Détection de l’activité de la Phospholipase C dans l’homogénat de cerveau de l’abeille

Pour tester les effets inhibiteurs des agents pharmacologiques sur la phospholipase C (PLC) dans différentes régions du cerveau de l’abeille, nous présentons une analyse biochimique pour mesurer l’activité du PLC dans ces régions. Cet essai pourrait être utile pour comparer l’activité PLC entre les tissus, ainsi que chez les abeilles présentant des comportements différents.

Cette méthode peut aider à répondre à des questions clés dans le domaine des neurosciences telles que si et comment les activités du PLC dans différentes régions du cerveau sont impliquées dans la fonction cérébrale de l’abeille. Le principal avantage de cette technique est que les chercheurs peuvent facilement préformer une expérience avec les installations de laboratoire standard que ce protocole ne nécessite que des manipulations de base. Pour commencer, placez un tube de 50 ml contenant des abeilles sur la glace pendant 30 minutes pour anesthésier les abeilles. Ensuite, préparez l’étape de dissection en pliant un morceau de cire dentaire en deux et en le plaçant dans un plat en plastique. Au microscope binoculaire, utiliser des pinces à épiler pour séparer la tête de l’abeille de son corps. Ensuite, fixez la tête sur la cire dentaire et insérez des épingles à insectes à la base de chaque antenne pour maintenir l’intérieur de la tête en position ascendante. Ensuite, versez suffisamment de solution saline sur la tête pour la couvrir. À l’aide d’une pince à épiler, retirez l’antenne. Après cela, utilisez un scalpel pour faire une coupe horizontale près des bases de l’antenne et une coupe longitudinale à la frontière des yeux composés. Faire une coupe horizontale en haut de la tête et enlever la cuticule pour ouvrir une fenêtre sur le cerveau. Ensuite, utilisez des pinces à épiler pour enlever l’œil de retin de l’ossicle et la trachée de la surface intérieure du cerveau. Ensuite, insérez les pinces directement sous la cuticule oculaire pour enlever le tissu conjonctif entre la cuticule des yeux composés et l’œil de retin. Après cela, enlever la cuticule et l’œil de retin des yeux composés. Ensuite, utilisez la pince à épiler pour enlever soigneusement le reste de la trachée de la surface intérieure du cerveau. Ensuite, couper le tissu conjonctif entre le cerveau et autour des tissus et disséquer le cerveau de la capsule de la tête. À l’aide de la pince à épiler, peler la trachée de la surface postérieure du cerveau. Ensuite, utilisez un scalpel pour couper la connexion entre les corps de champignons ou MBs et d’autres régions du cerveau à côté des lobes verticaux. Placez les BM disséqués et les tissus cérébraux restants dans des tubes de 1,5 ml et congelez-les rapidement avec de la glace sèche. Tout d’abord, ajouter 10ml de tampon d’homogénéisation au tissu cérébral gelé. Utilisez une peselle en plastique pour homogénéiser manuellement le tissu dans le tube de 1,5 ml. Après cela, transférer la solution tissulaire homogénéisée au tissu suivant dans le lot et répéter le processus d’homogénéisation. Ensuite, ajouter 30