Name: Évaluation de la réserve de flux coronaire après la réperfusion dischémie myocardique chez les rats (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-06-28T13:20:00.000+00:00
Duration: 6 min 32 s
Description: Découvrez une méthode d'échocardiographie Doppler pour mesurer la réserve de flux coronaire chez le rat après ischémie-reperfusion. Cette technique permet d'évaluer la fonction microvasculaire cardiaque et de tester des interventions thérapeutiques.

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Nous tenons à remercier la fondation Helmsley d'avoir fourni de l'équipement d'échographie pour effectuer nos expériences. Ces travaux ont été soutenus par la subvention NIA R01 053585.

Toutes les procédures ont été effectuées conformément aux protocoles approuvés par le Comité institutionnel de soins et d'utilisation des animaux de l'Université de Louisville (protocole approuvé par l'IACUC 18223) et le Guide des NIH pour l'entretien et l'utilisation des animaux de laboratoire11.
1. Animaux
<ol><li>Utilisez une femelle Fisher 344 rats de 4 mois (150-180 g) pour l'étude.</li>
</ol>2. Imagerie par ultrasons avant la chirurgie IR
<ol><li>Anesthésiez le rat à l'isoflurane - chambre d'induction à 5% avec un débit de 1,5 à 2,0 L/min O2 suivi de 1,5 à 2,0% avec un débit de 1,5 à 2,0 L/min O2. Cette anesthésie est maintenue tout au long de l'expérience, pendant les stades de repos et de stress.</li>
	<li>Placez l'animal en position de supine et rasz le thorax. Maintenir la température du corps à 37-38 oC à l'aide de la plate-forme de réchauffement intégrée. Surveillez la fréquence cardiaque à l'aide du logiciel. REMARQUE : Une anesthésie adéquate est cruciale pour maintenir la fréquence cardiaque à des rythmes physiologiques normaux (entre 295 et 350 battements/min).</li>
	<li>Appliquer la pommade vétérinaire ophtalmique pour prévenir la sécheresse des yeux avant l'imagerie.</li>
	<li>Effectuer l'échocardiographie à l'aide d'une sonde linéaire de 13 à 24 MHz (p. ex., MS250) (figure1A).</li>
	<li>Placez l'animal en position de supine sur la plate-forme chauffée. Assurez-vous que l'anesthésie est contrôlée par le cône nasal. Placez ensuite la sonde pour obtenir la vue d'axe court parasternal (PSAX) à l'aide du système ferroviaire (figure 1B).</li>
	<li>Déplacer la sonde dans la direction rostrale de la PSAX, localiser l'artère pulmonaire (Figure 1B).</li>
	<li>Déplacez la sonde légèrement dans la direction caudale de l'artère pulmonaire pour voir le LAD et stocker l'image. REMARQUE: Le LAD est difficile à trouver sans Color Doppler, donc les images B-Mode de la LAD ne sont pas toujours possibles.</li>
	<li>Lorsque les différences individuelles rendent difficile la localisation de l'artère coronaire laJ, suivez la technique mentionnée ci-dessous :<ol>
<li>Déplacez la sonde latérale à l'artère pulmonaire.</li>
		<li>Angle de la plate-forme de sorte que l'animal est incliné, inversé, ou légèrement vers le côté droit de sorte que le ventricule gauche est plus facilement visible avec la sonde.</li>
	</ol></li>
	<li>Une fois que l'image en mode B est capturée ou stockée en ciné, cliquez sur le Color Doppler sur l'écran tactile (Figure 1C). Visualisez l'artère coronaire (la flèche blanche indique la DLA) dans l'axe court (Figure 1C). La couleur rouge, vue en temps réel, indique la direction du flux (c.-à-d. que le flux sanguin est vers la sonde).</li>
	<li>Après avoir visualisé LAD sur un mode couleur-Doppler, changer le mode à l'onde d'impulsion (PW)-mode. Rechercher la présence d'une ligne jaune-indicateur sur l'artère coronaire (figure 2A).</li>
	<li>Placez la ligne JAUNE PW au milieu de l'artère coronaire. Assurez-vous que l'angle est parallèle à la direction du flux. REMARQUE : La vitesse du flux dépend fortement de l'angle de la ligne PW, alors assurez-vous de faire correspondre l'angle de la sonde à l'écran avec l'angle de la LAD. Utilisez l'écran tactile pour ajuster l'angle; L'angle PW doit être inférieur à 60 degrés.</li>
	<li>Utilisez le magasin de cine pour capturer la vitesse du flux coronarien de LAD au repos au diastole de pointe pendant que les formes d'onde ( figure2B).</li>
	<li>Après l'obtention de la vitesse de débit laDA au repos, mesurez la vitesse maximale d'écoulement de LAD pendant le stress pour calculer le CFR. Pour mesurer la vitesse maximale d'écoulement pendant le stress, infusez de la dobutamine à une dose de 20 g/kg/min par la veine de la queue8 (figure 2C). REMARQUE : L'infusion de dobutamine ne doit pas dépasser 8 min. Utilisez une pompe à perfusion et fixez le diamètre de la pompe à perfusion à 14,43 pour la seringue BD de 10 ml.<ol>
