Utilisant l’imagerie 18F-FDG TEP/CT et histologie Quantitative pour mesurer des changements dynamiques dans le métabolisme du Glucose dans des modèles murins de cancer du poumon

Cette méthode peut aider à répondre à des questions clés dans les domaines du métabolisme du cancer et des thérapies anticancéreuses. Comme l’identification de nouvelles thérapies capables de moduler la croissance tumorale, ainsi que le métabolisme tumoral. Le principal avantage de cette technique est que nous pouvons effectuer une imagerie non invasive des tumeurs pulmonaires au fur et à mesure qu’elles se développent au fil du temps.

Ceci est important car nous pouvons mieux comprendre comment le métabolisme tumoral répond à diverses interventions thérapeutiques en temps réel. La démonstration de ces procédures sera faite par un scientifique en imagerie, du Centre d’imagerie préclinique de l’Institut Crump. Attention : utilisez un équipement de protection et suivez toutes les procédures réglementaires applicables lors de la manipulation de la radioactivité.

Commencez par réchauffer la cage des souris à imager à 37 degrés Celsius pendant l’heure précédant l’injection de fluoro-désoxyglucose marqué au fluor 18. Cela réduit la consommation de graisse brune du traceur. Pesez la première souris et notez son poids.

Après avoir anesthésié la souris à l’aide d’une méthode approuvée par l’établissement, testez la profondeur de l’anesthésie en pinçant l’orteil. Si aucune réponse n’est observée, poursuivez la procédure en appliquant une pommade ophtalmique sur les yeux pour éviter toute sécheresse pendant l’anesthésie. Diluez soigneusement le fluoro-désoxyglucose marqué au fluor 18, qui a une demi-vie radioactive de 109 minutes, dans une solution saline stérile à une concentration d’injection corrigée de la décomposition ajustée de 70 à 75 microcuries par 100 microlitres.

Ensuite, aspirez 100 microlitres dans une seringue à insuline avec une aiguille de calibre 28 et mesurez la dose de radioactivité à l’aide d’un calibrateur de dose. Enregistrez la mesure et l’heure de la mesure pour déterminer la correction de la dégradation. Placez la seringue dans un porte-seringue en plomb.

Pour injecter, réchauffez d’abord la queue pendant 1 à 2 minutes avec une gaze imbibée d’eau tiède. Ensuite, essuyez avec de l’isopropanol à 70 % pour dilater la veine de la queue juste avant l’injection. Administrez tout le volume dans la seringue avec une injection en bolus par la veine latérale de la queue.

Et notez le moment de l’injection. Mesurez ensuite la dose restante dans la seringue à l’aide du calibrateur de dose et enregistrez la mesure et le temps. Enfin, placez la souris injectée dans une chambre d’anesthésie avec 1,5 à 2 % d’isoflurane à 37 degrés Celsius pour permettre à la sonde d’être distribuée via la circulation systémique de la souris pendant une heure avant la TEP.

Après 1 heure, placez la première souris dans une chambre d’imagerie réglée à 37 degrés Celsius sous anesthésie isoflurane au cône nasal. Et fixez ses membres en place avec du ruban adhésif médical en position couchée. Placez la chambre d’imagerie dans le scanner TEP CT et acquérez les TEP et TDM comme décrit dans le manuel du scanner TEP.

Une fois la TEP TDM terminée, retirez la souris de la chambre d’imagerie et laissez-la récupérer dans sa cage. Importez les images TEP CT reconstruites dans le logiciel AMOD en cliquant sur Fichier, puis sur Importer un fichier. Et en sélectionnant le fichier DICOM approprié.

Faites un clic droit sur l’ensemble de données PET. Et localisez le champ du pourcentage de dose injectée par gramme dans l’onglet des informations de base. Entrez le pourcentage de dose injectée par gramme indiqué précédemment.

Dessinez les régions d’intérêt sur la tumeur et les tissus normaux en cliquant sur Modifier puis Ajouter ROI. Sélectionnez la forme du retour sur investissement et donnez-lui un nom. Dessinez des zones d’intérêt sur les tumeurs et les tissus et ajustez leurs dimensions pour couvrir le tissu d’intérêt dans les trois axes.

L’imagerie TEP au fluoro-désoxyglucose marquée au fluor 18 a été réalisée sur des souris porteuses de tumeurs avec des co-mutations KRAS et LKB1 appelées souris KL. Les tumeurs de ces souris étaient fortement glycolytiques. Comme en témoigne une consommation élevée de F-FDG.

Dans la lignée des études publiées précédemment. Une résection de poumons entiers a révélé la présence de plusieurs tumeurs, montrées ici en vues transversales, sagittales et coronales. Les cinq lobes du poumon de souris ont été colorés avec H&E pour visualiser la morphologie du tissu.

Les lobes 1 à 5 ont été colorés pour le transporteur de glucose 1. L’expression et la localisation de Glut1 dans la membrane plasmique des cellules tumorales sont directement corrélées avec la valeur d’absorption standard du fluoro-désoxyglucose marqué au fluor 18. Lors de l’exécution de cette procédure, il est important de se rappeler que la biodistribution du FDG dépend des conditions de manipulation des animaux.

Comme l’anesthésie, l’échauffement et le jeûne. Pour garantir la reproductibilité, ces étapes doivent être effectuées de manière cohérente. À la suite de cette procédure générale, d’autres traces TEP peuvent être utilisées pour mesurer divers processus biologiques in vivo, tels que le métabolisme des acides aminés et les interactions récepteur-ligand.