Name: Utilisant des ultrasons de haute résolution à l’apparition de tumeur de moniteur et de la croissance dans les modèles issus du génie génétique du cancer du pancréas (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-04-07T13:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 57 s
Description: Découvrez l'échographie haute résolution pour surveiller les tumeurs pancréatiques chez la souris modèle KPC. Cette méthode permet de détecter et évaluer précisément la croissance tumorale endogène en oncologie.

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Cette recherche a été financée par la Deutsche Krebshilfe (groupe Eder Max pour AN : 110972), une bourse de thèse de doctorat d’impliquant (pour PME/PMI) et une bourse de la Fondation Else-Kröner-Fresenius (à RGG) à l’University Medical Center Goettingen. Nous remercions Jutta Blumberg et Ulrike Wegner d’assistance technique d’experts. Nous remercions également tous les techniciens animales à l’animalerie de l’University Medical Center Goettingen pour garder la souris. Toutes les expériences ont été effectuées conformément à la réglementation allemande de bien-être animal.

Ce protocole est en conformité avec les directives de protection des animaux à l’University Medical Centre Goettingen, Allemagne (33,9-42502-04-15/2056). Selon les besoins spécifiques de chaque animal review boards, parmi les mesures du protocole pourrait être modifiée en conséquence.
1. abdominale Palpation des CPK souris
<ol><li>Pour éviter les échographies inutiles, palper l’abdomen de la souris pour identifier des souris qui pourraient éventuellement porter une lésion intraabdominale et devraient subir par la suite une échographie abdominale.<ol>
<li>Effectuer une palpation abdominale hebdomadaire à partir de 8 semaines d’âge dans le modèle murin de la KPC. Échographie haute résolution peut également être appliqué dans les modèles de tumeurs transplantées (p. ex., orthotopics) ou d’autres modèles de souris génétiquement modifiées. Remarque : Selon la tumeur cinétique et étude objectif (prevention study, étude d’intervention thérapeutique), détection de tumeurs de très petites taille (1 à 2 mm) est réalisable et l’apparition de tumeurs de moniteur avant que les tumeurs peuvent être palpés.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Placez votre souris sur la grille de la cage et doucement lever la souris par la queue et palper l’abdomen par doucement monter et descendre avec l’index et le pouce de la main de non-fixation (Figure 1).</li>
	<li>Si la souris tolère une palpation douce, aller de l’avant en augmentant lentement la pression. Une plus grande résistance peut facilement être détectée dans l’abdomen supérieur et inférieur. Parfois, les selles dures peuvent être interprétés à tort comme une tumeur de la masse.</li>
</ol>2. préparation de l’espace de travail
<ol><li>Fournir l’espace au moins trois unités de travail différents : zone pré-scan, numérisation cage de scène et de récupération. Matériel requis sont représentés dans la Figure 2.</li>
	<li>Nettoyer la plaque de travail principal (par exemple, avec 70 % éthanol) et de passer sur la plateforme de chauffage avant l’analyse (Figure 3). Assurez-vous que la température de consigne de 38-40 ° C est atteinte avant la première souris est transférée.</li>
	<li>Mettre l’appareil d’échographie et créez un nouveau dossier pour les données acquises (Figure 4). Le paramètre mode B s’applique pour l’imagerie abdominale. En outre, s’assurer que le transducteur abdominal est branché dans le port actif de la machine. Fixez la tête de capteur dans la partie supérieure de l’étape de travail en utilisant le transducteur système de montage.</li>
	<li>Préparer une cage de récupération sur une plaque chauffante ou mat thermique (ou lampe chauffante utilisation) afin d’assurer la thermorégulation post procédurale et prompt rétablissement des souris numérisées. Mettez une fine couche de tissu comme coussin au bas de cette cage pour éviter l’aspiration de literie avec les risques d’étouffement (Figure 5).</li>
</ol>3. l’anesthésie par inhalation