<li>Utilisez un ensemble papillon d'infusion 25 G pour la veine de la queue cannulation. Pour placer l'aiguille d'infusion, placez une petite bande de gaze autour de la base de la queue du rat, puis saisissez avec des hemostats et tordez le tourniquet pour appliquer la pression et faire agrandir la veine.</li>
		<li>Placez l'aiguille directement connectée à la seringue Dobutamine. REMARQUE : Prenez soin de ne pas introduire accidentellement de la drogue lors de l'élaboration du sang pour assurer un bon placement de l'aiguille dans la veine de la queue. Aussi, assurez-vous d'éviter d'introduire une bulle d'air dans la veine, comme une embolie peut être fatale à l'animal.</li>
		<li>Une fois l'aiguille placée, stabilisez-la avec une colle et un morceau de ruban chirurgical, en fixant la ligne d'infusion à la queue.</li>
		<li>Retirez les hemostats et le tourniquet pour récupérer le flux.</li>
		<li>Placer la seringue Dobutamine dans la pompe à perfusion et la placer pour injecter 20 g/kg/min.</li>
		<li>Pendant l'infusion de Dobutamine, surveillez soigneusement le pic de LAD et la fréquence cardiaque. Enregistrez périodiquement les pics LAD PW dans le mode Doppler, surtout chaque fois qu'il augmente en réponse à la dobutamine. REMARQUE : Le défi de stress induit par la Dobutamine fait travailler le cœur plus fort; cela entraîne souvent le mouvement du cœur et de la LAD. Soyez prêt à déplacer l'animal, la sonde, ou les deux afin de garder le LAD en vue.</li>
		<li>Après que les pics de LAD et la fréquence cardiaque aient plafonné pendant le défi, arrêtez l'infusion de Dobutamine, enlevez l'ensemble d'infusion de veine de queue et retirez l'animal de la plate-forme. Permettre à l'animal de récupérer dans sa cage d'origine.</li>
	</ol></li>
	<li>Sélectionnez l'outil Peak Vel pour obtenir les vitesses diastoliques maximales des images montrées dans la figure 2B et C.</li>
	<li>Calculer l'indice CFR en tant que rapport de la vitesse diastolique de pointe du stress LAD (Dobutamine) à la vitesse diastolique de pointe la LAD au repos (figure 2A).</li>
</ol>3. Blessures de réperfusion d'ischémie
<ol><li>Anesthésier le rat à l'isoflurane - chambre d'induction à 5% avec 1,5 à 2,0 L/min O2 flux suivi de 1,5 à 2,0% avec 1,5 à 2,0 L/min O2 flux.</li>
	<li>Confirmer la profondeur de l'anesthésie par l'absence du réflexe de sevrage de la pédale. Utilisez un onguent vétérinaire ophtalmique sur les yeux pour prévenir la sécheresse. Maintenir la température corporelle appropriée de 37 à 38 oC à l'aide d'un coussin chauffant ou d'un contrôleur de température des animaux.</li>
	<li>Administrer le Meloxicam préchirurgical, 5 mg/kg par voie intramusculaire, 15 min avant la chirurgie, suivi d'un bolus sous-cutané de 2 ml de 0,9 % salin pour prévenir la déshydratation pendant la chirurgie. Des gants et des instruments stériles ont été employés, et des techniques aseptiques ont été employées. À l'aide de la source de lumière à fibre optique, intuber le rat à l'aide d'un cathéter IV de calibre 18 et connectez-vous au ventilateur.</li>
	<li>Ligate LAD en utilisant 8-0 la suture de monofilament par l'ouverture de 15 mm à l'espace intercostal 5 ème. Attachez un noeud uni et laissez-le pendant 30 min. Confirmer visuellement l'ischémie chez tous les rats par la décoloration de la surface du cœur12. Relâchez la ligature après 30 min et vérifiez la réperfusion par la rougeur de la zone précédemment décolorée du muscle cardiaque pendant 1-2 min12.</li>
	<li>Fermez la cage thoracique à l'aide de 4-0 suture absorbable avec un motif de suture interrompue, puis fermez la peau en utilisant 5-0 suture de soie non absorbable avec motif de suture continue.</li>
	<li>Retirer l'animal de l'anesthésie. Laisser l'animal se rétablir dans la cage de la maison. Le Meloxicam de 5 mg/kg a été injecté intramusculaire toutes les 24 heures avant d'euthanasier l'animal (72 heures après la chirurgie).</li>
</ol>4. Imagerie par ultrasons après une chirurgie infrarouge
<ol><li>72 h après chirurgie ir, mesurer le flux coronaire et CFR à nouveau. Comparez les mesures aux mesures avant IR. Répétez les étapes 2.1 à 2.15 comme décrit ci-dessus.</li>
</ol>

