6 juin 2018
Enregistrement de la pression intracaverneuse (ICP) est une méthode importante pour évaluer la fonction érectile d’animaux de laboratoire. Ici, un protocole détaillé est démontré pour la procédure d’enregistrement du pic par catheterizing pénis crura et puis électrique stimule les nerfs caverneux chez les rats.
L’objectif global de cette procédure est de tester la fonction érectile des rats en cathétérisant le corps caverneux et en enregistrant la pression intracaverneuse après stimulation des nerfs caverneux. Cette méthode peut aider à répondre à des questions clés dans le domaine de la dysfonction érectile masculine, telles que l’évaluation des thérapies et des médicaments pour la dysfonction érectile. L’un des avantages de cette technique est qu’elle fournit une évaluation plus précise de la fonction d’érection et des réflexes, le changement dynamique du flux sanguin associé à la réponse érectile.
La démonstration visuelle de cette méthode est essentielle car le cathétérisme est difficile à apprendre car la petite surface de la tunique albuginée blanche des crus corps caverneux rend difficile l’insertion de l’aiguille dans le pénis crura. Pour vous préparer à l’opération, fabriquez une paire d’électrodes bipolaires pour l’enregistrement de la pression intracaverneuse. Pliez légèrement les extrémités des électrodes et ajustez la distance entre elles à un à deux millimètres.
Connectez ensuite les électrodes au stimulateur à l’aide de deux pinces crocodiles. Ensuite, assemblez le système de cathéter. Tout d’abord, utilisez un tube pour connecter une aiguille hypodermique de calibre 23 à un robinet d’arrêt à trois voies.
Connectez ensuite le robinet d’arrêt à un transducteur de pression. Ensuite, fixez une seringue de 10 millilitres chargée d’une solution saline d’héparine à la troisième position du robinet d’arrêt. Ensuite, remplissez tout le système avec une solution saline à l’héparine et vérifiez s’il y a des fuites.
Ensuite, soulevez l’aiguille de 20 centimètres et calibrez le système d’enregistrement à 20 centimètres d’eau. Après l’étalonnage, ajustez la hauteur de l’aiguille et vérifiez la précision du système d’enregistrement. Au besoin, répétez l’étalonnage jusqu’à ce que la précision soit confirmée.
Ensuite, transférez les rats de l’animalerie à la salle d’opération et laissez-les s’acclimater à la pièce pendant au moins 30 minutes. Pendant ce temps, stérilisez les outils chirurgicaux avec de l’éthanol à 70 % et préparez le matériel chirurgical nécessaire. Après 30 minutes, préparez le premier rat pour la chirurgie.
Anesthésez-le avec du pentobarbital sodique et attendez cinq à 10 minutes. Ensuite, pincez les orteils du rat et vérifiez l’absence de réflexe pour confirmer une anesthésie correcte. Ensuite, rasez la fourrure de l’abdomen et du cou et placez le rat en décubitus dorsal sur une planche chirurgicale.
Essuyez maintenant la peau exposée avec trois gommages alternés avec 10 % de povidone iodée suivie de 70 % d’éthanol. Appliquez également une pommade ophtalmique pour éviter que les yeux ne se dessèchent. Procédez ensuite à la chirurgie.
Avant d’isoler le nerf caverneux, cathétérisez l’artère carotide gauche selon le protocole textuel. Commencez l’isolement nerveux en soulevant la peau et les muscles de l’abdomen à l’aide d’une paire de pinces. Ensuite, avec des ciseaux, faites une incision médiane du bas-ventre au pénis.
Ensuite, écartez doucement les intestins dans la partie supérieure de la cavité abdominale. Saisissez ensuite la vessie à l’aide d’une paire de pinces et retirez-la de la cavité abdominale. Trouvez maintenant les lobes ventraux de la prostate qui sont situés sur la partie ventrale de l’urètre.
Ensuite, exposez le lobe dorsal de la prostate en retirant les lobes ventraux, la vésicule séminale et le canal déférent. Trouvez maintenant le point d’adhésion du canal déférent et de la prostate. Séparez ensuite l’espace entre la prostate et le canal déférent.
