<em>Saccharomyces cerevisiae</em> Metabolic Labeling with 4-thiouracil and the Quantification of Newly Synthesized mRNA As a Proxy for RNA Polymerase II Activity

Tiago Baptista; Didier Devys

doi:10.3791/57982

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Saccharomyces cerevisiae Métabolique marquage avec 4-thio-uracile et la Quantification des nouvellement synthétisé ARNm comme un Proxy pour l’activité de l’ARN polymérase II

<em>Saccharomyces cerevisiae</em> Metabolic Labeling with 4-thiouracil and the Quantification of Newly Synthesized mRNA As a Proxy for RNA Polymerase II Activity

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Génétique

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Saccharomyces cerevisiae Metabolic Labeling with 4-thiouracil and the Quantification of Newly Synthesized mRNA As a Proxy for RNA Polymerase II Activity

Saccharomyces cerevisiae Métabolique marquage avec 4-thio-uracile et la Quantification des nouvellement synthétisé ARNm comme un Proxy pour l’activité de l’ARN polymérase II

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09:21 min

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October 22, 2018

DOI:

10.3791/57982-v

DOI:

10.3791/57982-v

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09:21 min

October 22, 2018

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Tiago Baptista^1,2,3,4, Didier Devys^1,2,3,4

¹Institut de Génétique et de Biologie Moléculaire et Cellulaire, Illkirch, France ²Centre National de la Recherche Scientifique, Illkirch, France ³Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale, Illkirch, France ⁴Université de Strasbourg

Summary

Le protocole décrit ici est basé sur la quantification de Génome-large d’ARNm nouvellement synthétisées purifiée à partir de cellules de levure marquées avec 4-thio-uracile. Cette méthode permet de mesurer la synthèse d’ARNm dételée de désintégration de l’ARNm et, par conséquent, donne une mesure précise de la transcription de l’ARN polymérase II.