Name: Une hépatectomie partielle lobulaire : Un modèle chirurgical pour la régénération du foie morphologique (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-05-31T13:30:00.000+00:00
Duration: 5 min 37 s
Description: Découvrez une hépatectomie partielle lobulaire minimalement invasive chez les souris néonatales pour étudier la régénération hépatique morphologique. Cette méthode permet d'explorer la biologie des cellules souches hépatiques sans lésion chimique.

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Nous remercions P. Chu pour l’exécution de H & E et histologie ; et C. Wang et A. McCarty pour discussions utiles. Recherche a été financée grâce au financement de la Virginie et D. K. Ludwig Fund for Cancer Research ; le National Heart, Lung, and Blood Institute (R01HL058770 et U01HL099999) ; le California Institute for Regenerative Medicine (RC1 00354) subventions à I.W. Y.R. a été soutenue par le Human Frontier Science programme Career Development Award (CDA00017), la Fondation de recherche allemande (RI 2787/1), l’Institut de cellules souches de Siebel et le Thomas et Stacey Siebel Foundation (1119368-104-GHBJI). J.M.T. était accompagnée de la NIH (T32GM007365), le prix National du Service de recherche (1F30DK108561) et Paul et Daisy Soros Fellowship pour les nouveaux américains.

Toutes les expériences sur des animaux ont été réalisées en stricte conformité avec les directives énoncées par l’Association pour l’évaluation et de la Commission Administrative d’accréditation du laboratoire Animal Care International (AAALAC) et de l’Université de Stanford sur l’Animal de laboratoire Soins (APLAC), (numéro de protocole #10266) et dans les États-Unis ou la Loi sur la protection des animaux européenne, Directive 2010/63/UE. Le protocole a été approuvé par le Comité sur l’éthique de l’expérimentation animale du gouvernement de Bavière, en Allemagne et a reçu la permission ne : 55.2-1-54-2532-150-2015.
1. la préparation animaux
<ol><li>Préparer une cage vide avec literie appropriée sur un coussin chauffant.</li>
	<li>Avant de toucher les animaux avec des gants, frotter la literie de la mère sur les gants.</li>
	<li>Retirer tous les chiots de leur mère et leur place dans la cage vide. Enlever une partie de la literie de la mère et le placer dans la cage vide avec les chiots.</li>
	<li>Placer la mère dans une cage séparée, propre et sec, loin du champ chirurgical.</li>
	<li>Don nouveau, propre stériles gants avant la préparation du champ opératoire.</li>
</ol>2. préparation du terrain chirurgicale
<ol><li>À l’aide d’une pipette de 10 mL, ajouter 10 mL de solution saline tamponnée au phosphate (PBS) à un plat de Pétri de 10 cm.</li>
	<li>Pipette de 2 mL de solution antiseptique betadine ou équivalent dans le plat de Pétri de 10cm.</li>
	<li>Placez une dissection étendue sur le champ opératoire. Allumez la lampe à portée de dissection et ajustez le niveau de lumière pour le confort du chirurgien. Un chiot peut être placé dans le champ chirurgical sous la lampe dissection de la portée. Suffisamment de lumière peut être confirmé par l’absence des ombres sur la surface ventrale du chiot.</li>
	<li>Préparer la chambre d’anesthésie isoflurane (voir Table des matières) avec un cône de nez. La chambre doit être nettoyée sans preuve d’urine ou les excréments. Placez le cône de nez et le tube associé dans le cadre de dissection dans le champ opératoire. Dévier le flux d’oxygène et isoflurane uniquement à la coiffe.</li>
	<li>Préparer une zone de récupération post-opératoire avec un coussin chauffant à environ 37 ° C. La récupération postopératoire doit être composé de 4 morceaux de gaze placé sur le dessus du coussin chauffant. Si possible, frotter les tampons de gaze en literie, matières fécales et l’urine pour préserver l’odeur de la mère de la mère. Remarque : Il est peu judicieux d’utiliser une lampe chauffante, tel qu’il est donc difficile de contrôler la température. Des températures élevées entraînera la mort de souris néonatales.</li>
	<li>Préparer et stériliser tous les instruments chirurgicaux avec un autoclave. Les outils nécessaires comprennent : ciseaux micro-dissection, micro-dissection forceps, gaze, hémostatique et aucune suture non résorbable de monofilament de 6-0. Instruments chirurgicaux peuvent être restérilisés avec n’importe quel stérilisateur de perle de verre.</li>
</ol>3. partielle hépatectomie lobulaire
<ol><li>Anesthésier le chiot en le plaçant dans le cône de nez sur son enregistrement précédent et doucement ses pieds et les mains en place. Le chiot devrait recevoir 5 % isoflurane en oxygène.<ol>
<li>Laisser le chiot de s’asseoir pendant 5 min ou jusqu'à ce que suffisamment anesthésiés, qui peut être vérifié par un test du pincement orteil.</li>
