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DOI: 10.3791/57489-v
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Ce protocole décrit une méthode pour étudier la possibilité de metamemory, ou de la conscience de mémoire, chez les rongeurs. Le paradigme de retard correspondant-à l’échantillon axée sur l’odeur est un roman, écologiquement pertinents comportemental test utile pour évaluer le degré auquel les rongeurs adaptative peuvent répondre basé sur le contrôle cognitif de la force de leurs États de la mémoire.
L’objectif global de cette expérience est de déterminer dans quelle mesure les rongeurs réagissent métacognitivement en présentant aux sujets des tests de mémoire qui peuvent être refusés. Cette méthode peut aider à répondre à des questions clés dans le domaine de la psychologie comparée, telles que déterminer dans quelle mesure les rats surveillent la mémoire. Le principal avantage de cette technique est qu’elle est relativement facile à apprendre pour les rats car elle capitalise sur le comportement naturel de recherche de nourriture et le sens primaire de l’olfaction.
Cette technique a été soigneusement créée pour que les résultats des tests comportementaux soient valides et fiables. Par exemple, nous avons équilibré l’intervalle entre les essais avec la taille définie à partir de laquelle les odeurs de l’échantillon ont été tirées afin qu’il y ait une interférence de mémoire optimale. Nous avons eu l’idée de cette méthode à partir de paradigmes similaires en utilisant des stimuli visuels chez les singes ainsi que des expériences sans rapport dans lesquelles des rats sont présentés avec des odeurs à retenir en creusant dans des gobelets remplis de sable.
Le protocole décrit l’assemblage de l’appareil d’essai, l’accoutumance des rats à l’appareil d’essai et le fait de creuser dans des gobelets de sable pour obtenir des récompenses alimentaires. Une fois qu’une préférence alimentaire significative est établie, le rat peut procéder à l’entraînement d’appariement à l’échantillon. Pour ce test, quatre tasses différentes de sable parfumé doivent déjà être préparées et ne pas avoir plus d’une semaine.
Conservez le sable parfumé dans des récipients en verre hermétiquement fermés. Chaque session de test d’appariement à l’échantillon se compose de six essais avec des intervalles de quatre minutes entre les essais. Pour qu’un animal réussisse cette formation, le rat doit identifier correctement la récompense cachée dans au moins trois essais sur deux sessions de test consécutives.
Pour mettre en place le test d’appariement à l’échantillon, versez une demi-tasse de chaque sable parfumé dans quatre tasses. Ensuite, en suivant la position attribuée au hasard par le logiciel, disposez les tasses à égale distance de la porte d’entrée dans la zone de tâche de l’appareil. Ensuite, enterrez une récompense complète dans la tasse parfumée correcte choisie au hasard.
N’utilisez pas la même tasse plus de deux fois de suite. Enterrez également un demi-morceau de récompense dans une tasse d’échantillon parfumée de la même manière. Enterrez les récompenses au moins à mi-chemin jusqu’au fond de la tasse de sable.
Commencez le test en présentant l’odeur de l’échantillon au rat. Placez le rat dans la chambre d’échantillonnage en passant par la chambre de retard intermédiaire. Abaissez ensuite la tasse contenant la demi-récompense dans la chambre à l’aide d’une spatule pliée.
Dès que le rat commence à manger la récompense, retirez la coupe. Une fois que le rat a fini de manger la récompense, soulevez le séparateur de pièce en carton jusqu’à la chambre de retard et le séparateur vers la zone de tâche MTS. Dès que le rat fait un choix et récupère une récompense si présente, retirez-le de la chambre et placez-le dans la cage de transfert.
Le rat peut renifler et va probablement renifler chaque tasse, mais ne lui permet de creuser que dans une seule tasse. S’il ne choisit pas correctement, retirez-le rapidement pour éviter d’autres choix de bonnets. Une fois dans la cage de transfert, démarrez un ITI de quatre minutes et pour empêcher le rat de voir la prochaine configuration d’essai, protégez la cage.
