Name: Modèle de souris de deux vaisseaux Occlusion d’ischémie-reperfusion cérébrale (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-03-01T13:30:00.000+00:00
Duration: 7 min 34 s
Description: Apprenez le modèle d'occlusion de deux vaisseaux chez la souris pour étudier l'ischémie-reperfusion cérébrale. Cette méthode permet d'évaluer le volume de l'infarctus et les déficits comportementaux post-AVC.

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Ce travail a été soutenu par le ministère de la Science et la technologie, Taïwan (plus 106-2320-B-038-024, plus 105-2221-E-038-007-MY3 et plus 104-2320-B-424-001) et le Taipei Medical University Hospital (107TMUH-SP-01). Ce manuscrit a été édité par Wallace édition académique.

L’utilisation des comités de l’Academia Sinica et Université de médecine de Taipei et le soin des animaux institutionnelle a approuvé ce protocole pour l’utilisation des animaux d’expérimentation.
1. modèle OACM/reperfusion
<ol><li>Fournir les souris avec libre accès à l’eau et chow jusqu'à ce que la chirurgie.</li>
	<li>Autoclave l’intervention chirurgicale des outils et assainir la table de chirurgie et équipements à l’aide d’éthanol à 70 %. Porter un masque chirurgical et des gants stériles. Utilisez un stérilisateur sec perle pour restériliser les outils chirurgicaux si plusieurs chirurgies de souris seront déroulera dans une expérience.</li>
	<li>Anesthésier une souris âgés de 8 à 12 semaines (masse : 25 à 30 g) à l’aide d’hydrate de chloral de 0,8 %, par une injection intrapéritonéale. Assurez-vous que la souris anesthésiée n’a pas un réflexe de pédale (selon les essais à l’aide d’une pincée de pied ferme) après l’anesthetization.</li>
	<li>La pommade vétérinaire pour prévenir la sécheresse oculaire pour la souris alors qu’il est sous anesthésie.</li>
	<li>Utiliser un système de tension artérielle non invasive pour surveiller la tension artérielle de la souris.</li>
	<li>Utiliser un système de monitorage physiologique pour surveiller sa température rectale et les gaz du sang artériel. Maintenir la température corporelle à 36,5 ± 0,5 ° C.</li>
	<li>Injecter par voie sous-cutanée la souris avec un antibiotique prophylactique (céfazoline 25 mg/kg)8.</li>
	<li>Placez votre souris dans la position couchée sur le coussin chauffant.</li>
	<li>Utiliser des tondeuses électriques pour exposer la peau en se rasant la fourrure de la souris sur la région du cou ventrale, ainsi que dans la région située entre le œil droit et l’oreille droite.</li>
	<li>Utiliser la crème épilation pour effacer la fourrure du corps de la souris et de désinfecter le site chirurgical en alternance scrbus avec povidione-iode et de l’éthanol à 70 %.</li>
	<li>Utiliser des ciseaux iris pour couper une incision de 1 cm de long médiane au niveau du col.</li>
	<li>Forceps iris permet de disséquer attentivement la CCA contre les nerfs vagues sans causer de dommage physique.</li>
	<li>Utiliser des sutures soie de 5-0 pour isoler le CCA.</li>
	<li>Faire une incision de 0,3 cm du cuir chevelu au point médian entre le œil droit et l’oreille droite.</li>
	<li>Utilisez microciseaux pour couper le muscle temporal pour exposer l’os zygomatique et squamosal.</li>
	<li>Sous un microscope à dissection stéréo, utilisez un microforages pour créer un trou de 2 mm de diamètre directement au-dessus de la MCA distale du côté droit.</li>
	<li>Ligaturer le tronc de la MCA distale de droite à l’aide d’une suture de 10-0.</li>
