Name: Mesure taille de Acinus glandes hypopharyngiennes chez les travailleurs de l’abeille à miel (Apis mellifera) (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2018-09-14T14:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 11 s
Description: Découvrez une méthode de dissection, coloration et mesure des glandes hypopharyngiennes chez les abeilles nourricières Apis mellifera. Cette technique évalue l'impact nutritionnel sur le développement glandulaire et la santé des colonies.

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Ce travail a été soutenu par des fonds internes de l’USDA-ARS (numéro de projet : 2022-21000-017-00-D). L’ARS/USDA est un employeur d’égalité des chances et le fournisseur.

1. dissection et coloration des glandes hypopharyngiennes des travailleurs de l’infirmière
<ol><li>Faire une plaque de dissection de cire de fondre la cire de réglage froid dans un petit (60 mm x 15 mm) ou un verre de grande taille (100 mm x 15 mm) boîte de Pétri. Laisser refroidir complètement la cire avant d’utiliser la plaque pour les dissections.</li>
	<li>Pour chaque abeille à traiter, préparer 20 µL d’une 01:20 Giemsa solution de travail (01:20 v/v de préparé la coloration de Giemsa dans une solution saline tamponnée au phosphate (PBS : 137 mM NaCl, KCl, 10 mM Na2HPO4, 2,7 mM 1,8 mM KH2PO4)). ATTENTION : La coloration de Giemsa contient méthanol et est inflammable. Il est toxique si ingéré, inhalé, ou si elle vient au contact de la peau. Il doit être détruit selon les exigences de l’institution locale. NOTE : Toujours faire une nouvelle solution de travail juste pour la série actuelle d’essai parce que la coloration de Giemsa se dégrade rapidement une fois qu’il est dilué. Jeter la tache diluée si un précipité apparaît.</li>
	<li>Pipeter 20 µL Giemsa tache dans les puits des lames de microscope et de 50 à 100 µL solution saline sur le toboggan adjacent au puits.</li>
	<li>Détacher la tête d’une abeille, en utilisant les ciseaux micro-printemps de 10 mm et incorporer la tête face avant vers le haut dans la plaque de dissection de cire à l’aide de pinces et un crayon de cire-sculpture. Épingler la tête vers le bas dans la plaque de cire pour plus de stabilité en insérant des épingles dans les yeux et l’autre dans la bouche.</li>
	<li>À l’aide d’une lame de rasoir tranchant cassable fixée dans un étau de broche, faire un petit (~ 2-3 mm) incision entre les yeux et les mandibules de chaque côté de la plaque frontale. Doucement, exécuter les ciseaux micro sous la têtière et couper le nerf antennaire qui s’étend entre les antennes et le cerveau.</li>
	<li>À l’aide de pinces fines, prenez la plaque frontale de la bouche, renversez-le vers le haut et épingler dans la plaque de cire avec pointe fine pince et d’une broche. Si nécessaire, retirez complètement la plaque frontale.</li>
	<li>Pipeter 20 µL PBS sur la coupe ouvrir la section de la tête. Remarque : Les glandes peuvent flotter vers le haut à ce stade ou on doit chercher pour eux. Les glandes ressemblent à un collier de perles et sont situés sur le dessus du cerveau si intact.</li>