		<li>Injecter 5 mg/kg de carprofen par voie sous-cutanée avant l’incision. Remarque : L’opération entière prenne n’est plus que 30 min. de moins bons résultats peuvent être observés chez les nouveau-nés qui sont sous anesthésie générale pendant plus de 30 minutes. Prendre des précautions pour réduire au minimum la durée de la chirurgie par une préparation approfondie de terrain et humidification de la peau avant la fermeture pour minimiser les larmes de suture induite par la peau.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Nettoyez doucement au large de la paroi abdominale postérieure avec une petite compresse humide avec betadine. Permettre la bétadine sécher pendant 1 min.</li>
	<li>Pratiquer une incision cm 0,5 médio-claviculaire gauche juste sous la cage thoracique avec les ciseaux micro-dissection et les forceps. Doucement, séparer la peau à l’aide de pinces et faire une seconde incision plus profonde dans la cavité péritonéale (voir Figure 1, Centre et gauche)</li>
	<li>Exercez une légère pression latérale des deux côtés de l’abdomen à l’aide de la dos, extrémités franches du micro-dissection ciseaux et pinces pour forcer l’apex du lobe gauche hors de la cavité péritonéale. L’apex gauche du lobe gauche devrait être facilement visualisés (Figure 1, droit).</li>
	<li>
À partir de l’apex, amputer et peser la quantité de tissu à enlever.
	<ol>
<li>En utilisant les ciseaux micro-dissection, amputer doucement la quantité désirée de tissu de l’apex du lobe gauche.</li>
		<li>Placer le tissu amputé dans un tube de 1,5 mL rempli avec du PBS. Peser le tissu amputé à l’aide d’une balance analytique (voir Table des matières). Remarque : Placez un morceau de gaze ou du papier sur la balance et tarer il. Puis placez le tissu amputé sur la gaze ou du papier et de mesurer sa masse.</li>
		<li>Difficulté la zone amputée dans 2 % de paraformaldéhyde à température ambiante pendant 1 heure et le lieu de température de coupe optimale (OCT) composée sur la glace sèche pour l’analyse de la section congelée. Analyser les coupes congelées de coupe 7-10 µm des sections à l’aide d’un cryostat standard.</li>
	</ol>
</li>
	<li>À l’aide d’un morceau de rouleau de gaze, remplacer doucement le lobe gauche dans la cavité péritonéale. Laissez la gaze dans la cavité jusqu'à l’arrêt du saignement.</li>
	<li>Retirer la gaze et mouiller le champ opératoire et ses environs avec de la gaze imbibée avec du PBS.</li>
	<li>Fermer le site chirurgical avec monofilament de 6-0, les sutures non résorbables avec le point d’exécution. Le péritoine et la peau doivent être fermés séparément. NOTE : Mouiller doucement la peau avec de la gaze imbibée avec du PBS peut minimiser larmes de suture induite.</li>
	<li>Doucement mais complètement nettoyer le chiot avec une gaze imbibée de PBS et n’Assurez-vous qu’aucun reste de sang ou betadine. Rouler la compresse imbibée et frottez doucement sur le signe de la plaie pour enlever n’importe quel sang ou de la bétadine. NOTE : Ceci est particulièrement important que la mère peut cannibaliser les chiots si ils sont nettoyés insuffisamment.</li>
	<li>Retirer le chiot de la coiffe et le placer sur la zone de récupération qui comprend les tampons de gaze, exposés à des matières fécales et l’urine de la mère. Une fois que le chiot se redresse, remplacer le chiot dans la cage vide avec literie de la mère. Remarque : Ne pas utiliser une lampe chauffante. L’utilisation d’une lampe de chaleur peut provoquer le nouveau-né à surchauffer.</li>
	<li>Répétez la procédure sur le nombre de chiots. Bien que tous les chiots peuvent être utilisés, il est généralement conseillé de laisser quelques petits ne pas opérés à remplacer ainsi que les petits exploités.</li>
	<li>Remplacer tous les programmes potentiellement indésirables simultanément avec la literie de leur mère dans la cage de la mère.</li>
</ol>4. récupération et analyse
<ol><li>
Suite aux souris tous les jours.
	<ol>
<li>Vérifier que la plaie reste fermée et retirez tout petits morts, le cas échéant.</li>
		<li>Si la blessure se rouvre, préparer la zone site et reprise chirurgicale comme précédemment décrits et répéter étapes 3,8 à 3,12.</li>
		<li>Injecter 5 mg/kg de carpofen par voie sous-cutanée de 24 et 48 h après la procédure.</li>
		<li>Suivez les petits pendant 56 jours ou plus.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Euthanasier les animaux après la quantité désirée de jours post-opératoires exposition de dioxyde de carbone (CO2) et de la dislocation cervicale.<ol>
<li>Placez la souris dans l’induction / chambre de l’euthanasie et allumez le CO2 jusqu'à souris arrêtent de respirer.</li>
		<li>S’assurer que l’euthanasie par dislocation cervicale. Poussez vers le bas sur la nuque dorsale de la souris à l’aide de l’évidence-doigt et le pouce et de l’autre main, tirer vers le bas sur la queue.</li>
	</ol>
</li>
	<li>
Supprimer la totalité du foie en bloc et pesez-le.
	<ol>
<li>Soigneusement séparer chaque lobe et peser séparément. Remarque : Retirez le foie par une dissection minutieuse des vaisseaux diaphragme et hépatique et portail. Séparer les lobes de l’autre en disséquant soigneusement chaque lobe à sa fixation proximale.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Déterminer l’étendue de la régénération en comparant la masse du lobe gauche amputée à la masse du foie entier. Un lobe gauche blessé est environ 30 % du foie entier.</li>
</ol>