	<li>Occlure la CCA à droite à l’aide d’un clip d’anévrisme non traumatique.</li>
	<li>Après 10 ou 40 min d’ischémie, retirer le clips pour anévrisme et la suture pour restaurer le flux sanguin à la MCA et CCA.</li>
	<li>Utilisez un trombone de suture pour sceller l’incision de la peau sur la tête.</li>
	<li>Sceller les incisions de la peau du col utérin à l’aide d’une suture simple suivie en fermant la peau du cou avec suture ou agrafes9.</li>
	<li>Injecter par voie sous-cutanée de buprénorphine (0,1 mg/kg) pour le soulagement de douleur9.</li>
	<li>Maintenir la température du corps de la souris à 36,5 ± 0,5 ° C sur le coussin chauffant jusqu'à ce qu’il a pleinement récupéré de l’anesthésie. Ne pas retourner l’animal qui a subi une chirurgie à la compagnie des autres animaux jusqu'à ce qu’elle a entièrement récupéré. Ne laissez pas l’animal sans surveillance jusqu'à ce qu’il reprend conscience suffisante.</li>
	<li>Placez votre souris dans la cage autoclavée afin qu’il peut librement accéder à l’eau et chow après que elle a entièrement récupéré.</li>
</ol>2. la coloration avec le chlorure de 2,3,5-triphényltétrazolium
<ol><li>Anesthésier la souris avec 0,8 % d’hydrate de chloral par une injection intrapéritonéale.</li>
	<li>Utilisez des ciseaux d’exploitation pour décapiter l’animal.</li>
	<li>Exposer le crâne à l’aide de ciseaux iris à faire une incision dans la peau de la tête.</li>
	<li>Usage d’utilisation des ciseaux pour couper la partie antérieure de l’os frontal.</li>
	<li>Utiliser des iris ciseaux pour découper le crâne le long de la suture sagittale.</li>
	<li>Utilisez un rongeur d’OS pour repousser le frontal et l’os pariétal et exposer le cerveau.</li>
	<li>Forceps iris permet de disséquer le cerveau.</li>
	<li>Utilisez une matrice de cerveau de souris et de lames de rasoir pour obtenir des tranches coronales de 2 mm.</li>
	<li>Colorer les tranches de cerveau pendant 10 min à 37 ° C avec du chlorure de 2,3,5-triphényltétrazolium 2 % (TTC) dans 1 x solution saline tamponnée au phosphate.</li>
	<li>Rincez le cerveau 2 x avec 10 % de formol.</li>
	<li>Difficulté le cerveau dans du formol 10 % à la température ambiante pendant 24 h.</li>
</ol>3. mesure de la taille de l’infarctus
<ol><li>Organiser les sections sur une lame de plastique propre et orienter les tronçons rostral caudal.</li>
	<li>Numérisez les diapositives à l’aide d’un scanner. Placez une règle métrique et assurez-vous qu’il est visible sur l’image numérisée. Retournez la diapositive et numériser le verso.</li>
	<li>Calculer l’aire d’infarctus du myocarde de chaque section à l’aide de logiciels ImageJ.<ol>
<li>Ouvrez le fichier image et mettre en place l’échelle de l’image.</li>
		<li>Sélection à main levée permet de sélectionner la zone de l’infarctus.</li>
		<li>Les régions de gestionnaire d’intérêt (ROI) permet de mesurer l’aire d’intérêt.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Les zones d’infarctus du myocarde pour chaque section de la somme et multipliez le résultat par l’épaisseur de coupe pour estimer le volume total d’infarctus du myocarde.</li>
</ol>4. analyse statistique
<ol><li>GraphPad Prism 6 permet de déterminer la signification statistique de Student t-test. Remarque : Les barres d’erreur sur les graphiques à barres représentent les erreurs-types de la moyenne (SEM).</li>
	<li>Utilisation G * puissance 3.1 pour calculer la taille de l’échantillon approprié et effectuer une analyse de puissance10.</li>
</ol>

