Reconnaissance d’objets nouveaux et emplacement de l’objet comportementale essais chez la souris sur un Budget

Cette méthode peut aider à répondre à des questions clés sur la régulation de la mémoire. Par exemple, nous déterminons le rôle de protéines spécifiques dans la mémoire en testant les souris transgéniques knockout dans ces tâches. Le principal avantage de cette technique est qu’il s’agit d’un moyen rapide et rentable de procéder à des tests de mémoire dans n’importe quel laboratoire.

La démonstration de la construction de l’aréna est essentielle, car le soudage solvant ne donnera de bons résultats que s’il est effectué avec soin. Commencez par acquérir cinq feuilles de ciment acrylique, acrylique et un applicateur hypo de calibre 16. Retirer le revêtement de papier protecteur des feuilles acryliques.

Ensuite, séchez tous les matériaux pour confirmer que les tailles sont correctes. Ensuite, assemblez et chargez la seringue avec du ciment acrylique. Alignez le long bord d’un mur extérieur avec le bord supérieur de la base et assurez-vous qu’ils sont perpendiculaires les uns aux autres à l’aide d’une combinaison ou d’un carré machiniste.

Ensuite, utilisez la seringue pour appliquer une petite perle de ciment stable directement sur le coin des deux pièces jointes. Maintenez les deux pièces en place pendant cinq minutes jusqu’à ce qu’elles soient initialement réglées. Répétez les mêmes étapes pour fixer l’autre mur extérieur à la base.

Ensuite, fixez deux murs intérieurs, un à la fois, la base avec du ciment acrylique. Enfin, utilisez la seringue pour appliquer une petite perle de ciment stable directement sur le coin en cours de formation par le mur extérieur et le mur intérieur. Commencez la séance d’accoutumation en divisant les souris en groupes de quatre, et abritez-les dans des cages individuelles propres.

Ensuite, amenez un groupe de souris dans la salle d’essai et laissez-les s’acclimater pendant au moins 30 minutes. Après l’acclimation, commencez à enregistrer la vidéo. Placez chaque souris dans l’arène face aux murs du coin de libération, et laissez les souris explorer les arènes librement pendant six minutes.

Ensuite, arrêtez d’enregistrer la vidéo et retournez les souris dans leurs cages de détention propres pendant l’intervalle inter-essais. Nettoyer tous les arénas avec des installations animales recommandées méthodes de nettoyage, comme essuyer avec 70% d’éthanol pour minimiser les indices olfactifs. Enfin, après avoir terminé un total de trois séances d’accoutumabilité, retourner toutes les souris dans leurs cages d’origine.

Après 24 heures, amener le même groupe de souris dans la salle d’essai, et leur permettre de s’acclimater à la salle d’essai pendant au moins 30 minutes, comme cela a été fait avant les séances d’accoutumation de la veille. Effectuer l’essai d’entraînement à l’aide de deux objets placés dans l’arène. Apposez des objets avec du ruban adhésif à double face à six par six centimètres de deux coins non libérés, de sorte qu’ils sont contrebalancés dans l’arène.

Permettre aux souris d’étudier librement l’arène et les objets pendant 10 minutes. Ensuite, arrêtez l’enregistrement vidéo. Remettre les souris dans leurs cages de détention propres pendant 20 minutes et nettoyer les zones avec de l’éthanol.

Ensuite, pour effectuer la tâche de localisation de l’objet OLT, déplacez l’un des objets utilisés dans l’essai de formation vers un nouveau coin non-libération, et fixez l’objet à six centimètres de chaque mur de ce coin avec du ruban adhésif à double face. Répétez le même enregistrement vidéo des souris dans la région pendant 10 minutes, comme décrit précédemment. Enfin, pour effectuer la nouvelle tâche de reconnaissance d’objets NORT, remplacez l’objet qui n’a pas été déplacé pendant l’OLT par un objet nouveau, et fixez l’objet nouveau à six centimètres des deux murs du coin par du ruban adhésif à double face.

Répétez le même enregistrement vidéo des souris dans la région pendant 10 minutes, comme décrit précédemment. Pendant l’OLT, la mémoire pour l’emplacement de l’objet est reflétée par un groupe de souris passant, en moyenne, beaucoup plus de temps avec un objet après qu’il a bougé. Cela peut également être représenté comme une augmentation de l’indice de discrimination.

Dans le NORT, la mémoire pour l’emplacement de l’objet est reflétée par un groupe de souris passant, en moyenne, beaucoup plus de 50% du temps d’investigation avec le nouvel objet ou montrant un indice de discrimination significativement supérieur à zéro. La cueillette d’objets pour lesquels les souris n’ont pas de préférence inhérente est essentielle. Par exemple, lors d’un essai pilote d’une taille d’échantillon de quatre, les souris ont montré une tendance à passer moins de 50 % du temps d’investigation avec l’objet A lorsqu’elles sont jumelées à l’objet B.Lorsque l’objet A a ensuite été utilisé comme objet nouveau dans un NORT, avec une taille d’échantillon plus grande de 16, les souris ont passé beaucoup moins de 50 % du temps d’enquête avec l’objet A.Ces données suggèrent une aversion inhérente à l’objet A.During this procedure. , il est important de se rappeler de bien nettoyer tous les objets et arènes entre l’utilisation.

Dans cette méthode, l’investigation des objets peut être notée manuellement par les chercheurs ou à l’aide de logiciels commerciaux. Les logiciels ont des coûts initiaux plus élevés, mais, une fois calibrés, peuvent faire gagner du temps et des ressources financières à long terme.