Évaluation systématique du bien-être chez les souris pour les procédures utilisant l’anesthésie générale

L’objectif général de ce protocole est d’évaluer le bien-être des souris après qu’elles aient subi des procédures, y compris une anesthésie générale, et de fournir des données scientifiquement solides pour soutenir la classification de la gravité conformément à la directive européenne 2010/63. Ce protocole peut aider à répondre à des questions clés sur le bien-être animal dans le domaine de la science des animaux de laboratoire, telles que le degré de détresse causé par les procédures impliquant une anesthésie générale. Le principal avantage de ce protocole est que le bien-être de chaque souris individuelle est évalué de manière scientifique sur l’animal, et ce protocole peut facilement être adapté et intégré dans d’autres études prévues.

Nous avons eu l’idée de ce protocole pour la première fois lorsque nous avons émis l’hypothèse que si une anesthésie répétée causait plus de stress chez les souris de laboratoire qu’une seule exposition, il manquerait des données scientifiques. Dans cette étape, préparez une boîte en verre d’une surface au sol d’environ 220 millimètres sur 290 millimètres et d’une hauteur de 390 millimètres. Couvrez le sol avec environ 0,5 centimètre de matériau de litière.

Ensuite, dispersez une poignée de matériaux de litière usagés de la cage domestique sur le nouveau matériau de litière pour réduire la détresse causée par le nouvel environnement. Fournir de la nourriture et de l’eau. Transférez doucement la souris dans la cage d’observation et laissez-la s’habituer au nouvel environnement pendant au moins 30 minutes.

Pour l’échelle de grimace de la souris, utilisez un appareil photo haute définition pour la photographie. Prenez en continu environ 30 à 40 photos pour chaque point temporel en une à deux minutes. Pour tester le comportement des terriers selon Deacon et Jirkof, préparez des terriers en plaçant 140 grammes de granulés de nourriture dans une bouteille d’eau en plastique opaque standard.

Ensuite, placez la bouteille d’eau en plastique remplie de granulés de nourriture parallèlement à la paroi arrière de la cage d’observation. Après deux heures, pesez les granulés de nourriture restants dans le terrier. Effectuez le test deux fois deux jours avant l’intervention comme référence.

Dans cette étape, préparez une cage avec un nouveau matériau de litière pour la période d’observation de 24 heures au cours de laquelle les souris sont logées individuellement. La période d’observation de 24 heures commence après la grimace de la souris et le comportement fouisseur. La durée d’un logement individuel est réduite au minimum.

Pendant ce temps, l’activité de la cage domestique, l’apport alimentaire, le comportement de construction du nid et les niveaux de métabolites de corticostérone fécale sont mesurés. Ensuite, dispersez une poignée de litière usagée sans excréments de la cage domestique sur le nouveau matériau afin de réduire la détresse. Fournir un nid carré normalisé en coton d’un poids défini à titre d’enrichissement de l’environnement uniquement.

Après cela, montez le capteur infrarouge sur le dessus de la cage pour mesurer l’activité de la cage domestique. Fournissez de la nourriture standard, des granulés et de l’eau à volonté, et placez la souris dans la cage. Le lendemain matin, marquez le nid selon l’échelle de cinq points de Deacon environ deux heures après l’allumage de la lumière.

De plus, pesez tout morceau de langerhant non déchiré qui représente au moins 5 % du poids initial du niden. Ensuite, placez le haut d’une cage grillagée dans la cage à un angle de 45 degrés par rapport au côté le plus long de la cage. Démarrez la minuterie et surveillez ou enregistrez les souris pendant 10 minutes à une distance d’environ 1,5 mètre.

Notez tous les moments où la souris grimpe sur le dessus de la cage avec les quatre pattes sur le dessus de la cage ou quitte le haut de la cage avec une ou plusieurs pattes sur le sol de la cage, suivie d’une analyse. L’expérience unique de l’anesthésie ainsi que l’anesthésie répétée ont augmenté les scores de différence sur l’échelle de grimace de la souris par rapport au témoin 30 minutes après l’exposition. À 150 minutes après la dernière anesthésie, les scores de différence de l’échelle de grimace de souris de toutes les souris sont revenus aux niveaux de contrôle.

Pour le comportement fouisseur, seule une anesthésie répétée a réduit de manière significative le pourcentage de granulés de nourriture que les souris ont retirés du terrier par rapport au témoin. Pour le comportement de construction du nid, il n’y avait pas de différences significatives dans les scores de nid entre une seule expérience d’anesthésie, une anesthésie répétée et le contrôle. Dans le paradigme de l’exploration libre, l’anesthésie répétée réduisait significativement le nombre d’explorations par rapport au contrôle et la durée totale de l’exploration par rapport à une seule anesthésie un jour après la dernière anesthésie.

Huit jours après la dernière anesthésie, il n’y avait plus de différences entre les groupes d’étude. Lors de l’essai de ce protocole, il est important de ne pas oublier de manipuler les souris par des méthodes de tunnel et/ou de ventouses. Attraper les souris par la queue peut induire du stress et de l’anxiété, ce qui affecte à son tour le bien-être et peut également influencer les résultats du protocole.

Ce protocole peut être facilement adapté et intégré dans des études planifiées pour évaluer l’impact d’une procédure sur le bien-être des souris. En fonction de la procédure et de la conception de l’étude, le test le plus approprié de ce protocole doit être choisi. Après avoir regardé cette vidéo, vous aurez une bonne compréhension de la façon d’évaluer le bien-être des souris ayant subi la procédure d’anesthésie générale.

Le protocole permet de classer la gravité de la procédure d’une manière scientifique basée sur les animaux.