une solution saline à 37 degrés Celsius.

Placez des écarteurs de tissu pour élargir l’incision et localiser la veine cave inférieure, ou VCI, et ses branches latérales caudales à la veine rénale gauche. À l’aide d’une pince, tirez sur le tissu adipeux entourant les branches latérales, puis utilisez une deuxième pince pour creuser un tunnel sous la branche. Et ligaturez toutes les branches latérales aussi près que possible de la VCI avec des sutures prolènes inertes 7-0.

En tenant les tissus environnants avec une pince, tirez la VCI vers le haut et vers la gauche pour produire une tension dans la petite zone entre la VCI et l’aorte, précisément entre la VCI et la veine rénale gauche. Insérez une deuxième paire de pinces entre l’aorte et l’IVC et ouvrez et fermez les pinces pas plus de trois à cinq fois pour faire un trou. Il est très important de faire le trou précisément à l’endroit où la VCI converge avec la veine rénale gauche.

À l’aide de la main gauche, placez un morceau de deux centimètres de suture prolène inerte 7-0 dans le côté gauche de la cavité péritonéale, près de la VCI, et tirez la VCI vers le haut et à gauche. Insérez la deuxième pince dans le trou entre l’aorte et la VCI de manière à ce que les pointes apparaissent de l’autre côté de la VCI et tirez la suture à travers le trou. Faites un nœud provisoire lâche et placez une entretoise d’aiguille de calibre 30, pliée en crochet, dans le nœud.

Après avoir serré le nœud, retirez l’espaceur et utilisez un coton-tige pour ramener les intestins dans la cavité péritonéale. À l’aide de boucles continues, fermez le péritoine avec une suture VICRYL 6-0 et fermez la peau avec des agrafes métalliques. Injectez par voie sous-cutanée à la souris 0,5 millilitre de glucosaline à 37 degrés Celsius.

Ensuite, placez la souris dans une cage individuelle dans une chambre à 25 degrés Celsius contenant de la nourriture et de l’eau de gel avec surveillance jusqu’à ce qu’elle se rétablisse complètement. L’induction de la sténose dans la VCI initie une distorsion et une stagnation du flux sanguin, entraînant le développement d’un thrombus structurellement similaire au thrombus veineux profond observé chez l’homme et qui est facilement visualisé macroscopiquement. De plus, une élévation des D-dimères, un produit de la dégradation de la fibrine, est observée dans le plasma dans ce modèle de sténose IVC, indiquant la présence d’un processus thrombotique actif similaire à celui observé chez l’homme.

Bien que la plupart des animaux de laboratoire aient produit des thrombus dans ce modèle, un inconvénient majeur est la variabilité de la taille des thrombus observée entre les animaux. Une fois maîtrisée, cette technique peut être réalisée en 15 minutes si elle est correctement exécutée. Après son développement, cette technique a ouvert la voie aux chercheurs dans le domaine de la thrombose veineuse pour explorer les mécanismes de la TVP dans un modèle murin.