Un modèle murin d’ostéogenèse Distraction
14 novembre 2018
Nous présentons un souris tibial distraction ostéogénèse modèle développé à l’aide d’un distracteur sur mesure. L’utilisation d’une souris comme une cible d’analyse est avantageuse pour faire avancer la recherche.
Cette méthode peut aider à répondre aux questions clés dans le domaine de la régénération des tissus durs et mous. Le principal avantage de cette technique est que l’utilisation d’une souris permet une analyse détaillée de la régénération osseuse. Commencez par une souris adulte entièrement anesthésiée.
Raser et désinfecter soigneusement la zone chirurgicale avec une solution à 10% d’iode. Ensuite, administrer 0,5% d’hydrochlorure lidocaïne au membre inférieur droit. Puis, après avoir fait une incision longitudinale de la peau de 15 millimètres à la jambe inférieure droite avec un scalpel numéro 15, séparer brutalement les muscles sous-jacents, en prenant soin de ne pas enlever tout périoste.
Ensuite, coupez le péroné avec des ciseaux. Saisissez la cheville avec des forceps étroits et minces, et utilisez une aiguille de calibre 27 pour faire un trou dans l’os, à environ cinq millimètres du talon. L’aiguille doit pénétrer dans la peau, l’os et la peau dans cet ordre.
Lorsque l’aiguille pénètre complètement, couper la pointe et la racine à l’aide d’une pince de sorte que l’aiguille est d’environ 15 millimètres. Faire un autre trou de la même manière, environ deux à trois millimètres proximaux. Ensuite, tenez autour de la cheville, et passez une aiguille de calibre 25 sous le genou de la même manière.
Après que l’aiguille pénètre, couper la pointe et la racine à l’aide d’un pincement. Faire un autre trou de la même manière, environ deux à trois millimètres distal. Placez le distrayant sur mesure de telle sorte qu’il soit parallèle à la direction d’extension.
Fixez les aiguilles et l’appareil avec suffisamment de résine dentaire de polymérisation pour remplir les rainures de l’appareil. Attendez que la polymérisation se termine, ce qui devrait prendre environ cinq minutes. Puis, tout en prenant soin de ne pas endommager les tissus environnants, couper le milieu de la diaphyse du tibia à l’aide d’un disque de coupe très mince tout en appliquant une solution saline.
Fermez la plaie avec une suture en nylon 4-0. Donnez des injections sous-cutanées de buprénorphine pour l’analgésie immédiatement après la chirurgie. Il existe divers rapports sur la période de latence et le taux de distraction, mais ici, des protocoles représentatifs sont affichés.
Après une période de latence de cinq jours, commencer la procédure de distraction. Pour l’extension, utilisez la goupille attachée à la vis d’expansion rapide. Déplacez la goupille dans la direction de la flèche jaune fixée à la vis d’extension.
Tenez la queue avec le petit doigt et la paume, et fixez le dispositif d’extension avec l’index et le pouce. Effectuez l’extension en déplaçant la goupille dans la direction de la flèche jaune de 0,2 millimètre pour un quart de tour. Continuer à allonger à la vitesse de 0,2 millimètre toutes les 12 heures pendant huit jours, ce qui se traduira par un écart total de 3,2 millimètres.
Cette image montre les résultats typiques de radiographie à quatre semaines après distraction dans le modèle. L’os nouvellement formé est vu au site de distraction. Des résultats de coloration d’hématoxyline et d’éosine sont vus ici.
Un pont d’os nouvellement formé a été observé, et l’os nouvellement formé pourrait être facilement distingué de l’os indigène. Nous avons présenté un modèle do tibial de souris développé à l’aide d’un distrayant sur mesure. L’utilisation d’un modèle DO de souris facilite une analyse plus détaillée.
Il est particulièrement approprié pour les expériences utilisant des souris KNOCK-OUT.
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Aperçu
Cet article présente un modèle murin de régénération osseuse par distraction ostéogénique tibiale mis au point à l'aide d'un distracteur sur mesure. La méthode permet une analyse détaillée de la régénération osseuse, essentielle pour comprendre la régénération des tissus durs et mous.
Composantes clés de l'étude
Domaine scientifique
- Régénération osseuse
- Ingénierie tissulaire
- Modèles murins
Contexte
- La distraction ostéogénique est un processus chirurgical utilisé pour régénérer l'os.
- Les modèles murins offrent un environnement contrôlé pour l'étude des processus biologiques.
- Comprendre la régénération osseuse peut faire progresser les stratégies thérapeutiques.
- Ce modèle peut aider à répondre à des questions clés en matière de régénération tissulaire.
Objectif de l'étude
- Développer un modèle murin fiable pour l'étude de l'ostéogenèse par distraction.
- Analyser en détail le processus de régénération osseuse.
