Incorporation d’une procédure de chance de survie de la biopsie hépatique chez la souris afin d’évaluer la Stéatohépatite non alcoolique (NASH) résolution

Cette biopsie du foie pouvant survivre chez les souris atteintes de stéatohépatite non alcoolique, ou NASH, permet à la fois l’exclusion des animaux qui n’ont pas nash et la mesure précise des réponses aux interventions. Cette procédure imite étroitement la conception des essais cliniques pour les études nash qui comparent la pathologie post-traitement du foie et permet une évaluation plus précise de l’efficacité du médicament. Exposer le lobe du foie peut être difficile au début.

Entraînez-vous à exposer le tissu avec votre doigt ou un applicateur à pointe de coton d’abord pour trouver le meilleur ajustement pour vous. Après avoir confirmé un manque de réponse au pincement d’onde, faites une incision abdominale abdominale longitudinale d’un à deux centimètres immédiatement caudale au processus xiphoïde et légèrement au côté gauche de la souris anesthésiée. Utilisez des forceps et des ciseaux pour émousser disséquer la peau jusqu’à ce que la paroi abdominale soit exposée et que le foie puisse être visualisé sous le tissu musculaire.

À l’aide d’une lame stérile de scalpel, faire une incision d’un à deux centimètres dans la paroi abdominale pour exposer le lobe latéral gauche du foie, et placer un coton-tige stérile sous le lobe latéral gauche pour extraire doucement la partie à exposer par l’incision. Placez un morceau stérile de gaze saline sous le lobe exposé et utilisez des ciseaux stériles pour exciser un morceau de tissu extrait en forme de coin de 30 à 50 milligrammes. Couper un morceau d’éponge comprimée de gélatine absorbable de taille similaire au morceau de foie compensé, et utiliser des forceps stériles pour insérer l’éponge dans la partie coupée du foie.

Maintenez l’éponge en place avec les forceps jusqu’à ce que la gélatine adhère à la surface du foie et l’hémostase est atteinte avant de placer la biopsie du foie dans un récipient approprié pour son analyse en aval. Retournez doucement le foie dans la cavité abdominale, en prenant soin de ne pas déranger l’éponge, et, commençant et se terminant par un nœud carré complet, suturez la paroi abdominale avec des sutures absorbables enduites 5-0. Ensuite, fermez la peau avec des pinces à plaies de sept millimètres, confirmant une fermeture complète après le placement, et retournez la souris dans une cage propre sur une surface chauffée avec surveillance jusqu’à la récupération complète.

Dans cette expérience représentative, 118 souris ont été biopsiées après 29 semaines sur un régime personnalisé riche en graisse, fructose, et cholestérol pour induire NASH. Le niveau de fibrose et de stéatose a ensuite été noté pour chaque biopsie. Les souris ont été exclues de l’étude sur la base de la fibrose basse ou élevée et de la perte de poids anormale ou de la cicatrisation des plaies, et les souris restantes ont été traitées avec le véhicule ou le liraglutide agoniste de récepteur glucagon-like pendant six semaines.

Dans les groupes traités par véhicule, une souris a montré une augmentation de la fibrose et quatre souris ont démontré une augmentation du score d’activité nash. Le traitement au liraglutide a été associé à une amélioration globale de la fibrose, 17 % du groupe de traitement s’améliorant et 83 % restant inchangé. De même, le traitement au liraglutide a amélioré le score global de NASH, avec 66% du groupe présentant un score d’activité nash amélioré, et 33% sont restés inchangés.

En outre, le traitement de liraglutide a amélioré l’inflammation, avec 75% du groupe ayant un score inférieur d’inflammation après traitement, alors que les animaux véhicule-traités ont éprouvé une augmentation de l’inflammation. La stéatose n’a pas été affectée par le traitement agoniste, restant inchangée dans les deux groupes avant et après l’intervention. Veillez à ne pas endommager trop le morceau de foie excisé pour vous assurer qu’il peut être analysé de façon appropriée pour vos besoins.

Cette procédure peut être utilisée pour imiter les conceptions d’essais cliniques en comparant les effets avant et après le traitement de nouvelles thérapeutiques sur les foies NASH.