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</ol>

Les auteurs n’ont aucune divulgation.

Atteinte hépatique aiguë a traditionnellement étudiée à l’aide de produit chimique (acétaminophène, éthanol, tétrachlorure de carbone) ou modèles chirurgicaux (70 % une hépatectomie partielle). La réponse régénératrice après hépatectomie partielle de 70 % a été caractérisée d’impliquer l’hypertrophie des hépatocytes global et plusieurs cycles de division cellulaire4,5. Pour arrêter l’hémorragie, cependant, ce modèle est limité, car les principaux vaisseaux doiven...

La capacité de régénérer un organe, soit de rétablir la forme et la fonction, a été pensée pour être plus souvent perdu au fil du temps évolutionnaire. Le potentiel de régénération du foie chez les mammifères adult après une lésion aiguë chimique ou physique s’est avéré implique la mobilisation de tous les hépatocytes restants aboutissant à des vagues d’hypertrophie et quelques tours de la division cellulaire, résultant en un mais fonctionnel orgue architecture différente1,2,3,4,5. Récemment, les études ont commencé à caractériser le comportement régénératrice d’organes chez les mammifères nouveau-nés à des blessures au sein de la première semaine de vie6,7,8. Ces études ont montré que lorsque blessé durant le développement néonatal, certains organes de mammifères réagissent avec régénération morphologique au lieu de compensatoire croissance ou fibrose7,8.
Des études récentes ont montré que la régénération de la structure globale et la fonction se produit pendant le tôt période néonatale6,7,8. Protocoles établis des lésions hépatiques impliquent des blessures chimiques ou administration d’éthanol9,10,11, acétaminophène12,13,14,15 , tétrachlorure de carbone16,17,18,19, 70 % une hépatectomie partielle4,20,21ou la suppression de la gauche et lobes médians. Administration chimique conduit à la mort des cellules hépatocytes, mais laisse souvent des micro - et macro-structures intactes. Régénération morphologique ne peut être étudiée aisément dans ce contexte, que l’architecture globale hépatique n’était pas oblitéré. L’hépatectomie partielle 70 % implique les ligature de suture des vaisseaux principaux, qui est nécessaire pour arrêter le saignement, mais laisse un environnement non physiologique avec une interruption permanente du système vasculaire. De plus, cette méthode a été utilisée uniquement sur des rongeurs adultes et son application aux nouveaux-nés est techniquement extrêmement difficile. Dans cette optique, nous avons développé une méthode dans laquelle 20 à 30 % de l’apex du lobe gauche est enlevé dans une souris nouveau-née de P0 (Figure 1 a-1 b). Cette méthode est par chirurgie conservatrice, peu invasive, pas techniquement difficile et mène au brut perte de morphologie sans la ligature des vaisseaux, laissant la place à la régénération se produisent. Le protocole étape par étape qui en résulte, décrit ci-dessous, permet pour tout chercheur d’effectuer une hépatectomie partielle lobulaire sur souris néonatales afin d’étudier les mammifères régénération néonatale dans les premiers stades de la vie après l’accouchement. Cette méthode a également des applications claires pour des études comparatives en médecine régénératrice et de la biologie des cellules souches, comme il peut être utilisé dans le foie pendant les derniers stades de la vie.