<ol><li>Aller de l’avant en mettant une souris dans la chambre de l’induction. Ouvrir la vanne de débit du gaz vecteur (1 L/min d’oxygène ou d’air) et la valeur de la concentration d’isoflurane à 4 %, ce qui permet une saturation plus lentement en plus de la chambre de l’induction. Assurez-vous qu’isoflurane bon nettoyage (filtrage passif ou actif) est en place. Après environ 2 à 4 min, la souris sera habituellement sous sédation profonde.<ol>
<li>Maintenir la sédation en administrant 2 % isoflurane à travers le cône de nez sur la scène de travail.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Transvaser avec soin l’animal de la chambre d’induction à l’étape de travail. Vérifier la coiffe pour un débit de gaz constant. Mettre le museau de la souris dans la coiffe de la sortie de conduite de l’anesthésie. La poste régulier pour la numérisation initiale est le décubitus dorsal. La souris peut également être placée sur le côté droit ou gauche pour améliorer la visibilité de la tête du pancréas ou de la queue des tumeurs (Figure 6).</li>
	<li>Bien que l’échographie abdominale n’est pas douloureuse en soi, effectuer le test du pincement pied comme indicateur d’un État libre de la douleur et Etat profondeur anesthésique. Si la souris est toujours actif ou déplacer activement, retransfert l’animal de retour dans la chambre de l’induction pour l’induction répétée et prolongée.</li>
	<li>La pommade oculaire protection pour prévenir les blessures cornéens en raison de la perte de fluide.</li>
	<li>Durant l’anesthésie, utiliser un système de surveillance. Cependant, ECG et la température rectale n'est pas régulièrement utilisée pour la numérisation de l’échographie abdominale. Ce qui est important, les souris perdent la capacité de thermorégulation sous anesthésie. Par conséquent, observez bien des signes cliniques pour hypothermie ou détresse respiratoire comme haletant ou d’apnée du sommeil. Si n’importe quel symptôme est immédiatement évident arrêt isoflurane et place la souris dans la cage de récupération.</li>
</ol>4. échographie paramètres
<ol><li>Allumez le système à ultrasons tel que décrit par les instructions du fabricant. Assurez-vous que le paramètre primaire est mis sur l’imagerie générale avec le package abdominal activé. B-Mode-imagerie est généralement utilisée pour l’acquisition de données en tant que norme.</li>
	<li>Obtenir une qualité d’image optimisée avec les paramètres suivants : fréquence image de 40 MHz, 2D-gain de 25-30 dB, profondeur 10 mm, largeur 10 mm, 3 zones focales avec centre entre 3 à 6 mm.</li>
</ol>5. souris préparation
<ol><li>Fixer l’extrémité supérieure et inférieure avec du ruban adhésif. Être aussi prudents que possible afin d’éviter tout préjudice à l’animal en raison de la fixation (Figure 7).</li>
	<li>Supprimer toutes les fourrures abdominale à l’aide de tondeuses pour animaux de compagnie électroniques. En raison de la texture de fourrure, démarrer à partir du bas de l’abdomen jusqu'à la cage thoracique. Faites attention à la xiphoideus de processus afin d’éviter des lésions de la peau dans ce domaine. Remarque : La souris fourrure reflète les ondes ultrasoniques et diminue la visibilité.</li>
	<li>Crème dépilatoire permet d’effectuer une préparation cutanée optimisé et l’élimination complète de la fourrure. Administrer une fine couche de crème sur l’abdomen rasé à l’aide de bouts de coton (Figure 8). Retirez la crème (après 30 s ou plus tard selon la crème utilisée) avec les tissus secs, suivies de beaucoup d’eau afin d’éliminer complètement tous les restes (Figure 9, Figure 10, Figure 11). Restes de crème pourraient causer des irritations de la peau et les muqueuses après l’échographie et peuvent donc nuire à la santé.</li>
	<li>Afin d’assurer la numérisation adéquates conditions s’appliquent à beaucoup de gel d’échographie sur l’abdomen (Figure 12). Habituellement, le gel ultrasonique chaud est utilisé afin de minimiser l’hypothermie pour la souris.</li>
	<li>Appliquez manuellement une fine couche de gel ultrasonique sur la tête du capteur. Effectuer un test en appuyant sur l’extrémité du capteur avec l’encoche. À l’écran, un signal sur le côté supérieur gauche sont visibles si le capteur est correctement positionné.</li>