Procédez en exposant soigneusement la capsule fibreuse située en arrière du point de jonction de la prostate et du canal déférent. Ensuite, trouvez le ganglion pelvien majeur et les nerfs caverneux situés à la surface de la prostate. Séchez maintenant soigneusement la zone des nerfs caverneux avec un écouvillon ou du papier de soie, puis isolez soigneusement et accrochez le nerf caverneux droit avec les électrodes bipolaires.
Pour poursuivre la chirurgie, faites une petite incision dans la peau du pénis avec des ciseaux de dissection, puis dénudez soigneusement la peau de la tige du pénis. Ensuite, exposez suffisamment de tissu pour disséquer la musculature pénienne striée. Trouvez maintenant la branche supérieure de l’os du pubis.
Exposez ensuite le muscle bulbo-spongieux qui recouvre le bulbe spongieux. Ensuite, à l’aide d’une pince incurvée, séparez le muscle bulbo-spongiosus du muscle ischiocaverneux. Procédez en isolant soigneusement le muscle ischiocaverneux.
Ensuite, coupez le muscle ischiocaverneux pour exposer la tunique blanche albuginée du crus corps caverneux. Effectuez maintenant le cathétérisme. Suivez attentivement la direction anatomique du crus corps caverneux et insérez doucement l’aiguille à travers la tunique blanche albuginée dans le cavernosum.
L’emplacement de l’aiguille est crucial pour le succès de l’opération, donc à titre de test, injectez une petite quantité de solution saline héparinisée. Cela devrait entraîner une légère tumescence pénienne si l’aiguille a été insérée correctement. Ensuite, sans repositionner l’aiguille ou perturber le tube de connexion, relâchez soigneusement l’aiguille.
Ensuite, inspectez la zone pour détecter toute fuite. Si aucun n’est trouvé, procédez à la stimulation du nerf et à l’analyse des données. Le test d’enregistrement ICP décrit a été utilisé pour distinguer les rats âgés présentant une dysfonction érectile afin d’aider à quantifier l’effet d’un traitement ou de médicaments potentiels sur la fonction érectile.
Une courbe de réponse ICP typique du groupe de dysfonction érectile était beaucoup plus basse que la courbe du groupe témoin. Habituellement, l’ICP le plus élevé était choisi pour l’analyse statistique. Après avoir calculé le rapport entre la PIC et la pression artérielle moyenne, les données regroupées de cinq rats ont montré que le rapport dans le groupe d’âge diminuait significativement par rapport à celui des groupes témoins.
Outre ces deux paramètres clés, l’ICP de pointe, l’ICP de plateau, le temps de détumescence, la durée de réponse et l’aire sous la courbe, ont tous considérablement diminué chez les rats âgés, de sorte que les données regorgent de mesures quantitatives qui reflètent la fonction érectile. Après avoir regardé cette vidéo, vous devriez avoir une bonne compréhension de la façon d’effectuer efficacement l’enregistrement ICP sur des animaux. N’oubliez pas que lors de cette procédure, il est important de ne pas oublier d’utiliser de l’héparine afin de s’assurer que le tube de canule ne reste pas obstrué.
Une fois maîtrisée, cette technique peut être réalisée en deux heures environ si elle est exécutée correctement.
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Cet article présente un protocole détaillé pour mesurer la pression intracaverneuse (ICP) chez le rat afin d'évaluer la fonction érectile. La méthode consiste à cathétériser le corps caverneux du crus et à stimuler électriquement les nerfs caverneux.
L'enregistrement de la pression intracaverneuse (ICP) chez les rongeurs fournit une évaluation quantitative et physiologiquement pertinente de la fonction érectile, permettant une analyse mécanistique des candidats thérapeutiques dans la recherche préclinique sur les troubles de l'érection. Cette méthode soutient la validation des cibles et l'identification de composés d'intérêt en fournissant des données hémodynamiques dynamiques reflétant les mécanismes de réponse érectile, réduisant ainsi la dépendance à l'égard de critères de substitution. Son intégration dans les flux de travail de découverte améliore la confiance prédictive dans l'atténuation des risques liés aux thérapeutiques contre les troubles de l'érection avant de passer à des études de stades ultérieurs.
L’enregistrement de la PIC s'inscrit dans le continuum de découverte allant de la validation de cibles jusqu'à l'identification de candidats médicamenteux et les tests d'efficacité préclinique, en fournissant un phénotypage hémodynamique qui éclaire les décisions d'aller ou de ne pas aller (go/no-go) dans le développement de traitements pour les troubles de l'érection.