Les études d’atteinte hépatique aiguë plus courantes sont lésion induite chimiquement, amputation du foie adulte ou 70 % une hépatectomie partielle. Dommages chimiques souvent consiste en une administration par voie intraveineuse, intrapéritonéale ou orale d’acétaminophène, tétrachlorure de carbone ou d’éthanol et sont un modèle relativement simple et non invasif des blessures. Tel que déjà mentionné, les résultats de dommages chimiques dans la mort des cellules hépatocytes, mais souvent les feuilles stroma et parenchyme structures intactes, rendant difficile de faire des revendications sur régénération morphologique. Dommages chimiques souvent se concentre sur les vaisseaux hépatiques, ce qui en fait une technique utile pour étudier le site et blessures spécifiques des cellules, mais rend également difficile à interroger, au niveau des organes entiers, autres populations qui peut être situé plus loin de navires, et qui peut contribuer à la régénération. Malgré ces limites, dommages chimiques reste un modèle de blessures très physiologiquement pertinentes et utiles.
Adulte 70 % une hépatectomie partielle consiste à enlever le lobe gauche et médian après ligature des vaisseaux hépatique. La réponse à une hépatectomie a été bien caractérisée : le foie amputé 14 jours post 70 % une hépatectomie partielle développe une architecture nettement différente de celle du lobe original intact, comme les hépatocytes des lobes restants droite et noyau caudés subir une hypertrophie et quelques cycles de division cellulaire4,5. Cela représente la masse perdue et fonction, mais ne parvient pas à se régénérer les deux lobes amputés et donc ne remplace pas la morphologie générale. En conséquence, la réponse de blessure à 70 % une hépatectomie partielle est utile pour étudier les mécanismes de croissance compensatoire avec régénération limitée.
Nous décrivons ici pleinement un protocole pour une hépatectomie lobulaire partielle néonatale. La procédure implique une sélection animale appropriée et préparation, préparation du champ opératoire, chirurgie et la récupération. Optimisation et adaptation de chacune de ces étapes peuvent être nécessaires pour différentes applications du protocole.
Nous avons largement réalisé et optimisé ce protocole sur les chiots de C57BL/6J de type sauvage (JAX 000664), cependant, afin d’étudier les mécanismes de régénération et les différentes populations cellulaires, nous avons également utilisé divers animaux transgéniques y compris souris associées Cre diverses et CreERT2 transgènes ou knock-ins (JAXAxin2CreERT2 018867, et JAX Sox9CreERT2 018829) en combinaison avec des journalistes fluorescents, telles que l’arc-en-ciel et mTmG (R26VT2/GK3, R26 mT/mG) 22 , 23. nous avons ne trouvé aucun besoin de changer cette méthodologie pour les souches de souris différente, car aucune différence dans les résultats de survie ou potentiel de régénération ont été observés.
En plus d’utiliser des souches animales différentes, nous avons effectué également partielle hepatectomies lobulaire sur souris néonatales traitées avec petites molécules, telles que la 4-hydroxy-tamoxifen et 5-éthynyl-2′-désoxyuridine (EdU). Le diméthylsulfoxyde (DMSO) et éthanol ont été utilisés comme solvants, comme il a été constaté que l’huile de maïs a été une cause importante de morbidité. Dans le cas contraire, nous avons constaté que l’administration intrapéritonéale de petites molécules n’affecte pas la survie ou résultats régénératrices. Nous prédisons que ce protocole sera adapté pour une utilisation avec d’autres petites molécules pour interroger les différents aspects de la régénération.
Chirurgies de souris néonatale peuvent être techniquement difficiles et peuvent nécessiter une expertise particulière en gestion d’animaux et de dissection microscopique. Expertise de l’élevage est nécessaire pour éviter le cannibalisme maternels après une intervention chirurgicale et durant la période de récupération immédiate.