- Fournir des informations sur les mécanismes de cicatrisation des tissus durs et mous.
Méthodes utilisées
- Utilisation d'un distracteur sur mesure pour la distraction tibiale.
- Administration d'anesthésie et d'anesthésiques locaux.
- Techniques d'incision chirurgicale et de séparation musculaire.
- Surveillance de la régénération osseuse après la chirurgie.
Résultats principaux
- Mise en œuvre réussie du modèle de distraction tibiale.
- Observations détaillées des processus de régénération osseuse.
- Compréhension des mécanismes biologiques impliqués dans la cicatrisation.
- Applications potentielles en milieu clinique pour la réparation osseuse.
Conclusions
- Le modèle de distraction tibiale chez la souris est efficace pour l'étude de la régénération osseuse.
- Ce modèle peut faciliter des progrès dans le domaine du génie tissulaire.
- Des recherches supplémentaires peuvent s'appuyer sur ces résultats pour améliorer les approches thérapeutiques.
Questions fréquemment posées
Pertinence sectorielle pour les cadres
Le modèle de distraction ostéogénique (DO) chez la souris permet une analyse détaillée et quantitative de la dynamique de régénération osseuse, soutenant la validation précoce de cibles en ingénierie tissulaire squelettique. Ce modèle fournit une plateforme in vivo reproductible pour explorer les mécanismes régénératifs et évaluer des interventions génétiques ou pharmacologiques, informant directement la prise de décision préclinique et le tri des portefeuilles pour les thérapeutiques de réparation osseuse.
Applications stratégiques en recherche et développement en biopharmaceutique
Découverte précoce et validation de cibles
- Permet l'analyse mécanistique des voies de régénération osseuse dans un environnement in vivo contrôlé.
- Permet la validation fonctionnelle de cibles génétiques à l'aide de lignées de souris invalidées.
- Facilite la détection biologique des risques en fournissant une preuve directe de la capacité régénérative.
- Améliore la fiabilité prédictive des cibles candidates dans la réparation des tissus squelettiques.
Développement de tests et criblage
- Établit un modèle validé et reproductible pour évaluer les résultats de formation osseuse.
- Génère des lectures quantitatives radiographiques et histologiques pour la standardisation des tests.
- Permet le criblage de molécules candidates ou d'interventions en vue d'évaluer leur efficacité en matière de régénération osseuse.
- Permet la réutilisation de la plateforme sur plusieurs fonds génétiques ou bras de traitement.
Recherche translationnelle et préclinique
- S'aligne sur les mécanismes pertinents pour la maladie de la cicatrisation osseuse et de la régénération tissulaire.
- Assure une continuité allant de la découverte à la validation préclinique de stratégies régénératives.
- Permet une progression adaptée au risque des candidats au réparation osseuse fondée sur l'efficacité in vivo.
- Facilite le développement de biomarqueurs translationnels grâce à des critères d'évaluation histologiques et d'imagerie.
Intégration des pipelines et des flux de travail
Ce modèle murin de carence en oxygène s'inscrit dans la continuité entre la découverte précoce et la validation préclinique, permettant des tests fondés sur des hypothèses concernant les interventions régénératives et les cibles génétiques.
- Découverte en biologie : Soutient la vérification d'hypothèses et la clarification des voies impliquées dans la régénération osseuse.
- Criblage : Fournit des résultats normalisés et quantitatifs permettant de comparer différentes conditions expérimentales.
- Analytique : Fournit des mesures radiographiques et histologiques pour évaluer la formation osseuse.
- Recherche translationnelle : Relie les découvertes fondamentales à des modèles précliniques pertinents pour la réparation osseuse humaine.
- Réutilisation en entreprise : Offre une plateforme in vivo réutilisable, adaptable à diverses études génétiques et pharmacologiques.
Impact opérationnel et organisationnel
- Valeur scientifique : Accroît la confiance prédictive et réduit l'ambiguïté mécanistique dans la recherche sur la régénération osseuse.
- Valeur opérationnelle : Fournit des protocoles in vivo standardisés, reproductibles et évolutifs.
- Valeur stratégique : Permet de prendre des décisions éclairées de poursuite ou d'abandon et d'avancer de manière économiquement efficace dans les programmes de réparation osseuse.
- Impact sur le portefeuille : Soutient la priorisation ajustée au risque des actifs en médecine régénérative.
Considérations relatives à la mise en œuvre
- Nécessite une expertise en chirurgie sur petits animaux et en soins postopératoires.
- Requiert un accès à une infrastructure d'imagerie et d'analyse histologique.
- Exige une standardisation rigoureuse entre équipes des protocoles chirurgicaux et analytiques.
- Adaptable à divers fonds génétiques pour des études mécanistiques.
- Les limites incluent la complexité chirurgicale propre au modèle et les considérations liées au bien-être animal.
