Stratégies d’échantillonnage et traitement des échantillons de tissu de la biobanque de modèles biomédicaux porcins

Cette vidéo présente deux techniques clés d’échantillonnage et de traitement des échantillons de tissus porcins de la biobanque. La technique d’immersion estime de manière fiable le volume total des organes et des tissus, et la technique d’orientation génère des coupes de tissus isotropes aléatoires pour une estimation non biaisée des paramètres morphologiques quantitatifs. Le principal avantage de la technique d’immersion pour la détermination de la densité tissulaire est qu’elle peut être appliquée à tout type de tissu et qu’elle produit des résultats fiables pour les petits comme pour les grands échantillons.

Les avantages de la technique d’orientation sont qu’elle est très efficace et qu’elle fonctionne également avec de grands échantillons de tissus. Pour commencer la volumétrie, pour un grand organe, excisez un morceau de tissu de taille appropriée de l’organe. Frottez soigneusement l’échantillon avec une serviette en papier pour éliminer l’excès de sang et de liquide tissulaire.

Ensuite, pesez l’échantillon sur une balance de précision et notez le poids de l’échantillon. Ajoutez 0,9 % de solution saline dans un bécher de taille appropriée. Ne remplissez pas complètement le bécher pour éviter tout débordement lors de l’immersion des tissus.

Placez le bécher sur la balance, puis immergez une pince ou un porte-échantillon construit par vous-même dans la solution saline jusqu’à ce que la marque sur la pince ou le porte-échantillon atteigne le liquide. Ensuite, réinitialisez l’affichage de l’échelle à zéro. Fixez soigneusement l’échantillon de tissu à la pince ou au porte-échantillon et immergez-le complètement dans la solution saline jusqu’à ce que la position marquée soit atteinte.

Pour enregistrer des mesures de densité fiables, il est important de s’assurer que l’échantillon est complètement immergé et d’éviter tout contact de l’échantillon immergé avec les parois intérieures ou le fond du bécher. Tout en maintenant l’échantillon en position, notez le poids affiché sur la balance. Utilisez cette mesure et la masse volumique de la solution saline à température ambiante pour calculer le volume de l’échantillon.

Calculez ensuite la densité de l’échantillon de tissu à partir du poids de l’échantillon et de son volume. Pour les grands organes et tissus, comme ce rein, effectuez des mesures répétées avec plusieurs échantillons et calculez la densité moyenne à partir des mesures uniques. Pour les petits échantillons et les petits organes mesurés au total, tels que l’hypophyse, répétez la mesure trois fois avant de calculer la densité moyenne des organes à partir des valeurs de mesure uniques.

Enfin, calculez le volume total de l’organe, du tissu ou du compartiment de l’organe à partir de son poids et de sa densité. Placez un échantillon de tissu fixe sur une impression d’un cercle équiangulaire avec un bord parallèle à la direction de zéro à 180 degrés. Utilisez ensuite une table de nombres aléatoires pour déterminer un angle aléatoire.

Trouvez les marques correspondantes sur l’échelle du cercle équiangulaire. À l’aide de ces marques, coupez une section à travers l’échantillon avec le plan de section orienté parallèlement à la direction de l’angle aléatoire indiqué sur l’échelle du cercle équiangulaire et une verticale à la surface de repos de l’échantillon. Placez le bloc de tissu avec la surface de la section vers le bas sur un cercle pondéré en cosinus.

Avec le bord de la surface de repos placé parallèlement à la direction un-à-un. Coupez maintenant une nouvelle section à travers l’échantillon à un angle aléatoire déterminé à l’aide de la table des nombres aléatoires. Le plan de section résultant est une section aléatoire uniforme isotrope.

Ce tableau montre les densités représentatives de plusieurs tissus et organes porcins déterminées à l’aide de la technique de submersion. La plupart des tissus porcins présentent des valeurs de densité légèrement supérieures à celles qui se rapportent à la densité de l’eau. Alors que les tissus nageant dans une solution saline, comme le tissu adipeux par exemple, présentent des densités inférieures à un.

Cette figure montre quatre coupes RIN représentatives du myocarde ventriculaire gauche porcin préparées avec la technique de l’orientation. Notez les angles de coupe modifiés dans les différentes sections IUR. Une fois maîtrisée, la technique d’immersion pour la détermination de la densité tissulaire peut se faire en quelques minutes.

S’il est effectué correctement. Les coupes de tissus isotropes uniformes et aléatoires générées par la technique d’orientation conviennent à l’estimation de tout paramètre morphologique quantitatif à l’aide de méthodes d’analyse stéréologique appropriées. Musique numérique.