Analyse en temps réel la pression-volume de l’infarctus aigu du myocarde chez la souris

Cette méthode peut aider à répondre à des questions clés dans le domaine de la recherche cardiovasculaire, telles que l’identification de mécanismes de protection précoces en cas d’infraction aiguë de myocardie. Le principal avantage de cette technique est qu’une caractérisation hémodynamique avancée peut être réalisée en temps réel chez des souris subissant un infarctus du myocarde suivi d’une reperfusion. L’intubation endotrachéale et la chirurgie de reperfusion d’ischémie seront réalisées par Pia Stock, biologiste de notre laboratoire.

Après avoir anesthésié l’animal, retirez les poils du cou et de la poitrine à l’aide d’une tondeuse électrique. Ensuite, nettoyez la peau avec trois gommages alternés de bétadine et d’alcool à 70 %. Maintenant, à l’aide de petits ciseaux chirurgicaux, faites une incision médiane longitudinale de 10 millimètres à cinq millimètres sous la lèvre inférieure et vers le sternum.

Ensuite, disséquez brutalement les parties gauche et droite de la glande sous-mandibulaire à l’aide d’une pince. Ensuite, séparez le tissu musculaire et adipeux dans la région paratrachéale droite pour accéder à l’artère corrodée commune droite. À l’aide d’une pince incurvée, disséquez soigneusement et brutalement le récipient pour le mobiliser et en séparer de cinq à 10 millimètres.

Évitez toujours de déplacer le nerf vague dans le corps corrodé, car cela peut entraîner une hypotension sévère et une bradycardie. Après la mobilisation du vaisseau, passez les deux sutures en soie 5/0 préparées sous le vaisseau. Ensuite, ligaturez le vaisseau distal à l’aide d’un nœud serré et placez un nœud lâche sur la suture proximale où le cathéter ira.

Ensuite, placez une pince vasculaire hémostatique sur l’extrémité proximale du vaisseau exposé, à proximité de la suture. Celui-ci sera utilisé pour bloquer de manière réversible la circulation sanguine. Maintenant, à l’aide de microciseaux, ouvrez le vaisseau avec l’incision en forme de coin d’un millimètre à proximité du nœud crânien.

Une petite goutte de sang doit être vue. Ensuite, étirez l’incision et insérez le cathéter à 10 millimètres dans le vaisseau. Maintenant, commencez à enregistrer les données collectées par la sonde de cathéter.

Ensuite, extrayez la pince vasculaire, puis ajoutez une ou deux gouttes de solution saline dans l’incision pour aider à faire glisser le cathéter sur 10 millimètres supplémentaires dans le vaisseau. Ensuite, resserrez le nœud pour éviter le reflux sanguin le long du cathéter sans verrouiller le cathéter en place. Maintenant, continuez doucement à faire avancer le cathéter jusqu’à ce que l’analyse de la pression montre un profil de pression artérielle lorsque le cathéter a atteint l’aorte.

Au niveau de la valve aortique, une légère résistance et un mouvement synchronisé de traction doivent également être ressentis. Lorsque vous essayez de faire avancer le cathéter à travers la valve aortique, il peut être utile de le tirer vers l’arrière de cinq millimètres et d’avancer à nouveau. Un cathétérisme ventriculaire gauche approprié sera indiqué par une modification de la pression diastolique.

Tout changement de volume est également un indicateur de l’avancement du capteur vers le ventricule gauche. Une fois certain que le cathéter se trouve dans le ventricule gauche, serrez plus étroitement le nœud proximal pour l’empêcher de bouger. Après le cathétérisme, préparez l’ischémie de 45 minutes.

Tout d’abord, incisez la peau du sternum caudal à l’aisselle gauche. Procédez ensuite à la préparation émoussée des deux couches musculaires pour exposer les côtes. Ensuite, ouvrez le thorax avec une incision entre la troisième et la quatrième côte gauche.

Utilisez des crochets chirurgicaux pour accéder au péricarde, puis réséquez le péricarde recouvrant le cœur. Avant de poursuivre la ligature de l’artère coronaire principale gauche, attendez 30 secondes sans toucher l’animal pour enregistrer les données de pression et de volume afin d’obtenir une analyse valide. Maintenant, identifiez l’artère coronaire principale gauche.

Il émerge sous l’oracle gauche et descend du côté gauche du cœur vers le sommet. Ensuite, enroulez une suture en polypropylène 6/0 autour de l’artère à deux millimètres sous l’oracle gauche. Ensuite, placez un petit tube de silicone sous la boucle et fixez-le avec un nœud.

Si le myocarde distal commence à devenir gris, c’est que l’artère coronaire principale gauche a été occluse. Pour continuer, coupez la suture à un millimètre de longueur, puis relâchez les crochets chirurgicaux et fermez manuellement les couches musculaires au-dessus de l’incision. Attendez ensuite 45 minutes tout en enregistrant en continu les données de pression et de volume.

Après 45 minutes, rouvrez l’incision et retirez le tube de silicone pour induire la reperfusion. Enregistrez ensuite les données pendant 20 minutes supplémentaires. Lorsque le cœur redevient rouge, la reperfusion est réussie.

Après la période de reperfusion, desserrez le nœud et extrayez le cathéter tout en fixant rapidement le nœud à nouveau pour éviter la perte de sang si du sang est nécessaire pour des études ultérieures. Une fois les étapes d’étalonnage terminées, qui sont détaillées dans le protocole texte, effectuez une analyse de données guidée par logiciel. Pour les données de base, mettez en évidence au moins 10 cycles effectués avant le passage du cathéter dans la valve aortique.

Au besoin, excluez les cycles présentant des écarts dus à la ventilation ou à la manipulation. Ensuite, analysez 10 blocs de cycles à des intervalles de cinq minutes à travers l’ischémie et la reperfusion. Les différents paramètres calculés par cette analyse sont suffisants pour caractériser la fonction ventriculaire gauche.

À la fin de l’expérience, après que le cathéter a été rétracté du ventricule gauche, effectuez une analyse finale des données de pression. Selon le protocole, après le cathétérisme ventriculaire gauche, une ligature réversible de l’artère coronaire principale gauche a été réalisée pendant 45 minutes, suivie de 20 minutes de reperfusion. Le placement correct du cathéter de volume et de pression a été confirmé par l’obtention du graphique caractéristique pression-volume ventriculaire gauche.

L’occlusion réussie de l’artère coronaire principale gauche a été confirmée visuellement par le blanchiment du myocarde ventriculaire gauche distal. Après l’occlusion de l’artère coronaire principale gauche, les données de pression et de volume ont été analysées à des intervalles de cinq minutes. Les données de pression n’ont montré aucun changement de la pression systolique ventriculaire gauche maximale, indiquant une perfusion périphérique préservée et une anesthésie stable.

L’analyse du volume ventriculaire gauche a révélé que pendant la phase précoce de l’ischémie, il y avait une diminution significative de la fraction d’éjection et du volume absolu systolique. Le changement maximal de pression, un paramètre de la contractilité ventriculaire gauche, a montré une réduction de 30 % chez les souris subissant une ischémie myocardique. Le changement minimal de pression a également diminué de manière significative, indiquant une altération de la compliance ventriculaire gauche.

Après avoir regardé cette vidéo, vous devriez avoir une bonne compréhension de la façon de caractériser la fonction systolique et diastolique ventriculaire gauche chez les souris subissant un infarctus aigu du myocarde à l’aide de la technique du cathéter pression-volumes.