<ol><li>Eltzschig, H. K., Eckle, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ischemia+and+reperfusion--from+mechanism+to+translation%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+medicine%22%5BJournal%5D)">Ischemia and reperfusion--from mechanism to translation.</a> Nature medicine. 17 (11), 1391-1401 (2011).</li>
<li>French, C. J., Zaman, A. K., Sobel, B. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Failure+of+erythropoietin+to+render+jeopardized+ischemic+myocardium+amenable+to+incremental+salvage+by+early+reperfusion%5BTitle%5D)+AND+%22Coronary+Artery+Disease%22%5BJournal%5D)">Failure of erythropoietin to render jeopardized ischemic myocardium amenable to incremental salvage by early reperfusion.</a> Coronary Artery Disease. 20 (4), 295-299 (2009).</li>
<li>Marzilli, M., Mariani, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ischemia-reperfusion+and+microvascular+dysfunction%3A+implications+for+salvage+of+jeopardized+myocardium+and+reduction+of+infarct+size%5BTitle%5D)+AND+%22Italian+Heart+Journal%22%5BJournal%5D)">Ischemia-reperfusion and microvascular dysfunction: implications for salvage of jeopardized myocardium and reduction of infarct size.</a> Italian Heart Journal. 2 Suppl 3, 40s-42s (2001).</li>
<li>Prasad, A., Gersh, B. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Management+of+microvascular+dysfunction+and+reperfusion+injury%5BTitle%5D)+AND+%22Heart+%28British+Cardiac+Society%29%22%5BJournal%5D)">Management of microvascular dysfunction and reperfusion injury.</a> Heart (British Cardiac Society). 91 (12), 1530-1532 (2005).</li>
<li>Ishihara, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Impaired+coronary+flow+reserve+immediately+after+coronary+angioplasty+in+patients+with+acute+myocardial+infarction%5BTitle%5D)+AND+%22British+heart+journal%22%5BJournal%5D)">Impaired coronary flow reserve immediately after coronary angioplasty in patients with acute myocardial infarction.</a> British heart journal. 69 (4), 288-292 (1993).</li>
<li>Camici, P. G., d'Amati, G., Rimoldi, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Coronary+microvascular+dysfunction%3A+mechanisms+and+functional+assessment%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Reviews+Cardiology%22%5BJournal%5D)">Coronary microvascular dysfunction: mechanisms and functional assessment.</a> Nature Reviews Cardiology. 12 (1), 48-62 (2015).</li>
<li>Chung, K. S., Nguyen, P. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Non-invasive+measures+of+coronary+microcirculation%3A+Taking+the+long+road+to+the+clinic%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Nuclear+Cardiology%22%5BJournal%5D)">Non-invasive measures of coronary microcirculation: Taking the long road to the clinic.</a> Journal of Nuclear Cardiology. , (2017).</li>
<li>Kelm, N. Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adipose-derived+cells+improve+left+ventricular+diastolic+function+and+increase+microvascular+perfusion+in+advanced+age%5BTitle%5D)+AND+%22PLoS+One%22%5BJournal%5D)">Adipose-derived cells improve left ventricular diastolic function and increase microvascular perfusion in advanced age.</a> PLoS One. 13 (8), e0202934(2018).</li>
<li>Pan, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Late+recovery+of+coronary+flow+reserve+in+patients+successfully+treated+with+a+percutaneous+procedure%5BTitle%5D)+AND+%22Revista+Espa%C3%B1ola+de+Cardiolog%C3%ADa%22%5BJournal%5D)">Late recovery of coronary flow reserve in patients successfully treated with a percutaneous procedure.</a> Revista Española de Cardiología. 56 (5), 459-464 (2003).</li>