</ol>6. abdominale échographie
<ol><li>Ajuster le capteur sur l’abdomen à l’aide d’une pression ferme. Forte compression de l’abdomen de la souris peut entraîner une déficience respiratoire ou circulatoire et devrait être évitée.</li>
	<li>Balayage de haut en bas. Ajustez le cadre de la plate-forme de travail et les roues pour les axes x et y.</li>
	<li>La première étape, identifier les deux reins. Habituellement, ils apparaissent comme des structures hyperéchogènes homogènes dans le bas-ventre. Les connectés vena renalis peuvent être facilement trouvés plus loin ce qui conduit à veine cave inférieure (Figure 13).</li>
	<li>Utiliser la veine lienalis sert comme navire de point de repère pour le pancréas. Tentative de distinguer entre vena renalis et veine lienalis. En cas de détection de la veine lienalis du pancréas peut être localisé exactement. Le pancréas normal est plutôt une membrane se propager par le biais de la cavité abdominale qu’une structure solide (Figure 14 et Figure 15).</li>
</ol>7. pancréatique tumeur détection et évaluation Volume
<ol><li>Identifier les lésions pancréatiques de toutes les structures environnantes. Généralement, ils apparaissent comme des masses de tissu hétérogène de rondes ou allongées hypoéchogènes (Figure 16). La tumeur est généralement ferme et ne peut être compressée par la tête de balayage. Remarque, de temps en temps qu'il pourrait être difficile de distinguer clairement entre une tumeur et une boucle de l’intestin grêle. Faites attention au péristaltisme de l’intestin qui ne doit pas être observé dans les tumeurs du pancréas.</li>
	<li>Sur l’écran détection de tumeur up et down pour avoir une idée de la taille totale et mesurer le plus grand diamètre à l’aide de la pince à ultrasons. Une fois trouvée une image convenable, geler l’écran et utilisez l’outil de mesure pour déterminer précisément la taille de la tumeur. Noter que pour une utilisation ultérieure, qu'il sera important de différencier si une tumeur est localisée dans la queue, le corps ou la tête du pancréas.</li>
	<li>Avant de changer de retour pour le mode live, assurez-vous d’enregistrer des images pour enregistrer le travail. Notez que tout gel de l’image, qu'il peut arriver que la molette de réglage est libérée, et la sonde d’échographie est encore plus enfoncée dans l’abdomen de la souris. Par conséquent, fixer le réglage de la compression avant de changer le mode de geler.</li>
	<li>Après avoir terminé la mesure du premier plan soit tourner la tête de balayage de 90° en position longitudinale (Figure 17), soit tourner la souris à son côté, pour détecter la dilatation longitudinale des tumeurs. Certaines tumeurs peuvent impliquer le changement de la position de la souris par une visibilité adéquate. Pour les tumeurs de la queue du pancréas, la souris peut être placée sur son côté droit (Figure 10 et Figure 19), pour des tumeurs du pancréas tête sur le côté gauche (Figure 11 et Figure 20).</li>
</ol>8. quantification du Volume de la tumeur
Note : Un des objectifs principaux de tous les efforts sont la détermination correcte du volume de la tumeur. Bien qu’il existe plusieurs techniques, une méthode de calcul, y compris la formule d’un ellipsoïde est préférée à l’University Medical Center Goettingen.
<ol><li>Équipé de tous les diamètres précédemment obtenus trois, calculer le volume approximatif de la tumeur correspondante (Figure 21).</li>
	<li>Également utiliser un système de moteur de la tête de balayage pour exécuter une analyse automatisée de la région de la tumeur avec calcul de volume ultérieur et 3-D-reconstruction.</li>
</ol>9. le recouvrement
<ol><li>Après la numérisation, retirez soigneusement tout le ruban adhésif et retirer soigneusement tous les gel ultrasonique avec tissu sec.</li>
	<li>Transvaser avec soin la souris dans la cage de récupération ( Figure 21). Évitez n’importe quel tissu de revêtement sur la face mouse´s qui pourrait provoquer des troubles respiratoires. Une position latérale pour la récupération doit être préférée.</li>
</ol>