<table><tbody><tr><td>Animals</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Mère avec portée de chiots nouveau-nés du jour 0 (toute souche)</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Mère porteuse et portée de substitution (facultatif)</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Name</td><td>Company</td><td>Numéro de catalogue</td><td>Comments</td></tr><tr><td>Réactifs étalons</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Sérum tamponné au phosphate (PBS)</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Solution antiseptique de providine-iode ou équivalente</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Name</td><td>Company</td><td>Numéro de catalogue</td><td>Comments</td></tr><tr><td>Matériel chirurgical</td><td></td><td></td><td></td></tr> <tr><td>microscope à dissection</td><td>Zeiss</td><td>ZEMSDV4L MFR # 435421-9901-000</td><td></td></tr><tr><td>Micro ciseaux à ressort droit</td><td>3mm Vannas</td><td>72932-01</td><td></td></tr><tr><td>5SF Pince</td><td>Dumont</td><td>11252-00</td><td></td></tr><tr><td>Pince Kelly droite</td><td>Grainger</td><td>17-050G</td><td></td></tr><tr><td>Coussin chauffant</td><td>Sunbeam</td><td>000771-810-000</td><td></td></tr><tr><td>Isoflurane</td><td>Abbott Labs</td><td>0044-5260-05</td><td></td></tr><tr><td>Système d’anesthésie pour rongeurs</td><td>Kent Scientific</td><td>1205S</td><td></td></tr><tr><td>Gaze, 10,16 x 10,16 cm</td><td>Fisher Scientific</td><td>13-761-52</td><td></td></tr><tr><td>Nom</td><td>Entreprise</td><td>Numéro de catalogue</td><td>Comments</td></tr><tr><td>Équipement standard</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Tube de microcentrifugation de 1,5 ml</td><td>Eppendorf</td><td>22363204</td><td></td></tr><tr><td>6-0 sutures monocryles</td><td>Ethicon</td><td>MCP489G</td><td></td></tr><tr><td>Boîte de Pétri</td><td>Fisher Scientific</td><td>S35839</td><td></td></tr><tr><td>Pipet-Aid, Plain, 110V</td><td>Drummond</td><td>4-000-110</td><td></td></tr><tr><td>Mettler Toledo NewClassic ME Balances analytiques</td><td>Fisher Scientific</td><td>01-912-402</td><td></td></tr><tr><td>Chambre d’induction à faible coût</td><td>Kent Scientific</td><td>SOMNO-0730</td><td></td></tr></tbody></table>

une hépatectomie partielle lobulaire : un modèle chirurgical pour la régénération du foie morphologique

