Dosage de Polyphosphate inorganique chez les bactéries

Le polyphosphate inorganique est un élément clé de la réponse au stress bactérien. Mais les méthodes plus anciennes pour extraire et mesurer le polyP chez les bactéries sont complexes et à forte intensité de main-d’œuvre. Le principal avantage de cette technique est qu’elle permet une quantification rapide, sensible et peu coûteuse des niveaux de polyP chez une variété d’espèces bactériennes différentes.

La procédure sera démontrée par Arya Pokhrel, une étudiante de premier cycle de mon laboratoire. Pour commencer, cultiver des bactéries lactobacillus reuteri dans le milieu d’induction enzymatique malique sans cystine à 37 degrés Celsius pendant la nuit sans trembler. Centrifugeuse d’un millilitre de cette culture nocturne dans un tube de microcentrifugeuse de 1,5 millilitre pour récolter suffisamment de cellules pour produire un total de 50 à 100 microgrammes de protéines cellulaires.