<ol><li>Kersten, K., de Visser, K. E., van Miltenburg, M. H., Jonkers, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetically+engineered+mouse+models+in+oncology+research+and+cancer+medicine%5BTitle%5D)+AND+%22EMBO+Molecular+Medicine%22%5BJournal%5D)">Genetically engineered mouse models in oncology research and cancer medicine.</a> EMBO Molecular Medicine. 9 (2), 137-153 (2017).</li>
<li>Olive, K. P., Politi, K. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aOlive%2C+KP+%22Translational+therapeutics+in+genetically+engineered+mouse+models+of+cancer%22">Translational therapeutics in genetically engineered mouse models of cancer</a>. (2), Cold Spring Harbor. 131-143 (2014).</li>
<li>Westphalen, C. B., Olive, K. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetically+engineered+mouse+models+of+pancreatic+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22The+Cancer+Journal%22%5BJournal%5D)">Genetically engineered mouse models of pancreatic cancer.</a> The Cancer Journal. 18 (6), 502-510 (2012).</li>
<li>Hingorani, S. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Trp53R172H+and+KrasG12D+cooperate+to+promote+chromosomal+instability+and+widely+metastatic+pancreatic+ductal+adenocarcinoma+in+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Cell%22%5BJournal%5D)">Trp53R172H and KrasG12D cooperate to promote chromosomal instability and widely metastatic pancreatic ductal adenocarcinoma in mice.</a> Cancer Cell. 7 (5), 469-483 (2005).</li>
<li>Frese, K. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((nab-Paclitaxel+potentiates+gemcitabine+activity+by+reducing+cytidine+deaminase+levels+in+a+mouse+model+of+pancreatic+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Discovery%22%5BJournal%5D)">nab-Paclitaxel potentiates gemcitabine activity by reducing cytidine deaminase levels in a mouse model of pancreatic cancer.</a> Cancer Discovery. 2 (3), 260-269 (2012).</li>
<li>Paredes, J. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+non-invasive+method+of+quantifying+pancreatic+volume+in+mice+using+micro-MRI%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">A non-invasive method of quantifying pancreatic volume in mice using micro-MRI.</a> PLoS One. 9 (3), e92263(2014).</li>
<li>Boj, S. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Organoid+models+of+human+and+mouse+ductal+pancreatic+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Cell%22%5BJournal%5D)">Organoid models of human and mouse ductal pancreatic cancer.</a> Cell. 160 (1-2), 324-338 (2015).</li>
<li>Aung, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Immunotargeting+of+Integrin+alpha6beta4+for+Single-Photon+Emission+Computed+Tomography+and+Near-Infrared+Fluorescence+Imaging+in+a+Pancreatic+Cancer+Model%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+Imaging%22%5BJournal%5D)">Immunotargeting of Integrin alpha6beta4 for Single-Photon Emission Computed Tomography and Near-Infrared Fluorescence Imaging in a Pancreatic Cancer Model.</a> Molecular Imaging. 15, (2016).</li>
<li>Akladios, C. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Contribution+of+microCT+structural+imaging+to+preclinical+evaluation+of+hepatocellular+carcinoma+chemotherapeutics+on+orthotopic+graft+in+ACI+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Bulletin+du+Cancer%22%5BJournal%5D)">Contribution of microCT structural imaging to preclinical evaluation of hepatocellular carcinoma chemotherapeutics on orthotopic graft in ACI rats.</a> Bulletin du Cancer. 98 (2), 120-132 (2011).</li>
<li>Neesse, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((CTGF+antagonism+with+mAb+FG-3019+enhances+chemotherapy+response+without+increasing+drug+delivery+in+murine+ductal+pancreas+cancer%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Science+USA%22%5BJournal%5D)">CTGF antagonism with mAb FG-3019 enhances chemotherapy response without increasing drug delivery in murine ductal pancreas cancer.</a> Proceedings of the National Academy of Science USA. 110 (30), 12325-12330 (2013).</li>
<li>Sastra, S. A., Olive, K. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Quantification+of+murine+pancreatic+tumors+by+high-resolution+ultrasound%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+in+Molecular+Biology%22%5BJournal%5D)">Quantification of murine pancreatic tumors by high-resolution ultrasound.</a> Methods in Molecular Biology. 980, 249-266 (2013).</li>
</ol>