<ol><li>Woodruff, T. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pathophysiology%2C+treatment%2C+and+animal+and+cellular+models+of+human+ischemic+stroke%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+Neurodegeneration%22%5BJournal%5D)">Pathophysiology, treatment, and animal and cellular models of human ischemic stroke.</a> Molecular Neurodegeneration. 6 (1), 11(2011).</li>
<li>Chamorro, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+immunology+of+acute+stroke%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Reviews.+Neurology%22%5BJournal%5D)">The immunology of acute stroke.</a> Nature Reviews. Neurology. 8 (7), 401-410 (2012).</li>
<li>Engel, O., Kolodziej, S., Dirnagl, U., Prinz, V. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Modeling+stroke+in+mice+-+Middle+cerebral+artery+occlusion+with+the+filament+model%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Modeling stroke in mice - Middle cerebral artery occlusion with the filament model.</a> Journal of Visualized Experiments. (47), e2423(2011).</li>
<li>Lee, G. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Interleukin+15+blockade+protects+the+brain+from+cerebral+ischemia-reperfusion+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Brain%2C+Behavior%2C+and+Immunity%22%5BJournal%5D)">Interleukin 15 blockade protects the brain from cerebral ischemia-reperfusion injury.</a> Brain, Behavior, and Immunity. 73, 562-570 (2018).</li>
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<li>Kitagawa, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cerebral+ischemia+after+bilateral+carotid+artery+occlusion+and+intraluminal+suture+occlusion+in+mice%3A+evaluation+of+the+patency+of+the+posterior+communicating+artery%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cerebral+Blood+Flow+and+Metabolism%3A+Official+Journal+of+the+International+Society+of+Cerebral+Blood+Flow+and+Metabolism%22%5BJournal%5D)">Cerebral ischemia after bilateral carotid artery occlusion and intraluminal suture occlusion in mice: evaluation of the patency of the posterior communicating artery.</a> Journal of Cerebral Blood Flow and Metabolism: Official Journal of the International Society of Cerebral Blood Flow and Metabolism. 18 (5), 570-579 (1998).</li>
<li>Wellons, J. C. 3rd, et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+comparison+of+strain-related+susceptibility+in+two+murine+recovery+models+of+global+cerebral+ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Research%22%5BJournal%5D)">A comparison of strain-related susceptibility in two murine recovery models of global cerebral ischemia.</a> Brain Research. 868 (1), 14-21 (2000).</li>
<li>Doyle, K. P., Fathali, N., Siddiqui, M. R., Buckwalter, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Distal+hypoxic+stroke%3A+a+new+mouse+model+of+stroke+with+high+throughput%2C+low+variability+and+a+quantifiable+functional+deficit%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience+Methods%22%5BJournal%5D)">Distal hypoxic stroke: a new mouse model of stroke with high throughput, low variability and a quantifiable functional deficit.</a> Journal of Neuroscience Methods. 207 (1), 31-40 (2012).</li>
<li>Doyle, K. P., Buckwalter, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+mouse+model+of+permanent+focal+ischemia%3A+Distal+middle+cerebral+artery+occlusion%5BTitle%5D)+AND+%22Methods+in+Molecular+Biology%22%5BJournal%5D)">A mouse model of permanent focal ischemia: Distal middle cerebral artery occlusion.</a> Methods in Molecular Biology. , 103-110 (2014).</li>
<li>Wayman, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Performing+Permanent+Distal+Middle+Cerebral+with+Common+Carotid+Artery+Occlusion+in+Aged+Rats+to+Study+Cortical+Ischemia+with+Sustained+Disability%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+Of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Performing Permanent Distal Middle Cerebral with Common Carotid Artery Occlusion in Aged Rats to Study Cortical Ischemia with Sustained Disability.</a> Journal Of Visualized Experiments. (108), e53106(2016).</li>
