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DOI: 10.3791/57024-v
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Nous présentons ici un protocole pour montrer comment cellule photoconversion est réalisée grâce à l’exposition aux UV dans des zones spécifiques exprimant la protéine fluorescente, Eos, chez les individus vivants.
L’objectif global de cette technique de photoconversion est de distinguer les cellules uniques d’un seul animal des autres populations de cellules fluorescentes. Cette méthode peut aider à répondre à des questions clés sur le développement sur le terrain et nous permettre de visualiser la migration d’une seule cellule au fil du temps. Le principal avantage de cette technique est qu’elle est peu invasive et peut être utilisée pour marquer des cellules uniques ou des populations plus importantes.
De plus, l’utilisateur peut sélectionner la région d’intérêt spécifique et convertir la photo de la cible souhaitée. Après l’accouplement du poisson zèbre transgénique mâle et femelle exprimant une protéine photoconvertible et collecté les œufs selon le protocole de texte, utilisez un microscope de dissection avec une source lumineuse de 488 nanomètres et des ensembles de filtres GFP pour cribler 24 embryons hpf. À l’aide d’une aiguille ou d’une pince à épiler, déchorionnez manuellement les embryons.
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