Les auteurs n’ont rien à divulguer.

Avec ce protocole, une description détaillée pour quantifier les tumeurs du pancréas, à l’aide de l’échographie abdominale haute résolution dans des modèles murins transgéniques est fournie. Récemment, Sastra et coll. publié une description détaillée comment quantifier les tumeurs pancréatiques dans les modèles murins, mais aucune instruction visualisées sur la préparation et la manipulation comme condition sine qua non pour toutes les autres étapes ont été indiqué11. L’objectif global de...

Modèles de souris génétiquement modifiées ont acquis une importance croissante dans la recherche sur le cancer en raison de leur capacité à récapituler étroitement la nature complexe de la carcinogenèse humaine1,2,3. Un des plus fréquemment utilisé des modèles pour étudier le développement du cancer pancréatique, la progression et la réponse thérapeutique est caractérisée par une mutation activatrice de l’oncogène Kras, combinée à une inactivation de la tumeur suppresseur p534. Cette LSL-KrasG12D / +; LSL-Trp53R172H / +; PDX-1-Cre modèle murin (KPC) imite la progression progressive des lésions pré-invasives intraépithéliales pancréatiques (Panine) au carcinome invasif. Phénotypiquement, presque toutes les souris développent ACPE dans les six premiers mois après la naissance. Toutefois, le modèle de CPK par rapport aux modèles transplantés, révèle un début de tumeur très variable de 8 semaines à plusieurs mois4. Une fois les tumeurs pancréatiques atteignent une certaine taille (5 à 9 mm de diamètre), la croissance tumorale accélère rapidement et souris devront être inscrits dans des essais précliniques5. La détection exacte de l’apparition de la tumeur et de la taille de la tumeur est donc une condition essentielle pour la logistique de l’étude préclinique et le suivi de la thérapie. En général, plusieurs approches comme l’imagerie par résonance magnétique (IRM)6, tomodensitométrie,7,8,9 ou échographie haute résolution de numérisation peut être utilisée pour effectuer le dépistage des tumeurs et 10de thérapie. Chaque technique a ses avantages et ses inconvénients. Bien que MRI- ou une tomodensitométrie (CT)-l’imagerie permet l’acquisition de données haute résolution ainsi que calcul de volume précis, temps d’examen prolongé sous sédation générale, et il faut un matériel très onéreux et ne permet pas fréquent numérisation sur une longue période de temps. En revanche, petit animal échographie est une méthode établie qui peut être employée pour dépister les pathologies abdominales en souris11. Avantages de cette méthode d’imagerie sont courtes numérisation fois, haute résolution, et la possibilité d’utiliser l’échographie doppler ou contraste amélioré par ultrasons (UFC) pour visualiser une perfusion des organes en parallèle. Toutefois, des connaissances anatomiques, l’imagination 3D et une formation pratique approfondie sont nécessaires pour l’interprétation de l’image correcte.
Dans l’article suivant, un protocole détaillé pour l’utilisation de l’échographie haute résolution dans le modèle de CPK est fourni. En outre, les images échographiques standard sont représentés et étiquetés avec des structures d’orgue pour faciliter l’orientation de l’enquêteur.

