Caractérisation des Thymus-dépendants et indépendants de Thymus immunoglobuline Isotype réponses chez la souris à l’aide d’Enzyme-linked Immunosorbent Assay

Cette méthode peut aider à répondre à des questions clés dans le domaine de l’immunologie sur les réponses dépendantes et indépendantes des anticorps induites par l’immunisation antigénique, ainsi que sur l’activation des lymphocytes B et les réactions du centre germinal. Le principal avantage de cette technique est qu’elle fournit des mesures fiables et quantitatives de la réponse isotypique des Ig avec une comparaison directe de l’activation des lymphocytes B et de l’immunité humorale chez la souris. Pour l’immunisation TNP-polysaccharide, chargez une seringue d’insuline d’un millilitre par souris avec 100 microlitres de solution d’antigène fraîchement préparée et insérez l’aiguille dans le quadrant inférieur droit de chaque animal à un angle d’environ 30 degrés pour éviter l’injection dans l’organe inférieur.

Lorsque toutes les souris ont été injectées, retournez les animaux dans leurs cages pour les loger dans une installation spécifique exempte d’agents pathogènes. Aux points expérimentaux appropriés, prélever 150 à 200 microlitres de sang de chaque animal immunisé par saignement rétro-orbitaire et laisser les échantillons coaguler à température ambiante pendant une à deux heures. À la fin de l’incubation, centrifugez les échantillons de sang coagulé et transférez le sérum clair du haut de chaque caillot sanguin dans un tube de microcentrifugation stérile de 1,5 millilitre.