<li>Samim, A., Nugent, L., Mehta, P. K., Shufelt, C., Bairey Merz, C. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Treatment+of+angina+and+microvascular+coronary+dysfunction%5BTitle%5D)+AND+%22Current+treatment+options+in+cardiovascular+medicine%22%5BJournal%5D)">Treatment of angina and microvascular coronary dysfunction.</a> Current treatment options in cardiovascular medicine. 12 (4), 355-364 (2010).</li>
<li><a target="_blank" href="http://scholar.google.com/scholar?hl=en&safe=off&q=%22Guide+for+the+Care+and+Use+of+Laboratory+Animals%22">Guide for the Care and Use of Laboratory Animals</a>. , 8th edition, The National Academies Collection: Reports funded by National Institutes of Health (2011).</li>
<li>Ciuffreda, M. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Rat+experimental+model+of+myocardial+ischemia%2Freperfusion+injury%3A+an+ethical+approach+to+set+up+the+analgesic+management+of+acute+post-surgical+pain%5BTitle%5D)+AND+%22PloS+one%22%5BJournal%5D)">Rat experimental model of myocardial ischemia/reperfusion injury: an ethical approach to set up the analgesic management of acute post-surgical pain.</a> PloS one. 9 (4), e95913-e95913 (2014).</li>
<li>van de Hoef, T. P., Siebes, M., Spaan, J. A. E., Piek, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Fundamentals+in+clinical+coronary+physiology%3A+why+coronary+flow+is+more+important+than+coronary+pressure%5BTitle%5D)+AND+%22European+Heart+Journal%22%5BJournal%5D)">Fundamentals in clinical coronary physiology: why coronary flow is more important than coronary pressure.</a> European Heart Journal. 36 (47), 3312-3319 (2015).</li>
<li>Naya, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Preserved+coronary+flow+reserve+effectively+excludes+high-risk+coronary+artery+disease+on+angiography%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+nuclear+medicine+%3A+official+publication%2C+Society+of+Nuclear+Medicine%22%5BJournal%5D)">Preserved coronary flow reserve effectively excludes high-risk coronary artery disease on angiography.</a> Journal of nuclear medicine : official publication, Society of Nuclear Medicine. 55 (2), 248-255 (2014).</li>
<li>Cortigiani, L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Diagnostic+and+prognostic+value+of+Doppler+echocardiographic+coronary+flow+reserve+in+the+left+anterior+descending+artery%5BTitle%5D)+AND+%22Heart+%28British+Cardiac+Society%29%22%5BJournal%5D)">Diagnostic and prognostic value of Doppler echocardiographic coronary flow reserve in the left anterior descending artery.</a> Heart (British Cardiac Society). 97 (21), 1758(2011).</li>
<li>Kawata, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Prognostic+value+of+coronary+flow+reserve+assessed+by+transthoracic+Doppler+echocardiography+on+long-term+outcome+in+asymptomatic+patients+with+type+2+diabetes+without+overt+coronary+artery+disease%5BTitle%5D)+AND+%22Cardiovascular+diabetology%22%5BJournal%5D)">Prognostic value of coronary flow reserve assessed by transthoracic Doppler echocardiography on long-term outcome in asymptomatic patients with type 2 diabetes without overt coronary artery disease.</a> Cardiovascular diabetology. 12, 121-121 (2013).</li>
</ol>