<table><tbody><tr><td>Système d’échographie haute résolution Visual Sonics Vevo2100, y compris platine d’imagerie et ligne d’anesthésie</td><td>FUJIFILM VisualSonics Inc, Canada</td><td>VS-11945</td><td></td></tr><tr><td>Sonde MicroScan Vevo 2100 MS-550-D (22-55MHz)</td><td>FUJIFILM VisualSonics Inc, Canada</td><td>VS-11874</td><td></td></tr><tr><td>Système d’anesthésie Vevo (chambre d’induction d’anesthésie avec entrée de gaz frais et résiduaires)</td><td>FUJIFILM VisualSonics Inc, Canada</td><td>SA-12055</td><td></td></tr><tr><td>Station d’imagerie Vevo (platine fonctionnelle avec cône nasal pour l’alimentation en anesthésie)</td><td>FUJIFILM VisualSonics Inc, Canada</td><td>SA-11982</td><td></td></tr><tr><td>&nbsp ; tondeuses électroniques pour animaux de compagnie</td><td>Panasonic Marketing Europe, Allemagne</td><td>5025232484324</td><td>Panasonic ER-PA10-s</td></tr><tr><td>Labotect Plaque chauffante</td><td>Labor tech G&ouml ; ttingen, Allemagne</td><td>13854</td><td></td></tr><tr><td>crème pour les yeux (pommade ophtalmique)</td><td>Sch&uuml ; lke& Mayr, Allemagne</td><td>9080249</td><td></td></tr><tr><td>isoflurane vétérinaire</td><td>Abbvie, Allemagne</td><td>4831867</td><td></td></tr><tr><td>crème dépilatoire</td><td>RB healthcare Royaume-Uni, Royaume-Uni</td><td>8218535</td><td></td></tr><tr><td>70 % d’éthanol (v/v) dans de l’eau distillée</td><td>TH. Geyer, Allemagne</td><td>22941000</td><td></td></tr><tr><td>gel à ultrasons</td><td>Asmuth, Allemagne</td><td>13477</td><td></td></tr><tr><td>lingettes mouchoirs</td><td>Kimberly-Clark Allemagne, Allemagne</td><td>7558</td><td></td></tr><tr><td>cotons-tiges</td><td>Meditrade, Allemagne</td><td>75481116</td><td></td></tr><tr><td>bol en verre pour gel à ultrasons</td><td>ARC France, France</td><td>H1149</td><td></td></tr><tr><td>bol d’eau</td><td>W & P Trading Co., États-Unis</td><td>B00K2P6PLQ</td><td></td></tr><tr><td>éponges de gaze</td><td>Fuhrmann, Allemagne</td><td>960504</td><td></td></tr></tbody></table>

utilisant des ultrasons de haute résolution à l’apparition de tumeur de moniteur et de la croissance dans les modèles issus du génie génétique du cancer du pancréas

Utilizing High Resolution Ultrasound to Monitor Tumor Onset and Growth in Genetically Engineered Pancreatic Cancer Models

Le LSL-Kras G12D / +; LSL-Trp53R172H / +; PDX-1-Cre modèle murin (KPC) représente un modèle transgénique établi et fréquemment utilisé pour évaluer de nouveaux traitements dans le cancer pancréatique. Apparition de la tumeur est variable dans le modèle de la KPC âgés de 8 semaines à plusieurs mois. Par conséquent, les outils d’imagerie non invasive sont tenus d’écran pour l’apparition de la tumeur et du moniteur pour la réponse au traitement. Pour résoudre ce problème, différentes approches ont émergé ces dernières années. Échographie haute résolution dispose d’atouts majeurs tels que le caractère non invasif, temps de session rapide et une image haute résolution sans exposition aux radiations. Cependant, l’échographie chez la souris n’est pas trivial et suffisamment de connaissances anatomiques et compétences pratiques nécessaires pour son exécution avec succès l’échographie haute résolution dans des modèles précliniques de cancer du pancréas. Avec l’article suivant, un guide pratique détaillé pour une échographie abdominale dans les modèles murins en mettant l’accent sur des modèles de cancer pancréatique endogène est présenté. Par ailleurs, on trouvera un résumé des erreurs courantes et comment les éviter.

