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Isolement et coloration des kératinocytes de peau de souris pour l'analyse spécifique de cycle ce...
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Developmental Biology
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JoVE Journal Developmental Biology
Isolation and Staining of Mouse Skin Keratinocytes for Cell Cycle Specific Analysis of Cellular Protein Expression by Mass Cytometry

Isolement et coloration des kératinocytes de peau de souris pour l'analyse spécifique de cycle cellulaire de l'expression cellulaire de protéine par cytométrie de masse

Full Text
8,137 Views
12:34 min
May 9, 2019

DOI: 10.3791/59353-v

Josiah Fernandez1, Enrique C Torchia1

1Department of Dermatology and Charles C. Gates Center for Regenerative Medicine,University of Colorado Anschutz Medical Campus

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Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.

Ce protocole décrit comment isoler les kératinocytes cutanés des modèles de souris, les tacles avec des anticorps marqués en métal, et analyser les cellules tachées par cytométrie de masse afin de profiler le modèle d'expression des protéines d'intérêt dans les différentes phases du cycle cellulaire.

Ce protocole est significatif pour deux raisons principales. Numéro un, il permet à un utilisateur d’être en mesure de déterminer les états du cycle cellulaire des cellules de la peau qui ont été isolés d’un modèle animal. Il nous permet également d’être en mesure d’analyser l’expression des protéines dans les phases discrètes du cycle cellulaire.

Par rapport aux méthodes précédentes de détermination de la prolifération cellulaire, notre méthode permet une détermination plus précise des différentes phases du cycle cellulaire, et nous pouvons également analyser plus de 40 marqueurs différents dans les différentes étapes de la division cellulaire. Cela améliore considérablement l’application et la polyvalence de la méthode. Ce protocole peut être utilisé dans la recherche sur le cancer et dans tout autre type de maladie où il est nécessaire de déterminer les modèles spécifiques d’expression des protéines du cycle cellulaire.

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Biologie du développement Numéro 147 Cycle cellulaire Epiderme Peau Isolement des kératinocytes Modèles de souris cytométrie de masse Prolifération Corrélation de l'expression protéique Analyse des cellules uniques

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