Un labyrinthe en t automatisée basée appareil et protocole d’analyse de retard - et fondé sur l’Effort de prise de décision chez les rongeurs de déplacement gratuit

Le labyrinthe en T traditionnel peut être utilisé pour tester à la fois la prise de décision basée sur le retard et l’effort. Dans le travail actuel, nous avons inventé un appareil de labyrinthe en T avec des enregistrements automatisés de livraison de nourriture, de gestion des portes et de choix de bras. Notre protocole ici peut faire économiser considérablement du temps et de la main-d’œuvre aux chercheurs lors de l’analyse de la capacité de prise de décision des rongeurs.

Ce protocole peut aider à répondre aux questions clés dans les domaines de la prise de décision, telles que quels sont les circuits neuronaux et les molécules clés qui sous-tendent la procédure de prise de décision, et quelles sont les causes neuropathologiques sous-jacentes aux déficits de prise de décision dans les maladies psychiatriques ? L’implication de ce protocole s’étend au traitement de la maladie neuropsychiatrique car de nombreux patients présentent des difficultés ou un déficit dans la prise de décision. Habituez les souris au labyrinthe pendant 10 minutes par jour et totalement pendant cinq jours.

Gardez toutes les portes du labyrinthe ouvertes pendant l’habituation. Le premier jour, dispersez les granulés de nourriture dans tout le labyrinthe. Ensuite, placez les souris dans la boîte de démarrage du labyrinthe en T par groupes de quatre et permettez-leur d’explorer le labyrinthe pendant 10 minutes.

Les deuxième et troisième jours, dispersez les plombs le long des deux bras de but. Laissez les souris explorer le labyrinthe pendant 10 minutes. Enfin, les quatrième et cinquième jours d’accoutumance, ne placez les granulés que très près des distributeurs de nourriture et près des deux boîtes de but.

Laissez les souris explorer le labyrinthe pendant 10 minutes. Pour la phase d’entrée forcée du bras, commencez par configurer les paramètres du logiciel de contrôle. Réglez la durée sur 900 secondes.

Réglez le délai de démarrage par défaut à trois secondes, le nombre de pastilles à un pour LRA et quatre pour HRA, et réglez le temps de retard à zéro seconde. Enregistrez l’ID de chaque souris individuelle dans le logiciel et l’emplacement de l’HRA pour chaque souris individuelle, soit sur le côté gauche, soit sur le côté droit. Ensuite, entrez dans la fenêtre de l’interface de l’expérience, placez la souris dans la boîte de démarrage et lancez l’entraînement en appuyant sur le bouton de démarrage de la télécommande.

Notez lors de chaque épreuve, seules les portes menant à un bras seront ouvertes, tandis que les portes du bras opposé ne seront pas ouvertes, et les portes s’ouvrent ou se ferment automatiquement en fonction de la position de l’animal. Ici, la souris a été forcée d’entrer dans l’HRA du côté gauche lors du premier essai et de manger les quatre granulés, puis d’entrer dans le bras du côté droit lors du deuxième essai pour manger la seule boulette. Cette phase permet à la souris d’apprendre la position de HRA et LRA.

Pour la phase d’entrée en main libre, paramétrez les paramètres en utilisant la même méthode que celle utilisée pour la phase d’entrée forcée. Placez la souris dans la boîte de démarrage, appuyez sur le bouton de démarrage, puis laissez la souris choisir librement un bras, soit HRA ou LRA. Commencez par régler le temps de retard de l’HRA sur cinq secondes, 10 secondes et 15 secondes le premier jour, le deuxième et le troisième jour, respectivement.

Définissez le numéro de phase. Réglez tous les autres paramètres de la même manière que la phase d’entrée forcée du bras. Permettez à la souris de choisir librement un bras, soit HRA ou LRA.

Dans les deux essais présentés ici, la souris a choisi l’ARL dans le premier essai et a choisi l’ARH dans le deuxième essai. Ensuite, pour le test de prise de décision basé sur l’effort, introduisez l’obstacle à la HRA. Laissez les souris choisir librement un bras, soit HRA ou LRA.

Ici, la souris a choisi d’escalader la barrière pour obtenir une récompense plus élevée. Une fois l’expérience terminée, obtenez les données et les résultats du logiciel de contrôle. Recherchez toutes les données expérimentales dans le dossier data.

Enfin, vérifiez les éléments dans le dossier de résultats, la durée, le numéro d’essai, le numéro de choix HRA, le numéro de choix HRA, le pourcentage de choix HRA, le pourcentage de choix DRA, la distance totale de déplacement et le temps total de jonction sous chaque ID d’animal.Les résultats présentés ici montrent les différences entre la capacité de prise de décision basée sur le retard et l’effort entre les souris habénulaires médiales ablées avec leurs compagnes de portée, les souris témoins de type sauvage. Pour le test de prise de décision basé sur le retard, l’effet principal du génotype n’était pas significatif lorsque le temps de retard était de cinq secondes. Cependant, lorsque le temps de retard a été allongé à 10 secondes et 15 secondes, les souris ablées habénulaires médiales ont démontré une réduction significative du pourcentage de visites HRA par rapport aux souris CT.

Enfin, dans le test de prise de décision basé sur l’effort, le pourcentage de visites d’ERS a diminué de manière significative chez les souris ablées habénulaires médiales lorsqu’une barrière a été placée dans l’HRA, indépendamment de la localisation gauche/droite de l’HRA. Lors de la tentative de cette procédure, il est important de se rappeler que la restriction alimentaire doit être effectuée tout au long de toutes les procédures de formation pour s’assurer de la motivation du rongeur à effectuer la tâche. De plus, n’oubliez pas d’utiliser les granulés de 10 milligrammes et d’utiliser du gel de silice dans les distributeurs de nourriture pour garder les granulés au sec.

À la suite de cette procédure, d’autres méthodes telles que l’enregistrement in vivo des électrodes, l’imagerie par fibre optique, la manipulation de l’optogénétique et la microdialyse peuvent être effectuées afin de répondre à des questions supplémentaires, par exemple, les changements dynamiques de l’excitabilité de populations cellulaires spécifiques lors de l’actualisation du retard et de l’effort et les changements dynamiques des neuropeptides, des neurotransmetteurs et des hormones lors de la prise de décision. En un mot, la configuration actuelle et le protocole que nous avons développé permettent aux chercheurs d’analyser efficacement la prise de décision des rongeurs, avec une automatisation complète, une standardisation et une capacité de débit élevée. Nous pensons que notre invention peut aider à élucider le mécanisme sous-jacent à la prise de décision pour des conditions physiologiques et pathologiques.