L’échographie est une technique polyvalente et non invasif qui est utilisée pour traiter plusieurs questions dans des modèles murins de maladies humaines. Par rapport à tous les autres avantages majeurs des approches d’imagerie sont efficacité haut débit, coût, temps d’acquisition court et imagerie en temps réel. Toutefois, cet outil a besoin d’expertise pour générer des images précises et de haute qualité. Particulièrement dans le cas d’objets non désirés au moins une certaine expérience...

Cet article décrit l’utilisation de l’échographie haute résolution chez les souris génétiquement modifiées de cancer du pancréas. L’objectif principal est de fournir une instruction détaillée pour la détection et l’évaluation des tumeurs pancréatiques endogènes.

Utilisant des ultrasons de haute résolution à l’apparition de tumeur de moniteur et de la croissance dans les modèles issus du génie génétique du cancer du pancréas

The LSL-KrasG12D/+; LSL-Trp53R172H/+; Pdx-1-Cre (KPC) mouse model represents an established and frequently used transgenic model to evaluate novel ...

Il existe différents modèles de souris génétiquement modifiées pour étudier le cancer du pancréas. Le modèle le plus couramment utilisé est le modèle murin Kras, p53 qui héberge une mutation activatrice dans l’oncogène Kras et une mutation inactivatrice dans le gène suppresseur de tumeur p53. Les deux mutations sont activées conditionnellement par le promoteur Pdx-Cre.Ce modèle murin Kras, p53, Pdx-Cre, en abrégé modèle KPC, développe des tumeurs pancréatiques endogènes entre l’âge de deux et six mois. En préparation de votre procédure d’échographie, l’équipement suivant doit être préparé et prêt à l’emploi. Pour les ultrasons à haute résolution, un appareil à ultrasons fixe est utilisé.La procédure d’échographie est réalisée sous anesthésie générale par évaporation d’isoflurane. Une fois que la souris est sous sédation profonde, elle est transférée à l’étape de travail verte. Après la procédure d’échographie, la souris doit être placée dans une cage préchauffée pour accélérer la récupération.Le développement tumoral est très variable dans le modèle murin KPC. Pour éviter les procédures de dépistage par échographie inutiles, nous effectuons généralement une palpation abdominale heb

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Cette vidéo décrit le protocole d’implantation orthotopique guidée par échographie de cellules d’adénocarcinome canalaire pancréatique dérivées de souris directement dans le pancréas de la souris. Cela provoque moins d’inflammation au site d’implantation par rapport aux interventions chirurgicales.

Implantation guidée par ultrasons : une technique pour implanter des cellules d’adénocarcinome canalaire pancréatique dans une souris adulte

Cette vidéo présente un modèle orthotopique de cancer du pancréas qui utilise Matrigel pour l’administration de cellules localisées et l’imagerie de bioluminescence in vivo pour le suivi non invasif de la progression tumorale. Le modèle orthotopique est adapté à la fois aux modèles syngéniques et aux modèles de xénogreffes et pourrait être utilisé dans des essais précliniques pour étudier l’impact de nouvelles thérapies anticancéreuses sur la croissance de la tumeur pancréatique primitive et...

Modèle murin de cancer du pancréas orthotopique bioluminescent : une technique non invasive pour surveiller la progression du cancer chez la souris

Une meilleure compréhension de la biologie du cancer du pancréas est critique nécessaire pour permettre le développement de meilleures options thérapeutiques pour traiter le cancer du pancréas. Pour répondre à ce besoin, nous démontrons un modèle orthotopique de cancer du pancréas qui permet une surveillance non invasive de la progression du cancer à...