	<li>Utiliser la pointe super fine pince pour retirer délicatement une des glandes hypopharyngiennes (la glande peut se briser, qui l’oblige à être supprimé dans les segments) et transférer immédiatement la glande à la coloration de Giemsa sur la lame de microscope.</li>
	<li>Permettre la glande à incuber dans la solution de Giemsa pendant 5 min et ensuite utiliser des pinces pour transférer la glande au pool de sérum physiologique sur la même lame. Si nécessaire, couper la glande en petits morceaux avec les ciseaux micro. Remarque : Cela contribue à rendre les glandes se trouvent dans un plan plus plat, ce qui rend plus facile d’obtenir des images claires des acini des glandes.</li>
</ol>2. mesurer la hypopharyngiennes Acini des glandes
<ol><li>Mettez sur le microscope et ouvrez le programme de mesures. Allumez la source de lumière pour le microscope si ce n’est pas déjà sur. 10 X la valeur du grossissement du microscope.</li>
	<li>Trouver les glandes et concentrer l’image agrandie dans l’oculaire, sans l’ordinateur. Augmenter le grossissement à 60 – 80 X et mettre l’image dans l’oculaire.</li>
	<li>Sous l’onglet «acquérir», ajuster et concentrer les glandes sur l’image en direct sur l’ordinateur.</li>
	<li>Image nom/exemple de description de type dans la zone « Nom de l’Image » et cliquez sur « Acquérir l’Image » pour prendre une image des glandes pour davantage de mesures.</li>
	<li>Sélectionnez l’onglet « Analyse » sélectionner la « zone tool » (mis en évidence Supplémentaire Figure1 a) et désélectionner «valeur» sous «Étiquettes», qui sera également désélectionner «unité». Tous les autres paramètres de la valeur par défaut (Supplemental Figure 1 a). Remarque : Le logiciel étalonne automatiquement les mesures de surface selon le niveau d’agrandissement afin que la zone obtenue à partir d’un grossissement inférieur est le même que celui obtenu à partir d’un grossissement plus élevé.</li>
	<li>Mesurer chaque acinus en cliquant en continu ou en permanence maintenant enfoncé le bouton gauche de la souris lors du traçage du périmètre de l’acinus aussi soigneusement que possible. Mesurer au moins 10 acini par abeille. Remarque : Plus peuvent être nécessaires selon l’expérience (voir la Discussion). Il peut exiger plusieurs images/sections de la glande de trouver assez acini claires, bien orientées pour la mesure.</li>
	<li>Une fois tous les acini à partir d’une image unique ont été mesurées, sélectionnez «Créer un rapport». Assurez-vous que les options sont sélectionnées, comme illustré à la Figure supplémentaire 1 b et cliquez sur «Exporter».</li>
	<li>Enregistrez le rapport tel que désiré. Si un fichier a déjà été créé pour l’ensemble des échantillons et des mesures supplémentaires sont ajoutés, vérifiez que le fichier de rapport n’est pas ouvert pour que les nouvelles données sont ajoutées au fichier existant.</li>
	<li>Lorsque vous avez terminé, éteignez la caméra microscope et la source lumineuse. Essuyez le liquide et les glandes enlever les lames de la microscopie et éliminer en toute sécurité de n’importe quel matériel utilisé. Rincer les lames avec de l’eau distillée et essuyer avec éthanol (70 % v/v dans l’eau) pour les réutiliser.</li>
</ol>