Les auteurs n'ont rien à révéler

Les résultats principaux de la présente étude sont que l'IR augmente la vitesse de l'artère coronaire laLaD au repos et altère le CFR, même en l'absence de toute sténose angiographique résiduelle.
Comprendre la physiologie coronaire est une partie essentielle de la prise de décision clinique pour les cardiologues pour traiter la maladie coronarienne. Le CFR est l'un des paramètres fonctionnels importants dans la compréhension de la pathophysiologie de la microcirculation coronaire<sup class="x...

La réperfusion d'ischémie myocardique (IR) est une condition où l'approvisionnement en sang est limité au coeur suivi de la restauration de la perfusion et de la réoxygénation simultanée1. L'occlusion des artères coronaires peut être provoquée par une embolie ou une rupture de plaque de cholestérol, qui a comme conséquence un déséquilibre grave de l'offre métabolique et de la demande, causant l'hypoxie de tissu. Le sauvetage du myocarde compromis, l'amélioration de la fonction ventriculaire gauche, et l'amélioration de la survie chez les patients atteints d'infarctus aigu du myocarde ont été observés par la thérapie de reperfusion. Cependant, après recanalisation de l'artère coronaire, des anomalies fonctionnelles de petits vaisseaux coronaires peuvent se produire2,3,4,5. Une proportion significative de patients, peut-être jusqu'à 40%, ne regagnent pas la perfusion microvasculaire et myocardique en dépit de la restauration du flux coronaire. La visualisation et l'évaluation de la microvasculature coronaire peuvent être difficiles in vivo, mais il existe un certain nombre de techniques invasives et non invasives qui peuvent être utilisées pour évaluer les paramètres directement en fonction de la fonction microvasculaire coronaire6 ,7. En outre, la fonction endothéliale peut être évaluée au niveau de la circulation coronaire par l'intermédiaire du CFR5.
L'échocardiographie transthoracique de Doppler est un outil non invasif qui nous permet d'étudier la vitesse du débit des artères coronaires et le CFR5. CFR représente le rapport du flux sanguin coronaire maximal au flux sanguin coronaire au repos8. Pendant le défi de stress, un coeur normal augmente le flux sanguin coronaire jusqu'à quatre fois au-dessus de la valeur de repos. Le risque cardiovasculaire augmente lorsque le CFR est diminué9. Ishihara et autres ont montré que le CFR a été sévèrement altéré immédiatement après l'angioplastie coronaire5. En l'absence de sténose d'artère coronaire, CFR diminue pendant le dysfonctionnement microvasculaire coronaire et est présent dans environ la moitié des patients présentant la maladie stable de l'artère coronaire10.
L'objectif global de cette méthode est la visualisation non invasive de la fonction antérieure gauche d'artère coronaire descendante (LAD) chez les rats par l'intermédiaire de l'échocardiographie, qui peut être employée pour calculer CFR. Ceci offre un outil d'évaluation important pour diagnostiquer le dysfonctionnement microvasculaire et évaluer les traitements thérapeutiques potentiels.

<table><tbody><tr><td>Seringue 10 mL</td><td>Seringue BD</td><td>302995</td><td></td></tr><tr><td>250S 13&ndash ; Sonde linéaire 24 MHz</td><td>FUJIFILM VisualSonics Inc</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Chlorhydrate de dobutamine</td><td>Sigma</td><td>D0676-10mg</td><td></td></tr><tr><td>Isoflurane</td><td>RRC</td><td>27376</td><td></td></tr><tr><td>Legato 100 Pompe à seringue</td><td>KD Scientific</td><td>788100</td><td></td></tr><tr><td>Vevo 3100</td><td>FUJIFILM VisualSonics Inc</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Kit de perfusion à ailettes, 27G x 1/2",</td><td>Medline.com</td><td></td><td></td>TMOSV27ELZ</tr></tbody></table>

Évaluation de la réserve de flux coronaire après la réperfusion d'ischémie myocardique chez les rats

Evaluation of Coronary Flow Reserve After Myocardial Ischemia Reperfusion in Rats