<li>Noor, R., Wang, C. X., Shuaib, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+hyperthermia+on+infarct+volume+in+focal+embolic+model+of+cerebral+ischemia+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience+Letters%22%5BJournal%5D)">Effects of hyperthermia on infarct volume in focal embolic model of cerebral ischemia in rats.</a> Neuroscience Letters. 349 (2), 130-132 (2003).</li>
<li>Florian, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Long-term+hypothermia+reduces+infarct+volume+in+aged+rats+after+focal+ischemia%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience+Letters%22%5BJournal%5D)">Long-term hypothermia reduces infarct volume in aged rats after focal ischemia.</a> Neuroscience Letters. 438 (2), 180-185 (2008).</li>
<li>Carmichael, S. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rodent+models+of+focal+stroke%3A+size%2C+mechanism%2C+and+purpose%5BTitle%5D)+AND+%22NeuroRx%3A+The+Journal+of+the+American+Society+for+Experimental+NeuroTherapeutics%22%5BJournal%5D)">Rodent models of focal stroke: size, mechanism, and purpose.</a> NeuroRx: The Journal of the American Society for Experimental NeuroTherapeutics. 2 (3), 396-409 (2005).</li>
<li>Lin, T. N., Te, J., Huang, H. C., Chi, S. I., Hsu, C. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prolongation+and+enhancement+of+postischemic+c-fos+expression+after+fasting%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Prolongation and enhancement of postischemic c-fos expression after fasting.</a> Stroke. 28 (2), 412-418 (1997).</li>
<li>Glazier, S. S., O'Rourke, D. M., Graham, D. I., Welsh, F. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Induction+of+ischemic+tolerance+following+brief+focal+ischemia+in+rat+brain%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cerebral+Blood+Flow+and+Metabolism%3A+Official+Journal+of+the+International+Society+of+Cerebral+Blood+Flow+and+Metabolism%22%5BJournal%5D)">Induction of ischemic tolerance following brief focal ischemia in rat brain.</a> Journal of Cerebral Blood Flow and Metabolism: Official Journal of the International Society of Cerebral Blood Flow and Metabolism. 14 (4), 545-553 (1994).</li>
<li>Tachibana, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Early+Reperfusion+After+Brain+Ischemia+Has+Beneficial+Effects+Beyond+Rescuing+Neurons%5BTitle%5D)+AND+%22Stroke%22%5BJournal%5D)">Early Reperfusion After Brain Ischemia Has Beneficial Effects Beyond Rescuing Neurons.</a> Stroke. 48 (8), 2222-2230 (2017).</li>
<li>Gan, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ischemic+neurons+recruit+natural+killer+cells+that+accelerate+brain+infarction%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences+of+the+United+States+of+America%22%5BJournal%5D)">Ischemic neurons recruit natural killer cells that accelerate brain infarction.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 111 (7), 2704-2709 (2014).</li>
<li>Li, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Astrocyte-derived+interleukin-15+exacerbates+ischemic+brain+injury+via+propagation+of+cellular+immunity%5BTitle%5D)+AND+%22Proceedings+of+the+National+Academy+of+Sciences+of+the+United+States+of+America%22%5BJournal%5D)">Astrocyte-derived interleukin-15 exacerbates ischemic brain injury via propagation of cellular immunity.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. 114 (3), E396-E405 (2017).</li>
<li>Wang, S., Zhang, H., Dai, X., Sealock, R., Faber, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Genetic+architecture+underlying+variation+in+extent+and+remodeling+of+the+collateral+circulation%5BTitle%5D)+AND+%22Circulation+Research%22%5BJournal%5D)">Genetic architecture underlying variation in extent and remodeling of the collateral circulation.</a> Circulation Research. 107 (4), (2010).</li>
</ol>