Partial Lobular Hepatectomy: A Surgical Model for Morphologic Liver Regeneration

Régénération d’orgue morphologiques suite à la perte de tissu aiguë est fréquente chez les vertébrés inférieurs, mais est rarement observée dans la vie postnatale chez les mammifères. Régénération du foie adulte après hépatectomie partielle de 70 % se traduit par hypertrophie des hépatocytes avec une réplication dans des lobes restants avec la restauration de l’activité métabolique, mais avec une perte permanente de la morphologie et l’architecture de la lobe blessé. Ici, nous détaillons une nouvelle méthode chirurgicale chez le nouveau-né qui laisse un environnement physiologique propice à la régénération. Ce modèle implique l’amputation de l’apex du lobe gauche et un régime de gestion conservatrice subséquente et n’a pas la nécessité d’une ligature des principaux vaisseaux hépatiques ou des lésions chimiques, laissant un environnement physiologique où la régénération peut se produire. Nous étendons ce protocole à des amputations sur des souris (P7-14) juvéniles, au cours de laquelle le foie blessé passe de régénération d’organes à croissance compensatoire par l’hypertrophie. Le protocole présenté, bref 30 min fournit un cadre pour étudier les mécanismes de régénération, son déclin âge-associé chez les mammifères et la caractérisation des souches hépatiques putatif ou progéniteurs.

Figure 1 a détaille une chronologie générale de l’hépatectomie partielle lobulaire néonatale (schématique à la Figure 1 b) et la durée prévue de la période d’attente jusqu'à ce que la régénération est observée. Régénération subtile du lobe gauche peut être observée 7-14 jours post chirurgie. La régénération complète a souvent été observée après que 56 jours après l’intervention chirurgicale. Souris ne devraient montrer aucun sign...

Nous présentons ici une nouvelle méthode pour la résection partielle du lobe hépatique gauche chez les souris néonatales (jour 0). Ce nouveau protocole est convenable pour l’étude d’atteinte hépatique aiguë et réponse de blessures dans le cadre néonatal.

Une hépatectomie partielle lobulaire : Un modèle chirurgical pour la régénération du foie morphologique

Morphological organ regeneration following acute tissue loss is common among lower vertebrates, but is rarely observed in mammalian postnatal life. Adult ...

L’objectif global de cette intervention chirurgicale est d’induire une régénération morphologique du foie par hépatectomie lobulaire partielle. Cette méthode peut répondre à des questions clés dans les domaines de la biologie des cellules souches et de la médecine régénérative sur la régénération morphologique du foie et les cellules souches spécifiques du foie. Les principaux avantages de cette technique sont qu’elle est peu invasive et ne nécessite pas d’agressions chimiques ou de cautérisation.Avant de toucher les animaux, frottez la litière de la cage de la mère sur les gants. Transférez ensuite tous les chiots et une partie de la litière de la cage de la mère dans une cage vide sur un coussin chauffant. Ensuite, placez un chiot sous un microscope à dissection.Après avoir confirmé le niveau approprié de sédation par absence de réponse au pincement des orteils, utilisez un petit tampon de gaze pour désinfecter la paroi abdominale postérieure de l’animal avec de la bétadine. Utilisez des ciseaux de micro-dissection et des pinces pour faire une incision d’un demi-centimètre médio-claviculaire gauche immédiatement sous la cage thoracique. Utilisez la pince pour séparer délicatement

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Research

Recherche

JoVE Journal

Developmental Biology

Biologie du développement

Une incidence élevée de récidive tumorale après résection de métastases hépatiques reste un problème non résolu. Le modèle murin illustré peut être utile pour étudier les raisons de telles récurrences. Il combine pour la première fois un modèle de résection hépatique avec une injection intrahépatique de cellules tumorales.

L&#39;influence de la résection hépatique sur la croissance de la tumeur intrahépatique

Induction rapide hypertrophie du foie par une hépatectomie Staged associant la Partition de foie et de la ligature de la veine porte (ALPPS) a été proposé pour la résection de tumeurs hépatiques résécables borderline. Ce modèle peut élucider les mécanismes impliqués dans l’hypertrophie rapide et permet de tester des médicaments qui favorisent ou bloquent l’accélération de la régénération.