La maladie coronarienne est la principale cause de décès dans le monde. Après un infarctus aigu du myocarde, l'intervention myocardique précoce et réussie par recanalisation de l'artère coronaire est la stratégie la plus efficace pour réduire la taille du myocarde ischémique. La microvasculature coronaire ne peut pas être visualisée et image in vivo, mais il existe plusieurs techniques invasives et non invasives qui peuvent être utilisées pour évaluer les paramètres qui dépendent directement de la fonction microvasculaire coronaire. La fonction endothéliale après la réperfusion d'ischémie peut être évaluée aussi au niveau de la circulation coronaire par l'intermédiaire de la réserve de flux coronaire (CFR). Dans cette étude, la vitesse maximale des artères coronaires de descente antérieure gauche (LAD) a été mesurée chez les rats in vivo par l'intermédiaire de l'échocardiographie transthoracique de Doppler pendant le repos et le défi de stress (induit par Dobutamine). Un cœur normal peut augmenter son flux sanguin coronaire jusqu'à quatre fois au-dessus des valeurs de repos pendant l'induction de stress. Après la réperfusion d'ischémie, nous avons trouvé un CFR sensiblement diminué, qui peut être employé comme marqueur du dysfonctionnement microvasculaire coronaire. CFR a ouvert une fenêtre sur l'importance du dysfonctionnement microvasculaire et a été montré pour prévoir le risque cardio-vasculaire indépendamment de si la maladie obstructive grave est présente.

Pour cette étude, nous avons utilisé 12 femelles Fisher 344 rats. Nous avons effectué un essai d'effort avec la Dobutamine et mesuré la vitesse coronaire d'artère de LAD avant et 72 heures après la chirurgie d'IR. Avant la chirurgie infrarouge, la vitesse de l'artère coronaire au repos de la LAD a été mesurée à 423 à 59 mm/s, ce qui a été augmenté après l'infusion de dobutamine (1005 à 77 mm/s) (Figure 3A). Après 72 h de réperfusion d'ischémie, la vitesse de ...

La réserve de flux coronaire (CFR), est définie comme le rapport du flux sanguin coronaire maximal au flux sanguin coronaire au repos. Nous présentons un protocole pour évaluer le CFR chez les rats par ultrason, qui offre la possibilité de prévoir des facteurs de risque cardio-vasculaires en l'absence de la maladie coronarienne obstructive.

Coronary artery disease is the leading cause of death worldwide. After an acute myocardial infarction, early and successful myocardial intervention via ...