Les auteurs n’ont rien à divulguer.

Le modèle de souris OACM/reperfusion est un modèle animal couramment employé pour imiter une ischémie transitoire chez l’homme. Ce modèle animal peut être appliqué à des souches de souris transgéniques et knock-out pour étudier la physiopathologie des accidents vasculaires cérébraux. Plusieurs étapes dans le protocole sont particulièrement critiques. (1) la microforages doivent être utilisé avec précaution lorsque vous créez un trou dans le crâne, par des mesures inappropriées facilement causant une hémorragie de la MCA....

Le modèle de souris de l’ischémie-reperfusion cérébrale est l’une des approches expérimentales plus largement utilisés pour étudier la physiopathologie des induite par l’ischémie cérébrale lésion1. Car l’ischémie-reperfusion cérébrale active le système immunitaire périphérique, les cellules du système immunitaires périphérique s’infiltrer dans le cerveau ischémique et causent des dommages neuronaux2. Ainsi, un modèle de souris fiable et reproductible qui imite l’ischémie-reperfusion cérébrale est nécessaire pour comprendre la physiopathologie des accidents vasculaires cérébraux.
C57BL/6J (B6) souris sont la souche plus couramment utilisée dans les expériences de course car ils peuvent facilement être génétiquement manipulés. Il existe deux modèles courants d’OACM/reperfusion qui imitent la condition d’ischémie-reperfusion cérébrale. Le premier est le modèle de filament d’intraluminale d’OACM proximale, où il est employé un filament de silicium enduit d’occlure intravasculaire le flux sanguin dans le MCA ; le filament occlusion est ensuite supprimé pour restaurer le flux de sang3. Une durée courte occlusion entraîne une lésion de la région sous-corticale, considérant qu’une plus longue durée de l’occlusion provoque un infarctus dans les régions corticales et sous-corticales. Le second modèle est le modèle de ligature d’OACM distal, qui implique la ligature extravasculaire du MCA et CCA pour réduire la circulation sanguine par l’intermédiaire de la MCA, après quoi la circulation sanguine est rétablie par la suppression de la suture et anévrisme clip4. Dans ce modèle, un infarctus est causé dans les aires corticales, et le taux de mortalité est faible. Car la ligature du modèle OACM/reperfusion nécessite craniotomie afin d’exposer le site de la MCA distale, le site peut être facilement confirmé, et tente de déterminer si le flux sanguin dans le MCA distale est perturbé au cours de la procédure est simple.
B6 souris présentent des variations considérables dans l’anatomie de leur cercle de Willis ; Cela pourrait affecter le volume d’un infarctus après ischémie-reperfusion cérébrale5,6,7. Actuellement, ce problème peut être surmonté grâce à la ligature du MCA distale8. Dans cette étude, nous établir une méthode d’occlusion de l’écoulement de sang MCA et permettant de reperfusion après une période d’ischémie. Deux vaisseaux occlusion du modèle d’ischémie-reperfusion cérébrale induit une ischémie transitoire du territoire MCA par ligature du MCA distale droite et droite CCA, avec débit sanguin restauré après une certaine période d’ischémie. Ce modèle OACM/reperfusion provoque un infarctus de taille stable, une grande partie de cerveau-infiltration de cellules immunitaires dans le cerveau ischémique et un déficit comportemental après ischémie – reperfusion cérébrale4.

<table><tbody><tr><td>Bone rongeur</td><td>Diener</td><td></td><td>Friedman</td></tr><tr><td>Buprénorphine</td><td>Sigma</td><td>B-044</td><td></td></tr><tr><td>Cefazolin</td><td>Sigma</td><td>1097603</td><td></td></tr><tr><td>Hydrate de chloral</td><td>Sigma</td><td>C8383</td><td></td></tr><tr><td>Microscope de dissection</td><td>Nikon</td><td>SMZ-745</td><td></td></tr><tr><td>Tondeuse électrique</td><td>Petpro</td><td></td><td></td></tr><tr><td>10 % formol</td><td>Sigma</td><td>F5304</td><td></td></tr><tr><td>Germinator stérilisateur à billes sèches</td><td>Braintree Scientific</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Pince à iris</td><td>Karl Klappenecker</td><td></td><td>10 cm</td></tr><tr><td>Ciseaux à iris</td><td>Diener</td><td></td><td>9 cm</td></tr><tr><td>Ciseaux à iris STR</td><td>Karl Klappenecker</td><td></td><td>11 cm</td></tr><tr><td>Microdrill</td><td>Stoelting</td><td>FOREEDOM K.1070</td><td></td></tr><tr><td>Micro-ciseaux-Vannas</td><td>HEISS</td><td>H-4240</td><td>lame 7mm, 8 cm</td></tr><tr><td>Matrice cérébrale de souris</td><td>World Precision Instruments</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Système de pression artérielle non invasif</td><td>Muromachi</td><td>MK-2000ST</td><td></td></tr><tr><td>Ciseaux opératoires STR</td><td>Karl Klappenecker</td><td></td><td>14 cm</td></tr><tr><td>Système de surveillance physiologique</td><td>Harvard Apparatus</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Razor lames</td><td>Ever-Ready</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Stoelting Chauffe-rongeurs</td><td>Stoelting Stoelting</td><td>53810</td><td>Coussin chauffant</td></tr><tr><td>Clip de suture</td><td>Pince à</td><td></td><td></td></tr><tr><td>épiler</td><td>IDEALTEK</td><td></td><td>No.3</td></tr><tr><td>Vetbond</td><td>3M</td><td>15672</td><td>Colle chirurgicale</td></tr><tr><td>10-0 suture</td><td>UNIK</td><td>NT0410</td><td></td></tr><tr><td>2,3,5-Triphényltétrazolium chlorure</td><td>Sigma</td><td>T8877</td><td></td></tr></tbody></table>