<ol><li>Kulhanek, K., et al. <a target="_blank" href="https://www.tandfonline.com/doi/full/10.1080/00218839.2017.1344496">A national survey of managed honey bee 2015-2016 annual colony losses in the USA.</a> Journal of Apicultural Research. 56 (4), 328-340 (2017).</li>
<li>Jacques, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+pan-European+epidemiological+study+reveals+honey+bee+colony+survival+depends+on+beekeeper+education+and+disease+control%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">A pan-European epidemiological study reveals honey bee colony survival depends on beekeeper education and disease control.</a> PLoS One. 12 (3), e0172591(2017).</li>
<li>Zee, R. vd, et al. <a target="_blank" href="https://www.tandfonline.com/doi/abs/10.3896/IBRA.1.53.1.02">Results of international standardised beekeeper surveys of colony losses for winter 2012-2013: analysis of winter loss rates and mixed effects modelling of risk factors for winter loss.</a> Journal of Apicultural Research. 53 (1), 19-34 (2014).</li>
<li>Decourtye, A., Mader, E., Desneux, N. <a target="_blank" href="https://www.apidologie.org/articles/apido/abs/2010/03/m09128/m09128.html">Landscape enhancement of floral resources for honey bees in agro-ecosystems.</a> Apidologie. 41 (3), 264-277 (2010).</li>
<li>Vaudo, A. D., Tooker, J. F., Grozinger, C. M., Patch, H. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Bee+nutrition+and+floral+resource+restoration%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Opinion+in+Insect+Science%22%5BJournal%5D)">Bee nutrition and floral resource restoration.</a> Current Opinion in Insect Science. 10, 133-141 (2015).</li>
<li>Snodgrass, R. E. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aSnodgrass%2C+RE+%22Anatomy+of+the+Honey+Bee%22">Anatomy of the Honey Bee</a>. , Comstock Pub. Associates. (1984).</li>
<li>Winston, M. L. <a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=author%3aWinston%2C+ML+%22The+Biology+of+the+Honey+Bee%22">The Biology of the Honey Bee</a>. , Harvard University Press. (1987).</li>
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<li>Corby-Harris, V., Snyder, L., Meador, C., Ayotte, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Honey+bee+%28Apis+mellifera%29+nurses+do+not+consume+pollens+based+on+their+nutritional+quality%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Honey bee (Apis mellifera) nurses do not consume pollens based on their nutritional quality.</a> PLoS One. 13 (1), e0191050(2018).</li>
<li>Corby-Harris, V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transcriptional%2C+translational%2C+and+physiological+signatures+of+undernourished+honey+bees+%28Apis+mellifera%29+suggest+a+role+for+hormonal+factors+in+hypopharyngeal+gland+degradation%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Insect+Physiology%22%5BJournal%5D)">Transcriptional, translational, and physiological signatures of undernourished honey bees (Apis mellifera) suggest a role for hormonal factors in hypopharyngeal gland degradation.</a> Journal of Insect Physiology. 85, 65-75 (2016).</li>
<li>Corby-Harris, V., Jones, B. M., Walton, A., Schwan, M. R., Anderson, K. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transcriptional+markers+of+sub-optimal+nutrition+in+developing+Apis+mellifera+nurse+workers%5BTitle%5D)+AND+%22BMC+Genomics%22%5BJournal%5D)">Transcriptional markers of sub-optimal nutrition in developing Apis mellifera nurse workers.</a> BMC Genomics. 15, 134(2014).</li>
<li>Sagili, R. R., Pankiw, T., Zhu-Salzman, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+soybean+trypsin+inhibitor+on+hypopharyngeal+gland+protein+content%2C+total+midgut+protease+activity+and+survival+of+the+honey+bee+%28Apis+mellifera+L%29%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Insect+Physiology%22%5BJournal%5D)">Effects of soybean trypsin inhibitor on hypopharyngeal gland protein content, total midgut protease activity and survival of the honey bee (Apis mellifera L).</a> Journal of Insect Physiology. 51 (9), 953-957 (2005).</li>
<li>Sagili, R. R., Pankiw, T. <a target="_blank" href="https://link.springer.com/article/10.1007/s00265-007-0379-1">Effects of protein-constrained brood food on honey bee (Apis mellifera L.) pollen foraging and colony growth.</a> Behavioral Ecology and Sociobiology. 61 (9), 1471-1478 (2007).</li>
<li>Hrassnigg, N., Crailsheim, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adaptation+of+hypopharyngeal+gland+development+to+the+brood+status+of+honeybee+%28Apis+mellifera+L.%29+colonies%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Insect+Physiology%22%5BJournal%5D)">Adaptation of hypopharyngeal gland development to the brood status of honeybee (Apis mellifera L.) colonies.</a> Journal of Insect Physiology. 44 (10), 929-939 (1998).</li>
<li>Schneider, C. A., Rasband, W. S., Eliceiri, K. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((NIH+Image+to+ImageJ%3A+25+years+of+image+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Methods%22%5BJournal%5D)">NIH Image to ImageJ: 25 years of image analysis.</a> Nature Methods. 9, 671(2012).</li>
<li>Jack, C. J., Uppala, S. S., Lucas, H. M., Sagili, R. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+pollen+dilution+on+infection+of+Nosema+ceranae+in+honey+bees%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Insect+Physiology%22%5BJournal%5D)">Effects of pollen dilution on infection of Nosema ceranae in honey bees.</a> Journal of Insect Physiology. 87, 12-19 (2016).</li>
<li>Crailsheim, K. <a target="_blank" href="https://hal.archives-ouvertes.fr/hal-00890873/document">The protein balance of the honey bee worker.</a> Apidologie. 21, 417-429 (1990).</li>
</ol>