L’objectif global de cette méthode est la visualisation de la fonction coronaire descendante antérieure gauche chez les rats utilisant l’échocardiographie pour calculer la réserve coronaire d’écoulement. Cette méthode offre un outil d’évaluation important pour un diagnostic de dysfonctionnement microvasculaire dans les cœurs maladie et pour l’évaluation des traitements potentiels tout au long de l’étude. Bien que la thérapie de reperfusion ait été montrée pour sauver le myocarde compromis et pour améliorer la fonction ventriculaire gauche, des anomalies fonctionnelles des petits vaisseaux coronaires peuvent se produire après recanalisation de l’artère coronaire.Cette méthode peut fournir un aperçu de la microcirculation coronaire des rats, ainsi que dans d’autres modèles, y compris l’infarctus du myocarde, et la surcharge en volume de pression du ventricule gauche. Avant l’imagerie par ultrasons de chirurgie de reperfusion de pré-ischémie, confirmer un manque de réponse au pincement d’onteil dans un rat anesthésié de Fischer 344. Rasez les cheveux de la poitrine.Appliquez de l’onguent sur les yeux de l’animal et placez l’animal en position supine sur une plate-forme de réchauffement intégrée de 37 à 38 degrés Celsius. Connectez la sonde linéaire de 13 à 24 mégahertz à la machine à ultrasons. Réglez l’application prédéfinir au réglage de l’imagerie cardiaque et utilisez le système ferroviaire pour positionner la sonde afin d’obtenir la vue parasternale à axe court.Utilisez le micromanipulateur de l’axe XY pour déplacer la sonde dans la direction rostrale pour localiser l’artère pulmonaire. Déplacez la sonde, rendant le ventricule gauche plus facilement visible. Une fois que l’image du mode B a été capturée et cine stockée, cliquez sur la couleur Doppler et visualisez l’artère coronaire dans l’axe court.La couleur rouge, observée en temps réel, indique la direction du flux. Après avoir visualisé l’artère coronaire descendante antérieure inférieure en mode Doppler couleur, changer le mode à l’onde d’impulsion et de rechercher la présence d’une ligne d’indicateur jaune sur l’artère coronaire. Placez la ligne jaune d’onde d’impulsion au milieu de l’artère coronaire, en prenant soin que l’angle est parallèle à la direction du flux et utilisez Cine Store pour capturer la vitesse du flux coronaire descendant antérieur gauche au repos et le diastole de crête des formes d’onde.Après avoir obtenu la vitesse de descente antérieure antérieure au repos, placez une petite bande de gaze autour de la base de la queue et utilisez des hémostats pour saisir et tordre le garrot pour appliquer une pression, ce qui provoque l’élargissement de la veine. Placez soigneusement une aiguille papillon infusion de 25 jauges attachée à une seringue de 10 millilitres chargée de dobutamine dans la veine de la queue dilatée et stabilisez l’aiguille avec de la colle et un morceau de ruban chirurgical. Lorsque la ligne de perfusion a été fixée, retirer les hémostats et le garrot pour récupérer le débit et placer la seringue dans une pompe à perfusion réglée pour injecter 20 microgrammes par kilogramme par minute.Pendant l’infusion, surveillez soigneusement le pic antérieur gauche d’artère descendante et la fréquence cardiaque, enregistrant périodiquement les pics antérieurs antérieurs d’onde d’impulsion d’artère descendante dans le mode de Doppler dans les conditions d’effort dobutamine-induites. Après que les pics antérieurs d’artère coronaire descendante et la fréquence cardiaque ont plafonné pendant le défi, arrêtez l’infusion, enlevez l’ensemble d’infusion de veine de queue, et enlevez l’animal de la plate-forme. Ensuite, utilisez l’outil de vitesse de pointe pour obtenir les vitesses diastoliques maximales à partir des images et calculer l’indice de réserve de débit coronaire comme le rapport de l’artère descendante antérieure gauche stress pic vitesse diastolique de débit à la gauche au repos avant la vitesse d’écoulement diastolique crête artérielle descendante.À l’aide d’une source de lumière à fibres optiques, intuber le rat à l’aide d’un cathéter IV de calibre 18 et se connecter au cathéter à un ventilateur. Ensuite, utilisez un 8-0 suture monofilament pour ligate l’artère descendante antérieure gauche par une ouverture de 15 millimètres au cinquième espace intercostal avec un noeud uni pendant 30 minutes. À la fin de la période d’ischémie, confirmer visuellement l’ischémie par décoloration de la surface du cœur et libérer la ligature.La reperfusion peut être vérifiée par le rougissant de la zone précédemment décolorée du muscle cardiaque. 72 heures après la chirurgie, mesurer le débit coronaire et la réserve de débit coronaire tel que démontré, et comparer les mesures à celles obtenues avant la blessure. Dans cette expérience représentative, avant la chirurgie de reperfusion d’ischémie, la vitesse inférieure antérieure de l’artère coronaire au repos a été mesurée comme approximativement 423 millimètres par seconde à plus du double de la vitesse après infusion de dobutamine.72 heures après la reperfusion d’ischémie, la vitesse inférieure antérieure de l’artère coronaire au repos était significativement plus élevée par rapport à la vitesse de l’artère coronaire descendante antérieure au repos avant la chirurgie. La réponse de stress à un essai de dobutamine après la blessure a été sensiblement réduite comparée à la réponse avant que la chirurgie réponde. La réserve de débit coronaire est calculée comme le rapport entre la vitesse de débit maximale pendant le stress et la vitesse d’écoulement au repos et était d’environ 2,1 chez les jeunes rats avant la chirurgie, mais considérablement réduite 72 heures après la blessure.En outre, il n’y avait aucun changement significatif dans la fonction systolique du ventricule gauche 72 heures après la blessure. Après son développement, cette technique permettra aux chercheurs d’explorer et d’utiliser l’imagerie ultrasonique des artères coronaires dans de petits modèles animaux qui imitent avec précision les maladies humaines. Après avoir regardé cette vidéo, vous devriez avoir une très bonne compréhension de la façon de mesurer le flux sanguin coronaire et d’évaluer la microcirculation coronaire dans un modèle de petite maladie cardiaque animale.

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Le modèle de rat d'infarctus aigu du myocarde (IAM) est utile d'étudier la conséquence d'un MI sur la fonction physiopathologiques et physiologiques cardiaque.

Infarctus aigu du myocarde chez le rat

Ce protocole décrit le modèle d'infarctus du myocarde (MI) à l'aide d'un porc de 90 min à thorax fermé ballonnet coronarien occlusion de l'artère descendante antérieure gauche (LAD), suivie d'une reperfusion. En outre, le protocole pour plusieurs paramètres de résultats, tels que la fonction cardiaque, hémodynamique, résistance microvasculaire, et la taille de l'infarctus, sont également présentés.