modèle de souris de deux vaisseaux occlusion d’ischémie-reperfusion cérébrale

Two-vessel Occlusion Mouse Model of Cerebral Ischemia-reperfusion

Dans cette étude, un modèle de souris de l’occlusion de l’artère cérébrale moyenne (MCA) est utilisé pour étudier l’ischémie-reperfusion cérébrale. Un modèle de souris fiable et reproductible est utile pour étudier la physiopathologie de l’ischémie-reperfusion cérébrale et de déterminer des stratégies thérapeutiques potentiels pour les patients atteints d’accident vasculaire cérébral. Variations dans l’anatomie du cercle de Willis de C57BL/6 mâles affecte leur volume d’infarctus après lésion cérébrale induite d’ischémie. Des études ont indiqué qu’occlusion distale du MCA (OACM) peut remédier à ce problème et entraîner une taille de l’infarctus stable. Dans cette étude, nous établissons un modèle de souris de deux vaisseaux occlusion d’ischémie-reperfusion cérébrale par l’intermédiaire de l’interruption de la circulation sanguine vers la droite MCA. Nous distalement ligaturer le MCA droite et artère carotide commune droite (CCA) et de restaurer le flux sanguin après une certaine période d’ischémie. Cette lésion d’ischémie-reperfusion provoque un infarctus de taille stable et un déficit comportemental. Les cellules du système immunitaires périphérique infiltrent le cerveau ischémique dans le délai de l’infiltration de 24h. En outre, la perte de neurones dans la zone corticale est moindre pour une plus longue durée de reperfusion. Par conséquent, ce modèle de deux-bateau occlusion est approprié pour étudier la réponse immunitaire et la récupération neuronale au cours de la période de reperfusion après une ischémie cérébrale.

Cette procédure OACM/reperfusion produit un infarctus cortical dans le voisinage de la MCA droite et causé un déficit comportemental. Différents niveaux de volume induite par l’ischémie du myocarde (Figure 1 aB) et la perte neuronale (Figure 1D) ont été créés dans le cortex cérébral de la zone droite de MCA à travers une augmentation de la durée de la ligature. Cette blessure OACM/reperfusion a d...

Un modèle murin d’ischémie-reperfusion cérébrale est mis en place pour étudier la physiopathologie des accidents vasculaires cérébraux. Nous distalement ligaturer l’artère cérébrale moyenne droite et artère carotide commune droite et restaurer le flux sanguin après 10 ou 40 min d’ischémie.

Modèle de souris de deux vaisseaux Occlusion d’ischémie-reperfusion cérébrale

In this study, a middle cerebral artery (MCA) occlusion mouse model is employed to study cerebral ischemia-reperfusion. A reproducible and reliable mouse ...

Ce modèle de souris occlusion à deux vaisseaux de l’ischémie cérébrale-reperfusion peut étudier la pathophysiologie de la course. Ce modèle induirea un volume infarctus stable de la majeure partie du cerveau infiltrant des cellules immunitaires dans le cerveau ischémique et le déficit comportemental après ischémie-reperfusion cérébrale. Dans ce modèle, un infarctus est causé dans les zones corticales et le taux de mortalité est faible.Puisque le modèle de reperfusion de MCAO de ligature exige craniotomy pour exposer la taille du MCA distal, la taille peut être facilement confirmée, et l’examen si le flux sanguin dans le MCAO distal est perturbé pendant la procédure est simple. Fournir aux souris un accès gratuit à l’eau et à la nourriture jusqu’à la chirurgie. Autoclave les outils chirurgicaux, et utiliser 70% d’éthanol pour assainir la table de chirurgie et de l’équipement.Après avoir anesthésié une souris de huit à 12 semaines, assurez-vous qu’elle n’a pas de réflexe de pédale lorsqu’elle est testée à l’aide d’un pincement ferme des pieds. Utilisez de l’onguent vétérinaire pour prévenir la sécheresse oculaire pendant que la souris est sous anesthésie. Pour surveiller la pression

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L'induction chirurgicale d'une lésion cérébrale ischémique chez le rat est un modèle largement utilisé pour la recherche sur les AVC. Ici nous démontrons l'induction d'une ischémie cérébrale focale par occlusion de l'artère cérébrale moyenne. Visualisation de l'infarctus entraînant par coloration histologique et l'imagerie par résonance magnétique est également représentée.

Focale modèle d&#39;ischémie cérébrale par occlusion suture endovasculaire de l&#39;artère cérébrale moyenne chez le rat

L'occlusion filamenteux de l'artère cérébrale moyenne est un modèle commun pour l'étude de l'AVC ischémique chez la souris.

