23 février 2018
Nous présentons une méthode efficace d’étudier le logement de lentille à l’aide d’une civière objectif manuel. Le protocole imite hébergement physiologique en tirant les zonules connecté autour de la capsule du cristallin, par conséquent, qui s’étend de la lentille.
L’objectif global de cette technique est de fournir une méthode plus réalisable et moins coûteuse pour étudier avec précision la biomécanique du cristallin. Cette méthode peut aider à répondre à des questions clés dans le domaine de la biomécanique oculaire sur la façon dont le cristallin change avec la perte d’accommodation et l’apparition de la presbytie. Le principal avantage de cette technique est qu’elle surveille avec précision la capacité de l’objectif à s’adapter à un faible coût de matériau et à une grande robustesse procédurale.
Après avoir obtenu l’échantillon oculaire, saisissez fermement le côté de l’œil et utilisez une lame de rasoir pour faire une petite incision le long du côté à trois millimètres de la cornée suffisamment profonde pour atteindre le vitré. À l’aide de ciseaux stérilisés, continuez soigneusement l’incision autour de l’œil à l’aide de la pince pour retirer le tissu oculaire postérieur une fois qu’il a été excisé. Isolez le cristallin, les zonules et le vitré attaché à l’aide d’une pince si nécessaire pour déconnecter les zonules et le corps ciliaire des muscles ciliaires tout en maintenant la connexion avec le cristallin.
Retirez ensuite l’excès de vitre afin que la lentille puisse reposer à plat sur la civière de lentille manuelle. Prenez soin de garder le cristallin, les zonules et une quantité minimale de vitré intacts tout en enlevant l’excès de vitré. Pour assembler la civière, insérez des fonds de chaussure de 10 millimètres et leurs dessus de chaussure correspondants dans la plaque inférieure de la civière de sorte qu’un espace de cinq millilitres reste entre la paroi arrière de l’empreinte de la chaussure et la chaussure elle-même.
À l’aide d’une pince incurvée, placez la lentille extraite face vers le haut au milieu de la plaque inférieure de sorte que les chaussures soutiennent la lentille au-dessus du trou central. Enclenchez le haut correspondant des chaussures en place en ne coupant que les zonules et le vitré. Insérez ensuite les plaques dans le boîtier de la plaque et la vis d’arrêt dans le trou situé sur le côté de la plaque inférieure et insérez le boîtier de la plaque dans la base.
Pour mesurer l’objectif, placez un système d’imagerie directement au-dessus de l’appareil à la distance appropriée pour obtenir des images et placez une règle dans le champ de vision pour le dimensionnement et la mise à l’échelle précis des images en post-traitement. Ensuite, tournez fermement mais doucement la clé dans le sens des aiguilles d’une montre pour étirer l’objectif et obtenir des images de l’objectif. Pour assurer la cohérence d’un échantillon à l’autre, il est essentiel de faire pivoter la clé en douceur tout en étirant l’objectif.
Lorsque toutes les images ont été acquises, tournez la clé dans le sens inverse des aiguilles d’une montre pour restaurer l’échantillon à son état de repos et obtenir les images de l’état final de repos de l’objectif. Pour analyser les données, téléchargez les images sur le logiciel d’analyse d’images approprié et utilisez le point pour sélectionner au moins 40 points autour de la circonférence de l’objectif. Dans le menu d’analyse, sélectionnez mesurer pour obtenir l’emplacement de chaque point sélectionné et ajustez les points d’emplacement avec MathLab pour obtenir un rayon et un chi carré de l’ajustement.
Ensuite, utilisez la règle photographiée pour convertir le rayon des pixels et l’erreur en métriques, et effectuez une analyse de test t bilatéral apparié pour comparer un objectif individuel avant et après l’étirement. Dans cette analyse représentative de 10 échantillons d’yeux de porc, les lentilles ont démontré une augmentation de plus de 4 % par rapport à leurs rayons d’origine, validant le protocole d’étirement du cristallin avec cohérence et précision à la fois dans la littérature. Lorsque des lentilles humaines ont été testées, une diminution spectaculaire de l’élasticité de la lentille a été observée en corrélation avec l’âge du donneur, comme prévu par les études précédentes sur l’élasticité des lentilles.
Une fois maîtrisée, cette technique d’étirement du cristallin peut être réalisée en moins de 10 minutes si elle est correctement exécutée. Lors de l’étirement de la lentille, il est important de ne pas oublier de fournir une force de serrage continue jusqu’à ce que la vis d’arrêt soit atteinte afin de minimiser la variabilité entre les échantillons. En utilisant cette technique d’étirement manuel des lentilles, nous pouvons surveiller la rigidité du cristallin des patients atteints de diverses pathologies, notamment des patients atteints de diabète, de cataracte ou de presbytie.
Après son développement, cette technique a ouvert la voie aux chercheurs dans le domaine de la biomécanique oculaire pour explorer les propriétés du cristallin pendant les phases de perte d’accommodation et/ou d’apparition de la presbytie. Après avoir regardé cette vidéo, vous devriez avoir une bonne compréhension de la façon d’utiliser un étireur d’objectif manuel pour obtenir des informations biomécaniques précieuses sur l’objectif. N’oubliez pas que travailler avec des tissus biologiques peut être extrêmement dangereux et que des précautions telles que le port d’une tenue de laboratoire appropriée et la stérilisation de tous les instruments avant utilisation doivent toujours être prises lors de l’exécution de cette procédure.
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Cet article présente une méthode pour étudier l'accommodation du cristallin à l'aide d'un étireur manuel de cristallin. La technique simule l'accommodation physiologique en étirant le cristallin par l'intermédiaire des zonules reliées à la capsule du cristallin.
La simulation de l'accommodation du cristallin à l'aide d'un étireur de lentille manuel permet une étude rentable et reproductible des changements biomécaniques liés à la presbytie et à d'autres pathologies oculaires. Cette approche soutient la validation précoce des cibles thérapeutiques et la réduction des risques mécanistiques pour les traitements visant la rigidité du cristallin liée à l'âge. Les besoins simplifiés en échantillons et les sorties quantitatives robustes de la méthode facilitent l'évaluation à l'échelle du portefeuille de la biomécanique du cristallin dans la recherche translationnelle.
Ce protocole manuel d'étirement de lentille s'intègre dans la continuité découverte-préclinique pour la biomécanique oculaire, soutenant à la fois la recherche fondée sur des hypothèses et la validation translationnelle.