Infarctus du myocarde et d&#39;évaluation fonctionnelle de résultats chez le porc

La réserve de débit coronaire (CFR) est utile pour l’évaluation de la demande myocardique en oxygène et l’évaluation du risque cardiovasculaire. Cette étude établit une méthode d’échocardiographie Doppler transthoracique (TTDE) étape par étape pour le suivi longitudinal des changements de CFR, tels que mesurés à partir de l’artère coronaire chez la souris, sous la surcharge de pression expérimentale de l’anneau aortique.

Évaluation Basé échographie de l&#39;artère coronaire de débit et de Flow Reserve coronaire Utilisation de la surcharge de pression modèle chez la souris

Le cœur isolé du rat est un modèle durable de lésion d’ischémie reperfusionnelle. Ici, nous décrivons le processus de prélèvement du cœur battant d’un rat via la canulation aortique in situ, la perfusion de Langendorff du cœur, la lésion d’ischémie-reperfusion simulée et la coloration de l’infarctus pour confirmer l’étendue de l’agression ischémique.

Induction et de l&#39;évaluation de l&#39;ischémie-reperfusion dans coeurs de rat Langendorff perfusés

Le modèle d’ischémie-reperfusion myocardique du cœur de rat est amélioré en utilisant un rétracteur auto-fabriqué, un tube de polychlorure de vinyle et une méthode de nouage unique. L’électrocardiogramme, le chlorure de triphényltétrazolium et la coloration histologique, ainsi que les résultats de l’analyse de la survie en pourcentage ont montré que le groupe modèle amélioré a des taux de réussite et de survie plus élevés que le groupe modèle déjà existant.

Modèle de rongeur amélioré de l’ischémie myocardique et de la lésion de reperfusion

Nous présentons ici un protocole axé sur le contrôle de la qualité de la ligature de l’artère coronaire antérieure descendante gauche en modifiant techniquement la procédure traditionnelle chez le rat pour la recherche sur l’ischémie-reperfusion myocardique aiguë.

Ligature de l’artère coronaire antérieure descendante gauche pour la recherche sur l’ischémie-reperfusion : amélioration du modèle par des modifications techniques et le contrôle de la qualité

La présente étude démontre un modèle animal hautement reproductible d’ischémie myocardique régionale aiguë et de lésion de reperfusion chez le lapin en utilisant une mini-thoracotomie gauche pour les cas de survie ou une sternotomie médiane pour les cas de non-survie.

Modèle d’ischémie et de lésion de reperfusion chez le lapin

Le présent protocole décrit une vue parasternale longitudinale modifiée pour une localisation rapide et précise de l’artère descendante antérieure gauche. Cette approche se veut plus simple et plus conviviale tout en facilitant l’examen des changements dynamiques de la réserve de débit coronaire suite à une ischémie-reperfusion myocardique chez la souris.

Évaluations dynamiques de la réserve de débit coronaire après une reperfusion d’ischémie myocardique chez la souris

Un traumatisme chirurgical induit une réponse inflammatoire. Les cytokines et les ligands endogènes sont connus pour moduler la taille infarctus du myocarde après une ischémie et la reperfusion. Nous présentons une version modifiée à thorax fermé modèle murin d'ischémie et la reperfusion en utilisant les pondérations suspendus pour minimiser les effets de la thoracotomie.

Un murin à thorax fermé Modèle d&#39;ischémie myocardique et la reperfusion

Nous introduisons une méthode chirurgicale pour induire expérimental d'ischémie / reperfusion (I / R) des blessures pour simuler un infarctus du myocarde (IM) dans les modèles de souris qui permet une plus grande clarté dans le positionnement de la ligature sur l'artère interventriculaire antérieure gauche (LAD) d'augmenter la reproductibilité d'expériences MI chez la souris.

Un modèle murin d&#39;ischémie myocardique-reperfusion par ligature de l&#39;artère interventriculaire antérieure

Découvrez une méthode d'échocardiographie Doppler pour mesurer la réserve de flux coronaire chez le rat après ischémie-reperfusion. Cette technique permet d'évaluer la fonction microvasculaire cardiaque et de tester des interventions thérapeutiques.

Évaluation de la réserve de flux coronaire après la réperfusion d'ischémie myocardique chez les rats

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