Course de modélisation chez la souris - Moyen-occlusion artérielle cérébrale avec le modèle filamentaire

Afin de comprendre la physiopathologie de la course, il est important d'utiliser des modèles fiables. Ce document décrira l'un des modèles de course les plus fréquemment utilisés chez la souris, appelé le modèle milieu occlusion de l'artère cérébrale (MCAo) (également appelé le filament intraluminal ou d'un modèle de suture) avec reperfusion.

Approche chirurgicale pour Occlusion de l&#39;artère cérébrale moyenne et reperfusion induite par des maladies chez les souris

Nous décrivons un modèle murin d’AVC induit par l’occlusion de l’artère cérébrale moyenne à l’aide d’une suture recouverte de silicone. Le protocole peut être appliqué pour induire une occlusion permanente ou une ischémie temporaire, suivie d’une reperfusion.

Induction de l&#39;AVC ischémique et ischémie-reperfusion chez la souris Utilisation de l&#39;artère moyenne Occlusion Technique et visualisation des Infarctus Zone

Intraluminale filament une occlusion de l’artère cérébrale moyenne est le modèle le plus souvent utilisé en vivo d’accidents cérébrovasculaires chez les rongeurs. Une autre approche chirurgicale pour permettre la réparation de l’artère carotide commune est effectuée ici, qui permet à la reperfusion de l’artère carotide commune et une reperfusion intégrale sur le territoire de l’artère cérébrale moyenne.

Occlusion de l’artère cérébrale moyenne permettant une Reperfusion par l’intermédiaire de réparation de l’artère carotide commune chez les souris

Ce protocole démontre un modèle unique d’AVC chez la souris avec un infarctus de taille moyenne et un excellent taux de survie. Ce modèle permet aux chercheurs en AVC préclinique de prolonger la durée de l’ischémie, d’utiliser des souris âgées et d’évaluer les résultats fonctionnels à long terme.

Un modèle modifié d’occlusion de l’artère cérébrale moyenne transcrânienne pour étudier les résultats de l’AVC chez des souris âgées

Ce protocole décrit le modèle d’ischémie cérébrale focale transitoire chez la souris par occlusion intraluminale de l’artère cérébrale moyenne. De plus, des exemples d’évaluation des résultats sont présentés à l’aide de l’imagerie par résonance magnétique et de tests comportementaux.

Modèle d’occlusion transitoire de l’artère cérébrale moyenne de l’AVC

Ici, nous présentons un protocole pour établir un modèle distal d’occlusion de l’artère cérébrale moyenne (dMCAO) par électrocoagulation transcrânienne chez les souris C57BL/6J et évaluons le comportement neurologique et les caractéristiques histopathologiques ultérieurs.

Induction de l’AVC ischémique aigu chez la souris à l’aide de la technique d’occlusion de l’artère moyenne distale

Le protocole actuel décrit un modèle de rat d’occlusion/reperfusion de l’artère cérébrale moyenne qui préserve la structure anatomique des vaisseaux cérébraux sans causer de dommages.

Un modèle chez le rat d’occlusion/reperfusion de l’artère cérébrale moyenne sans endommager la structure anatomique des vaisseaux cérébraux

Ce protocole présente un guide étape par étape pour les chercheurs afin d’effectuer la procédure d’occlusion de l’artère cérébrale moyenne sur des souris en utilisant la méthode modifiée de l’artère carotide externe Longa. Les modifications présentées dans cet article visent à augmenter la précision de l’occlusion de l’artère cérébrale moyenne et à assurer une reperfusion complète.

Optimisation de la méthode d’occlusion de l’artère cérébrale moyenne Longa pour une reperfusion complète

Ce protocole décrit le processus de préparation à la reperfusion de l’occlusion de l’artère cérébrale moyenne via l’artère carotide commune.

Préparation d’un modèle modifié pour la reperfusion de l’occlusion de l’artère cérébrale moyenne

Apprenez le modèle d'occlusion de deux vaisseaux chez la souris pour étudier l'ischémie-reperfusion cérébrale. Cette méthode permet d'évaluer le volume de l'infarctus et les déficits comportementaux post-AVC.

Modèle de souris de deux vaisseaux Occlusion d’ischémie-reperfusion cérébrale

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