Les auteurs n’ont rien à divulguer.

Taille des glandes hypopharyngiennes est sensible à la quantité de protéines et de pollen dans le régime alimentaire et est un marqueur essentiel de l’alimentation chez les jeunes abeilles adultes. Nous démontrons ici, de façon reproductible et peu coûteuse, de disséquer et de mesurer ce tissu. Ces tissus peuvent être difficiles à disséquer, mais avec la pratique, on peut obtenir les dissections nettoyeur de plus en plus avec le tissu relativement intacte. Le principal avantage de la méthode présentée ici est que le tiss...

Abeilles à miel sont essentielles pour l’agriculture car ils pollinisent une variété de cultures qui sont consommés par les humains et les animaux. Beaucoup d’attention a été payé au déclin des populations d’abeilles de miel comme stationnaire de pertes de colonies autour de 30-40 % chaque année dans les États-Unis d’Amérique1 et 10 à 15 % en Europe2,3. Plusieurs facteurs, y compris la réduction de l’accès à la haute qualité de fourrage, probable acte ensemble pour nuire à la santé des abeilles miel. Monoculture, la sécheresse, les pratiques non durables de l’apiculture et autres facteurs diminuent la diversité et la quantité de pollen naturel disponible aux colonies4,5. Parce que les abeilles la quasi-totalité de leurs protéines alimentaires et lipides dérivent de pollen, accès réduit au pollen peut limiter sévèrement santé individuelle et de la colonie.
Les glandes hypopharyngiennes sont des structures sécrétrices situés en tête de l’abeille entre les yeux et le cerveau6. Dans des circonstances normales, la trajectoire développementale et fonctionnelle des glandes refléter celle de l’abeille se trouvent bien dans. Environ 5 à 10 jours après la naissance, l’abeille effectue des comportements de soins infirmiers dans la ruche. Dans ce même temps, les glandes hypopharyngiennes atteignent leur taille maximale et la capacité sécrétoire, produisant la fraction de protéine majeure de la couvée alimentaire ou la gelée nourri au développement des larves et autres adultes, tels que la Reine. À cette taille maximale, les glandes ressemblent à une grappe de raisin où chaque raisin est une structure discrète lobe appelée l’acinus (pluriel : acini). Comme l’abeille d’ouvrier ages et prend sur les différentes tâches dans la ruche, les glandes hypopharyngiennes rétrécissement et assumer des fonctions différentes, comme faire tomber les sucres dans le nectar7,8. Les glandes hypopharyngiennes sont donc en corrélation avec l’âge de l’abeille et leur tâche liée à l’âge.
Taille de glandes hypopharyngiennes infirmière est sensible à la quantité et la qualité des protéines dans leur alimentation9,10,11. Lorsque l’infirmière abeilles sont bien nourris, leurs glandes sont grandes. Considérant que les glandes sont petites quand l’abeille est privée de pollen, en particulier dans la première semaine de développement adulte. Afin de déterminer l’état nutritionnel d’une abeille d’infirmière, les chercheurs mesurent généralement les glandes hypopharyngiennes, soit en mesurant directement la glande acinus taille11,12,13,14 ou protéine contenu15,16 ou par la mesure de la protéine contenu11 ou poids frais17 de la tête entière où ils se trouvent. Chaque méthode a ses propres avantages et inconvénients. Nous préférons la résolution obtenue de mesurer les acini des glandes, bien que cette méthode peut être difficile de deux manières principales. Le premier défi consiste à identifier correctement et de disséquer la glande. La seconde est d’obtenir une mesure exacte de chaque acinus. Sous un microscope photonique dissection, les glandes apparaissent blanc transparent ou laiteux et des frontières des acini peuvent être difficiles à définir. Avoir des outils pour mieux définir le bord des acini et d’augmenter la probabilité d’obtenir des mesures précises de la glande est bénéfique à quiconque étudie miel abeille nutrition.
Ici, nous montrons les chercheurs intéressés comment disséquer, Angiome, image et mesurer les glandes hypopharyngiennes afin que des mesures précises de la taille de l’acinus est possible. La méthode que nous décrivons offre aux chercheurs une méthode facile, précise et reproductible pour la réalisation de multiples mesures de glande dans une période relativement courte de temps une fois que l’expérimentateur est suffisamment pratiqué. On pourrait en toute confiance mesurer les glandes de près de 10 personnes en un peu plus d’une heure. Nous offrons des détails sur la méthode et le matériel nécessaire à l’obtention de ces mesures. Les aspects les plus importants des méthodes décrites ci-dessous sont la bonne dissection et coloration des glandes. Bien que nous capturer les images grossies et mesurer les acini avec des logiciels commerciaux, les méthodes que nous présentons peuvent facilement être adaptés à d’autres plates-formes18.

