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DOI: 10.3791/59353-v
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Ce protocole décrit comment isoler les kératinocytes cutanés des modèles de souris, les tacles avec des anticorps marqués en métal, et analyser les cellules tachées par cytométrie de masse afin de profiler le modèle d'expression des protéines d'intérêt dans les différentes phases du cycle cellulaire.
Ce protocole est significatif pour deux raisons principales. Numéro un, il permet à un utilisateur d’être en mesure de déterminer les états du cycle cellulaire des cellules de la peau qui ont été isolés d’un modèle animal. Il nous permet également d’être en mesure d’analyser l’expression des protéines dans les phases discrètes du cycle cellulaire.
Par rapport aux méthodes précédentes de détermination de la prolifération cellulaire, notre méthode permet une détermination plus précise des différentes phases du cycle cellulaire, et nous pouvons également analyser plus de 40 marqueurs différents dans les différentes étapes de la division cellulaire. Cela améliore considérablement l’application et la polyvalence de la méthode. Ce protocole peut être utilisé dans la recherche sur le cancer et dans tout autre type de maladie où il est nécessaire de déterminer les modèles spécifiques d’expression des protéines du cycle cellulaire.
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