Pendant la période de repos, aspirez le sable qui aurait pu se renverser, nettoyez la chambre avec de l’alcool isopropylique à 70 %, retirez les récompenses non consommées et remplissez les gobelets de sable au besoin. Préparez ensuite la prochaine tasse d’échantillon pseudo sélectionnée au hasard avec la moitié de la récompense. Configurez la zone d’intervention et effectuez l’essai suivant.
Une fois la séance terminée, retournez le rat dans sa cage d’origine et commencez à tester le rat suivant. Après avoir réussi la tâche MTS, passez au test DMTS (Delayed Match-To-Sample) pour établir un critère de retard. Cette tâche est similaire au MTS, mais ajoute essentiellement un intervalle de rétention entre l’administration de l’échantillon au rat et le moment où il doit exécuter le test.
Lorsque les rats ont un taux de réussite compris entre 40 et 70 %, l’intervalle de retard est suffisant pour faire passer les rats à l’essai forcé par rapport à l’essai au choix. Avant de commencer les essais forcés contre le choix, effectuez d’abord deux essais dans lesquels le rat ne trouve que le gobelet décliné dans la salle de travail. La tasse déclinée est chargée de sable d’une couleur et d’une texture différentes.
Il est chargé d’une récompense d’un quart. Les traînées forcées par rapport aux pistes de choix sont comme les tests DMTS, mais dans huit des 12 tests, la coupelle déclinée est proposée du côté opposé de la chambre par rapport aux quatre coupes MTS. Effectuez 10 séances de contrôle forcé par rat.
Lors de chaque essai, lorsque le rat entre dans la chambre de retard, notez si le rat se tourne d’abord à gauche vers la tasse de déclin ou vers la droite pour passer le test MTS. Il s’agit du choix de la métamémoire de perspective. Après deux séances, calculez la précision du rat sur les essais forcés.
Si la précision du rat dépasse 70 % ou tombe en dessous de 40 %, cessez les tests forcés par rapport aux tests de choix et revenez aux tests DMTS. Une fois que la précision du rat est à nouveau entre 40 et 70 % sur deux sessions DMTS consécutives, revenez aux sessions de trail forcé versus choix. Déterminez également si, sur deux sessions, le choix de refus s’approche de zéro ou de 100 %Dans ce cas, mettez le test en pause et envisagez de modifier la taille de la récompense dans la tasse de refus.
L’objectif est d’obtenir un taux de déclin du choix compris entre 10 et 40 %Tout au long du test forcé par rapport au choix, assurez-vous que les préférences du rat restent les mêmes en effectuant des vérifications de préférence une fois par semaine, comme décrit dans le protocole textuel. Assurez-vous toujours que la chambre d’essai est nettoyée à l’isopropanol après chaque essai. En fonction de leur critère de délai, il peut être possible de tester deux ou trois rats en même temps, ce qui rendra le nettoyage en profondeur particulièrement critique.
Afin d’étudier la réponse métacognitive du sujet, la proportion d’essais forcés corrects est comparée à la proportion d’essais correctement choisis ou d’essais dans lesquels il existe une option de déclin. Un résultat positif est indiqué par une précision nettement plus élevée sur les essais choisis par rapport aux essais forcés. Si les performances ne sont pas significativement plus précises sur les essais choisis que sur les essais forcés, les résultats sont nuls.
Cette absence hypothétique de preuves de métamémoire chez le rat est indiquée par l’absence d’utilisation de l’option du test de déclin alors qu’il aurait été adaptatif de le faire lors d’essais au cours desquels l’échantillon a été oublié. Après avoir regardé cette vidéo, vous devriez avoir une bonne compréhension de la façon de tester les rats pour la réponse métacognitive à l’aide d’un test de correspondance retardée avec du sable parfumé. Une fois maîtrisé, un rat peut être testé dans une session de correspondance à échantillon en environ 45 minutes selon le délai du rat si cela est effectué correctement.
En essayant cette procédure, il est important de se rappeler que les rats doivent être habitués à l’appareil, avoir une forte préférence pour les récompenses et un intervalle de rétention sélectionné et surveillé individuellement.
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