<table><tbody><tr><td>Grobet</td><td>USA</td><td>21.450</td><td></td></tr><tr><td>Boîte de Pétri en verre, petite</td><td>VWR</td><td>89000-310</td><td></td></tr><tr><td>Boîte de Pétri en verre, grande</td><td>VWR</td><td>89000-314</td><td></td></tr><tr><td>Super Max Wax Pen</td><td>Eurotool</td><td>PEN-520.00</td><td></td></tr><tr><td>Lames de rasoir cassables</td><td>Microscopie électronique Sciences</td><td>72004</td><td></td></tr><tr><td>étau à goupille</td><td>BioQuip</td><td>4845</td><td></td></tr><tr><td>2A-SA Pince à pointe plate/arrondie</td><td>Rubis/BioQuip</td><td>4522</td><td></td></tr><tr><td>Pince à pointe fine</td><td>Rubis/BioQuip</td><td>4523</td><td></td></tr><tr><td>5A-SA Pince à pointe super fine</td><td>Rubis/BioQuip</td><td>4525</td><td></td></tr><tr><td>10 mm ciseaux à micro-ressort</td><td>BioQuip</td><td>4715</td><td></td></tr> 3 <tr><td>mm ciseaux à micro-ressort Vannas</td><td>Roboz</td><td>RS-5610</td><td></td></tr><tr><td>Lames de dépression en verre, cavité unique</td><td>GSC International</td><td>4-13057-DZ-12</td><td></td></tr><tr><td>Comprimés PBS</td><td>VWR</td><td>97062-730</td><td></td></tr><tr><td>Coloration Giemsa, solution modifiée</td><td>Sigma Aldrich</td><td>32884</td><td></td></tr><tr><td>Épingles à insectes</td><td>ENTO SPHINX S.R.O.</td><td>02.02</td><td></td></tr><tr><td>Leica Applications Suite Logiciel de mesure</td><td>Leica Microsystems</td><td></td><td>Tous les logiciels de mesure, y compris les logiciels libres, peuvent être utilisés</td></tr></tbody></table>

mesure taille de acinus glandes hypopharyngiennes chez les travailleurs de l’abeille à miel (apis mellifera)

Measuring Hypopharyngeal Gland Acinus Size in Honey Bee (Apis mellifera) Workers

Les glandes hypopharyngiennes infirmière produisent la fraction protéique du travailleur et la gelée royale qui est alimentée au développement des larves et des reines. Ces glandes jumelés qui sont trouvent dans la tête de l’abeille sont très sensibles à la quantité et qualité de pollen et de pollen suppléants que l’infirmière abeille consomme. Les glandes deviennent plus petits quand les infirmières sont nourris avec une alimentation déficiente et sont grands lorsqu’ils sont nourris avec une alimentation complète. Taille de glandes hypopharyngiennes infirmière étant un indicateur robuste de nutrition de l’infirmière, il est essentiel que ceux qui étudient le miel abeille nutrition savent comment mesurer ces glandes. Ici, nous fournissons des méthodes détaillées pour disséquer, coloration, imagerie et mesurer les glandes hypopharyngiennes d’infirmière abeille. Nous présentons des comparaisons des tissus incolores et colorées et les données qui ont été utilisées pour étudier l’impact du pollen sur la taille de la glande. Cette méthode a été utilisée pour tester comment alimentation impact sur la taille des glandes hypopharyngiennes mais a utilisation ultérieure pour comprendre le rôle de ces glandes en santé de la ruche.

Glandes hypopharyngiennes ont été disséquées de travailleurs de l’infirmière et visualisées avec et sans tache un grossissement de X 60 à 80 (Figure 1). Dans les tissus sans tache, il est difficile de trouver le bon contraste de pleinement se concentrer et de définir les bords des acini. Le tissu taché, les bords des acini sont affûtées en raison du contraste amélioré entre les tissus colorés et le fond blanc.
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Taille d’acinus glandes hypopharyngiennes est une mesure fiable d’infirmière nutrition de miel abeille. Ici, nous fournissons un protocole détaillé pour la dissection, coloration, imagerie et mesurer les acini de glande infirmière abeille laryngée.

Mesure taille de Acinus glandes hypopharyngiennes chez les travailleurs de l’abeille à miel (Apis mellifera)

The nurse hypopharyngeal glands produce the protein fraction of the worker and royal jelly that is fed to developing larvae and queens. These paired ...

