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Fluorimétrique Techniques pour l’évaluation des Membranes des spermatozoïdes
Fluorimétrique Techniques pour l’évaluation des Membranes des spermatozoïdes
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JoVE Journal Developmental Biology
Fluorimetric Techniques for the Assessment of Sperm Membranes

Fluorimétrique Techniques pour l’évaluation des Membranes des spermatozoïdes

Full Text
14,231 Views
08:58 min
November 28, 2018

DOI: 10.3791/58622-v

Alisa Komsky-Elbaz1,2, Zvi Roth1,2

1Animal Sperm Research Center, Department of Animal Sciences, Robert H. Smith Faculty of Agriculture, Food and Environment,Hebrew University of Jerusalem, 2Department of Animal Sciences, Robert H. Smith Faculty of Agriculture, Food and Environment,Hebrew University of Jerusalem

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Nous présentons ici les méthodes pour évaluer l’intégrité membranaire de spermatozoïde, une fonctionnalité cellulaire associée à compétence de fertilisation de sperme. Nous décrivons trois techniques pour l’évaluation fluorimétrique des membranes des spermatozoïdes : coloration simultanée avec des sondes fluorescentes spécifiques, microscopie à fluorescence et avancé cytométrie dédiés au sperme. Exemples de combiner les méthodes sont également présentés.

L’objectif de ces procédures est d’évaluer l’intégrité des membranes de sperme à l’aide de sondes fluorescentes spécifiques combinées à une microscopie de fluorescence ou à une analyse de cytométrie du débit. Ces techniques pourraient aider à répondre à des questions clés dans le domaine de la reproduction telles que la prédiction du potentiel de fécondation et la qualité de l’échantillon de sperme. Le principal avantage de ces techniques est qu’elles permettent une évaluation précise de plusieurs membranes spermatozoïdes qui sont connues pour s’associer au potentiel de fécondation du sperme.

Les implications de ces techniques s’étendent au diagnostic de la qualité d’éjaculat car elle permet l’évaluation plus précise du plasma de sperme et de l’intégrité de membrane acrosome aussi bien que le potentiel mitochondrique de membrane. Pour commencer cette procédure, obtenir environ un à six millilitres de sperme de taureau dans un tube de 15 millilitres à température ambiante. Ajouter six millilitres de tampon NKM préchauffés à 37 degrés Celsius à chacun un millilitre de sperme.

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