Modèle de rat de la Partition du foie associant et la ligature de la veine porte pour la procédure de mise en scène une hépatectomie (ALPPS)

Nous avons décrit un protocole permettant d’effectuer une hépatectomie partielle (PHx) et la transplantation de cellules par l’intermédiaire de rate en clin de œil. SCID (CLIN De ŒIL. CB17-Prkdcscid/J) souris. Dans ce protocole, une incision est faite pour exposer et résection du lobe gauche du foie suivi d’une autre incision pour la transplantation intra-splénique de cellules.

Intra-splénique Transplantation d’hépatocytes après hépatectomie partielle en clin de œil. Souris SCID

Nous établissons une nouvelle technique chirurgicale pour un modèle de perfusion in vivo seul lobe de foie de rat comme une condition sine qua non pour étudier plus en vivo foie partielle d’ingénierie à l’avenir.

Une nouvelle Technique chirurgicale comme fondement pour In Vivo partielle génie hépatique chez le Rat

Ce protocole décrit la procédure pour enlever le lobe ventral du foie dans le poisson zèbre adulte pour permettre l’étude de la régénération de foie.

Hépatectomie partielle chez le poisson zèbre adulte

Les hépatocytes chargés de lipides sont inhérents à la régénération du foie, mais sont généralement perdus lors de la centrifugation par gradient de densité. Ici, nous présentons un protocole d’isolement cellulaire optimisé qui conserve les hépatocytes stéatotiques, produisant des populations représentatives d’hépatocytes en régénération après hépatectomie partielle chez la souris.

Isolement des hépatocytes régénérants après hépatectomie partielle chez la souris

De nombreuses études ont démontré les avantages de la résection anatomique. Néanmoins, la question de savoir si la résection anatomique peut augmenter les taux de résection R0 reste controversée. Par conséquent, la présente étude décrit une procédure innovante impliquant le concept en bloc combiné à la résection anatomique dans l’hépatectomie laparoscopique, qui peut réduire la récidive postopératoire et les métastases.

Application du concept en bloc combiné à la résection anatomique dans l’hépatectomie laparoscopique

Il a été démontré que l’association de la partition hépatique et de la ligature de la veine porte pour l’hépatectomie échelonnée (ALPPS) entraîne une régénération hépatique remarquable plusieurs semaines après la première étape de la chirurgie. Des modèles animaux ayant subi l’ALPPS ont été développés pour explorer la capacité potentielle de régénération du foie et obtenir des résultats cliniques favorables.

Modèle murin de l’association de la partition hépatique et de la ligature de la veine porte pour une procédure d’hépatectomie échelonnée assistée par microscopie

Les organoïdes générés à partir des tumeurs des patients sont injectés orthotopiquement dans le foie de la souris. La résection du tissu hépatique non tumoral conduit à un environnement régénérateur dans le tissu hépatique où se trouve la tumeur.

Un modèle de xénogreffe organoïde dérivé d’un patient atteint d’un cancer hépatocellulaire pour étudier l’impact de la régénération hépatique sur la croissance tumorale

Le modèle murin d’hépatectomie partielle de 2/3 (66 %) est bien décrit dans la littérature, mais les hépatectomies plus étendues imitant le syndrome de petite taille après une transplantation hépatique ont rarement été utilisées. Nous décrivons une procédure d’hépatectomie prolongée à 78 % dans un modèle murin qui entraîne une létalité postopératoire d’environ 50 % chez des souris saines.

Hpatectomie prolongée à 78 % dans un modèle chirurgical de souris

Découvrez une hépatectomie partielle lobulaire minimalement invasive chez les souris néonatales pour étudier la régénération hépatique morphologique. Cette méthode permet d'explorer la biologie des cellules souches hépatiques sans lésion chimique.

Une hépatectomie partielle lobulaire : Un modèle chirurgical pour la régénération du foie morphologique

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