Modèle Orthotopique bioluminescente la progression du cancer du pancréas

L’objectif de ce protocole est d’appliquer l’imagerie par résonance magnétique améliorée par contraste dynamique (DCE-MRI) pour les xénogreffes de tumeurs pancréatiques orthotopiques chez la souris. DCE-MRI est une méthode non invasive pour analyser la microvascularisation dans un tissu cible, et utile pour évaluer la réponse vasculaire dans une tumeur après une nouvelle thérapie.

Contraste dynamique amélioré imagerie par résonance magnétique d&#39;un modèle orthotopique cancer du pancréas de souris

Une procédure visant à implanter orthotopiquement des cellules cancéreuses du pancréas exprimant des protéines fluorescentes vertes (PANC-1 GFP) dans le pancréas de souris Balb-c Ola Hsd-Fox1nu afin d’évaluer la progression tumorale et les métastases est présentée ici.

Fluorescent modèle de souris orthotopique de cancer du pancréas

Nous décrivons un protocole pour l'implantation guidée d'ultrason des lignes canalaires canalaires canalaires d'adénocarcinome murine-dérivées de l'adénocarcinome de voie inole directement dans le site indigène de tumeur. Cette approche a eu comme conséquence les tumeurs pancréatiques détectables par balayage d'ultrason dans un délai de 2-4 semaines de l'injection, et a réduit de manière significative l'ensemencement de cellules de tumeur proportion sur la paroi péritonéale par rapport à...

Implantation orthotopique guidée par ultrasons de l'adénocarcinome ductal pancréatique murine

L’imagerie in vivo à haute résolution du pancréas a été facilitée par la fenêtre d’imagerie intravitale pancréatique.

Visualisation longitudinale stabilisée au niveau cellulaire in vivo du pancréas dans un modèle murin avec une fenêtre d’imagerie intravitale pancréatique

Nous présentons un protocole pour générer un modèle orthotopique de cancer du pancréas mini-invasif par injection guidée par ultrasons de cellules cancéreuses du pancréas humain et la surveillance ultérieure de la croissance tumorale in vivo par imagerie échographique.

Génération d’une xénogreffe orthotopique de cellules cancéreuses du pancréas par injection guidée par ultrasons

Le présent protocole décrit l’échographie à haute fréquence pour visualiser l’ensemble de la glande thyroïde de la souris et surveiller la croissance du carcinome anaplasique de la thyroïde.

Échographie à haute résolution pour l’analyse des tumeurs ATC orthotopiques dans un modèle murin génétiquement modifié

Nous présentons un protocole pour l’implantation chirurgicale d’une fenêtre optique stabilisée à demeure pour l’imagerie à résolution subcellulaire du pancréas murin, permettant des études en série et longitudinales du pancréas sain et malade.

Fenêtre stabilisée pour l’imagerie intravitale du pancréas murin

Ce protocole utilise un lit multichambre pour l’imagerie par résonance magnétique parallèle (IRM) de jusqu’à quatre animaux afin de détecter des tumeurs adénocarcinomes pancréatiques dans des modèles murins génétiquement modifiés. Ce protocole d’IRM multi-animaux est rapide et économique pour détecter et mesurer les tumeurs, facilitant la sélection animale pour les études précliniques et la surveillance longitudinale de la croissance tumorale.

Imagerie par résonance magnétique multi-animaux pour les mesures tumorales dans des modèles de cancer du pancréas chez la souris

Découvrez l'échographie haute résolution pour surveiller les tumeurs pancréatiques chez la souris modèle KPC. Cette méthode permet de détecter et évaluer précisément la croissance tumorale endogène en oncologie.

Utilisant des ultrasons de haute résolution à l’apparition de tumeur de moniteur et de la croissance dans les modèles issus du génie génétique du cancer du pancréas (Vidéo) | JoVE Journal

Utilisant des ultrasons de haute résolution à l’apparition de tumeur de moniteur et de la croissance dans les modèles issus du génie génétique du cancer du pancréas

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