Évaluation axée sur l’activité anorexie chez la souris

L’objectif global de cette expérience est d’examiner la neurobiologie et le comportement sous-jacents à l’anorexie mentale. Cette méthode peut aider à répondre à des questions clés dans le domaine de la psychiatrie liées aux troubles de l’alimentation, telles que quels sont les fondements neuronaux de l’anorexie mentale et quels circuits cérébraux sont impliqués. Le principal avantage de cette technique est qu’elle peut être utilisée pour étudier certains mécanismes sous-jacents de l’anorexie, qui ne peuvent pas être évalués chez l’homme.

Configurez une zone d’expérimentation en choisissant un porte-cage à proximité de l’ordinateur portable et des moyeux de roue. Cela limitera les problèmes de transmission des données. Activez maintenant la connexion entre les moyeux de roue et le logiciel.

Ouvrez d’abord le logiciel de gestion des roues pour vous assurer que les deux moyeux sans fil sont actifs. À partir du logiciel, réinitialisez les connexions de roue par défaut. Ouvrez les outils et sélectionnez Supprimer les roues.

Répétez cette étape cinq fois, puis fermez le logiciel et rouvrez-le. Ensuite, fournissez de la puissance aux roues. Connectez les fils de la batterie à la quincaillerie de la roue et insérez les batteries dans l’empattement.

Alors jetez un coup d’œil au logiciel. L’empattement doit être indiqué avec l’ID d’un sous le moyeu sans fil approprié. Si ce n’est pas le cas, décrochez la batterie, supprimez la roue dans le logiciel et réessayez.

Si la roue est reconnue, remplacez l’ID par l’ID de l’animal approprié.Ensuite, collez la base de la roue de course au fond de la cage avec du ruban adhésif pour assurer la stabilité. Ne laissez pas le ruban dépasser car les souris mâcheraient le ruban exposé. Ensuite, placez un disque de roue de roulement sans aimant corrodé sur la base et tournez la roue pour vérifier le dégagement des parois de la cage et de la grille.

Faites tourner le disque et vérifiez que chaque révolution est correctement enregistrée avec le logiciel. Ensuite, utilisez du ruban adhésif pour fixer le pot de nourriture à la cage. Positionnez-le loin de la roue de course et de la bouteille d’eau.

Ensuite, placez deux morceaux de nourriture dans le bocal, fixez une bouteille d’eau pleine à la cage et ajoutez de la litière au fond de la cage. Une fois que toutes les cages ont été préparées de cette manière, placez individuellement les souris dans leurs cages appropriées. Une fois que toutes les souris sont dans leurs cages, allez dans le logiciel et cliquez sur fichier, puis lancez l’acquisition.

Tout au long de l’expérimentation, de nouvelles acquisitions viennent rompre les phases d’essai. Laissez maintenant les souris s’acclimater aux conditions de logement pendant deux jours complets. Au cours de cette phase, décidez si chaque souris est en assez bonne santé pour gérer l’expérience ABA.

Le troisième jour de l’expérience, mesurez environ neuf grammes de nourriture et notez le poids au 1/1000 de gramme. Ensuite, retirez soigneusement la souris de la cage et pesez-la dans un grand bécher en plastique au dixième de gramme près. Faites-le avec un minimum de stress pour la souris.

Une fois la souris hors de la cage, recherchez et retirez toute la nourriture dans la cage. En plus de retirer la nourriture dans le bocal, regardez à travers la litière pour trouver de la nourriture éparpillée. Ensuite, si nécessaire, nettoyez la roue de roulement avec 70 % d’isopropanol et des serviettes en papier.

Avant de remettre la souris dans sa cage, assurez-vous que l’isopropanol a séché. Ensuite, chargez la souris et les neuf grammes de nourriture dans la cage. Le lendemain, retournez à l’animalerie dans les 10 minutes suivant la dernière visite.

Chargez à nouveau neuf grammes de nourriture dans un petit bécher en plastique et notez le poids exact. Encore une fois, retirez doucement la souris et pesez-la avec un minimum de stress pour la souris. Retirez maintenant le pot de nourriture de la cage et examinez-le.

Retirez tous les excréments à l’aide d’une pince à épiler et utilisez une passoire sur le bécher pour retirer la litière. Émiettez les plus gros morceaux de nourriture pour qu’ils passent à travers le filtre en ne laissant que de la litière dans la passoire. Ensuite, fouillez la litière de la cage à la recherche de restes de nourriture et ajoutez-les dans le bécher.

Enregistrez ensuite la masse de nourriture qui est restée dans la cage. Ensuite, essuyez le bocal et remettez-le vide dans la cage. Appliquez du nouveau ruban adhésif si nécessaire.

Chargez ensuite le pot avec la ration alimentaire préparée de neuf grammes. Comme précédemment, nettoyez toutes les roues de roulement sales et remettez-les dans les cages. Réinitialisez toutes les cages de cette manière tous les jours.

Les jours cinq, sept et neuf, redémarrez le programme d’acquisition de données informatiques dans le programme de rouage. Après avoir collecté les données de base, le 11e jour, redémarrez l’acquisition des données et commencez la phase de restriction. En gros, suivez le protocole de base avec quelques modifications.

Tout d’abord, ne dégagez pas les roues de roulement lorsque vous changez les aliments. Deuxièmement, limitez l’accès des animaux à leur ration de nourriture de neuf grammes à seulement six heures. La période d’alimentation peut être diurne ou nocturne.

Les deux choix ont du mérite. Après six heures, pesez la nourriture restante dans le bocal et la cage. À ce stade, si nécessaire, nettoyez la roue, mais faites-le rapidement afin que la cage suivante puisse être rapidement prise en charge.

Chaque jour de la phase de restriction, répétez cette procédure. Maintenant, il devient très important de surveiller la perte de poids des animaux. Si une souris tombe à 75 % de son poids corporel de base, retirez-la de l’expérience.

Fournissez à ces souris de la nourriture illimitée depuis le sol de la cage et aucun accès à une roue de course. Une fois que toutes les cages ont été évaluées, euthanasiez les souris abandonnées, à moins que leur rétablissement ne soit étudié. À l’aide de l’expérience décrite, un groupe de souris anorexiques basées sur l’activité a été évalué avec trois groupes témoins.

À la suite de la procédure décrite, la nourriture a été limitée à six heures diurnes. Lorsqu’une souris a été retirée de l’étude en raison d’une perte de poids excessive, une souris témoin sélectionnée au hasard l’a été également. Le poids corporel a été réduit du un au cinquième jour dans les deux groupes exposés à l’alimentation programmée, ce qui est logiquement corrélé à une réduction de l’apport alimentaire.

Curieusement, la perte de poids n’a eu aucun effet sur l’activité de course à la roue. Après l’étude comportementale, les cerveaux ont été récoltés et congelés pour une analyse biochimique. Une analyse du tissu de l’aire tegmentale ventrale a montré que le roulement de la roue augmentait significativement l’expression du BDNF tandis que la restriction alimentaire augmentait l’expression de l’ARNm NCAM1 mais ne modifiait pas l’expression de l’ARNm du BDNF.

Lorsque vous tentez cette procédure, il est important de ne pas oublier de limiter le stress sur les souris, d’être cohérent dans le chronométrage de vos mesures, d’être patient afin d’obtenir des lectures précises et de vérifier constamment sur le logiciel de roulement des roues pour tout problème technique. Suite à cette procédure, d’autres méthodes telles que l’immunohistochimie et la liaison aux radioligands peuvent être effectuées sur des cerveaux de souris afin de répondre à des questions supplémentaires relatives à la fonction du virus dans le paradigme de l’anorexie.