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DOI: 10.3791/58942-v
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Nous présentons ici un protocole très accessible pour évaluer le mouvement cellulaire dans les cellules Trophoblastiques humaines à l’aide de trois essais in vitro : le test de gratter, le dosage d’invasion de transwell et le test de prolifération cellulaire.
Ces méthodes peuvent être utilisées pour déterminer les facteurs qui influencent l’invasion trophoblaste qui peuvent fournir un aperçu des principaux résultats obstétricaux indésirables. L’avantage de cette technique est qu’elle fournit une analyse visuelle et quantitative de plusieurs facteurs qui peuvent influencer l’invasion des trophoblastes, y compris la prolifération et la migration. Pour commencer l’analyse à gratter, ensemencer le nombre approprié de cellules dans une plaque de 24 puits pour atteindre 100% confluence en 48 heures.
Le lendemain, changer les médias en phénol rouge médias libres complétés par la chaleur inactivée charbon de bois dextran dépouillé FBS. Le jour de l’égratignure, ajouter le traitement désiré aux médias dans chaque puits pour prétratre les cellules pendant 30 minutes. Pour créer des plaies uniformes, placez des pointes stériles de pipette de 10 microlitres sur les broches de l’outil de fabricant de plaies.
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