Cette méthode peut aider à répondre aux questions clés dans le domaine de la nutrition des abeilles mellifeuales, sur le lien entre une mauvaise nutrition et la croissance et le développement hypopharyngéels des glandes. Le principal avantage de cette technique est que l’on peut l’utiliser pour tacher, visualiser et mesurer facilement les glandes hypopharyngéales des abeilles. En général, les individus nouveaux à cette méthode auront du mal parce que les glandes hypopharyngéales peuvent être difficiles à localiser et à disséquer sans guidage visuel.Avant de commencer l’intervention, verser la cire de réglage fraîche fondue dans une boîte de Pétri en verre. Ajouter 20 microlitres de taches giemsa fraîchement préparées dans un puits, et 50 à 100 microlitres de solution saline dans un puits adjacent d’une lame de microscope, par abeille infirmière ouvrière à traiter. Lorsque la cire est réglée, utilisez des ciseaux micro ressorts de 10 millimètres pour enlever la tête de la première abeille et utiliser des forceps, un microscope dissection et un stylo à découper en cire pour intégrer la tête sur le côté avant dans la plaque de dissection de cire.Insérez des épingles dans les yeux et l

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Nous démontrons comment mettre en œuvre une méthode pharmacologie comportementale dans un paradigme de conditionnement olfactif appétitif chez les abeilles (Apis mellifera) par application systémique de médicaments. Cette méthode permet l'étude des mécanismes sous-jacents de l'apprentissage et la formation de la mémoire d'une manière simple et fiable.

Pharmacologie comportementale dans le conditionnement classique de la réponse Extension Proboscis chez les abeilles ( Apis mellifera)

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Un nouveau test comportemental est décrit pour étudier les réponses gustatives à court terme des pièces buccales de bourdons (Bombus terrestris) en mouvement libre envers les nutriments et les toxines en solution.

A Novel Behavioral Assay d&#39;enquêter sur les réponses gustatifs de l&#39;individu, Librement-mobiles Bumble Bees (<em&gt; Bombus terrestris</em&gt;)

Nous décrivons ici notre protocole détaillé pour la préparation de colonies d'abeilles seule cohorte - un outil utile pour analyser le travailleur physiologie rôle associé. Nous décrivons également des protocoles détaillés pour traiter les travailleurs avec l'hormone juvénile et ecdysone pour évaluer l'implication de ces hormones dans la régulation du comportement et / ou de la physiologie des travailleurs.

Préparation des colonies mono-cohorte et Traitement hormonal des travailleurs Honeybees à Analyser Physiologie Associé à Rôle et / ou le système endocrinien

Ce manuscrit décrit plusieurs protocoles pour l'administration d'agents pharmacologiques pour les abeilles, y compris des méthodes non invasives simples pour les abeilles en vol libre, ainsi que des variantes plus invasives qui permettent le traitement des abeilles sobres localisé précis.

Manipulation neuropharmacologiques de Restrained et vol libre abeilles,<em&gt; Apis mellifera</em

Nous présentons ici   un procédé pour alimenter des aliments contaminés par les pesticides à la fois une abeille individuelle et une colonie ruche. La procédure évalue l'effet des pesticides sur les abeilles individuelles par l' alimentation in vivo de l' alimentation des larves de base et sur la condition naturelle de la colonie de ruche.

Évaluation de l&#39;incidence des produits chimiques sur l&#39;environnement Miel de développement Abeille de l&#39;individu à la colonie Niveau

Des doses sublétales de pesticides peuvent affecter colonies de manières qui sont difficiles à détecter en utilisant uniquement des méthodes périodiques ou visuels. Méthodes pour mesurer la masse totale abeille adulte, couvain et les ressources alimentaires de la pesée des ruches et des parties de la ruche, photographier les images et en installant des capteurs, sont fournis. Analyse des données est également abordée.

Surveiller les effets de la colonie-niveau d’exposition aux pesticides sublétale sur les abeilles à miel

Nous décrivons ici deux protocoles: d’abord pour propager, extraire, purifier et quantifier de grandes quantités de particules virales non enveloppées d’abeilles mellifères, y compris une méthode pour éliminer les pupes d’abeilles mellifères et ensuite pour tester les effets de l’infection virale à l’aide d’un essai biologique en cage hautement reproductible et à haut débit.

Préparation de l’inoculum enrichi en virus pour l’infection orale des abeilles mellifères (Apis mellifera)

Les méthodes immunohistochimiques sont utiles dans la recherche sur les abeilles mellifères pour détecter et évaluer le niveau d’apoptose et de nécrose dans l’intestin moyen et les glandes hypopharyngées des abeilles adultes.

Principes de base de l’histologie et détection de la mort cellulaire dans les tissus d’abeilles mellifères

Découvrez une méthode de dissection, coloration et mesure des glandes hypopharyngiennes chez les abeilles nourricières Apis mellifera. Cette technique évalue l'impact nutritionnel sur le développement glandulaire et la santé des colonies.

Mesure taille de Acinus glandes hypopharyngiennes chez les travailleurs de l’abeille à miel (Apis mellifera)

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