Induction de l'échec ventriculaire droit par constriction pulmonaire d'artère et évaluation de la fonction ventriculaire droite chez les souris

Cette méthode fournit une technique utile pour étudier les mécanismes de l’échec ventriculaire droit. Les principaux avantages de cette technique sont de gagner du temps et d’augmenter le taux de réussite de la chirurgie. Cette technique peut nous aider à imiter l’hypertrophie cardiaque droite et l’échec chez l’homme par constriction de l’artère pulmonaire pour créer une surcharge de pression pulmonate.

Cette méthode peut être appliquée à la technique transversale de constriction aortique et peut fournir un aperçu des complications post-transplantation cardiaque, et des études congénitales de maladie cardiaque. La procédure sera démontrée par Xiaoxia Huang, technicienne de mon laboratoire. Avant de commencer l’intervention, passez un morceau de suture de soie tressée 6-0 à travers une aiguille de calibre 25 démontée à partir d’une seringue d’un millilitre.

Utilisez des forceps hémostatiques pour plier l’aiguille à 90 degrés. Pliez ensuite une aiguille de calibre 22 à 120 degrés. Après avoir confirmé un manque de réponse au pincement des pieds, placez une souris anesthésiée dans la position supine sur un coussin chauffant de 37 degrés Celsius et fixez les incisives avec une suture.

Fixer les membres avec du ruban adhésif, et utiliser de la crème depilatory pour enlever les cheveux du cou au processus xiphoïde. Désinfectez la peau exposée avec de l’iode séquentiel et des lingettes à 75 % d’éthanol, et utilisez des pinces pointues pour extraire légèrement la langue. Élever la mandibule avec une spatule sur mesure pour exposer la glotte, et utiliser une source de lumière froide pour diriger l’insertion attentive d’une canule de trachée sur mesure à travers les glottes.

Ajustez les paramètres du mini ventilateur et réglez la fréquence respiratoire à 150 respirations par minute, et un volume de marée de 300 microlitres. Connectez ensuite le tube et le ventilateur pour confirmer que la canule a été correctement insérée avant de fixer la canule avec du ruban adhésif. Pour ouvrir la poitrine, faire une incision cutanée d’environ 10 millimètres parallèle à la deuxième côte.

Utilisez des ciseaux et des pinces à coude pour séparer les muscles pectoraux majeurs et mineurs au-dessus du deuxième espace intercostal. Comptez les côtes de l’angle sternal pour identifier le deuxième espace intercostal et utilisez des ciseaux pour ouvrir cet espace. Séparez ensuite brutalement le parenchyme et le thymus jusqu’à ce que le tronc pulmonaire soit visible.

Pour resserrer l’artère pulmonaire, utilisez les pinces à coude pour séparer émoussement le tronc pulmonaire et l’aorte ascendante. Utilisez l’aiguille du loquet à 90 degrés pour passer la suture à travers le tissu conjonctif entre le tronc pulmonaire et l’aorte ascendante. Placez l’aiguille de rembourrage à 120 degrés sur le tronc pulmonaire.

Utilisez la suture de soie tressée 6-0 pour ligate l’aiguille de rembourrage au tronc pulmonaire, en enlevant l’aiguille de rembourrage immédiatement après le remplissage du cône pulmonaire est observé. Couper les deux extrémités des sutures et continuer à observer le remplissage du conus pulmonaire pour évaluer si une constriction est présente. Ensuite, évaluez à nouveau le réflexe de pédale de l’animal pour assurer le succès de la ligature et fermez la poitrine et la peau avec une suture en nylon 5-0.

Au moins trois jours après la chirurgie, appliquer du gel à ultrasons sur la poitrine de l’animal resserré de l’artère pulmonaire. Placez une sonde de 30 mégahertz sur la poitrine à une position dans le sens inverse des aiguilles d’une montre de 30 degrés par rapport à la ligne parasternale gauche, tout en orientant l’encoche dans la direction caudale. Réglez les axes Y et X sous le mode B jusqu’à ce que la valve mitrale, l’aorte et la chambre ventricule gauche soient clairement visibles.

Faites pivoter la sonde de 30 à 40 degrés sur son axe Y vers la poitrine. Réglementez les axes Y et X jusqu’à ce que le cône pulmonaire soit clairement visible et placez le curseur à l’extrémité des folioles pulmonaires pour mesurer la vitesse de débit maximale. Sélectionnez la couleur et pw et placez la ligne pointillée d’onde pulsée parallèle à la direction du flux sanguin.

Ajustez le côté gauche de la garniture de sorte qu’il soit plus haut que le côté droit, gardant la sonde orientée 30 degrés à l’horizon le long de la ligne axillaire intérieure droite, avec l’encoche pointue dans la direction caudale. Réglementez les axes X et Y jusqu’à ce que le ventricule droit soit clairement visible. Cliquez ensuite sur M-mode deux fois pour afficher la ligne d’indicateur.

Huit semaines après la chirurgie, intuber la souris comme démontré, et faire une incision bilatérale de 1,5 centimètre au-dessous du processus xiphoïde par le diaphragme pour ouvrir la cavité thoracique. Couper à travers les côtes pour exposer le cœur, et utiliser une aiguille de calibre 23 pour pénétrer dans la paroi libre ventricule droite. Appuyez doucement sur le point de perforation à l’aide d’un coton-tige pour arrêter tout saignement, et utilisez la pointe du cathéter pour percer le ventricule à travers la plaie.

Lorsque la courbe est stable, réglez la pointe du cathéter vers le tractus de sortie du ventricule droit. Cliquez sur sélectionnez et analysez pour enregistrer la pression artérielle systolique et la pression diastolique du ventricule droit, le taux maximal d’élévation, la constante exponentielle du temps de relaxation et la fréquence cardiaque pendant 10 minutes. Ensuite, transférez le cathéter du cœur dans un récipient de solution saline.

Comparé au groupe de Sham, une vitesse de pointe plus élevée, un plus grand gradient de pression, et une plus grande épaisseur droite de mur de ventricule sont obtenus de la vue parasternal de long axe à huit semaines après chirurgie dans le groupe pulmonaire de constriction d’artère. En outre, la fonction systolique du ventricule droit est sensiblement réduite dans le groupe pulmonaire de constriction d’artère, comparé au groupe de Sham, huit semaines après la chirurgie. Le groupe de constriction pulmonaire d’artère a une pression droite plus élevée de ventricule dans le systole et le diastole, et l’indice de contractilité est réduit comparé à celui du groupe de Sham.

Le ventricule droit Tau et le taux maximal d’élévation sont également plus grands dans le groupe de constriction d’artère pulmonaire que cela dans le groupe de Sham. Démontrant que le dysfonctionnement droit de ventricule est induit chez les souris après huit semaines de baguage pulmonaire d’artère. L’essai hémodynamique invasif dans le ventricule droit, indique que la fréquence cardiaque reste stable avant et après la surveillance de cathéter.

Par rapport au groupe Sham, les dimensions du ventricule droit sont considérablement agrandies, et le poids du ventricule droit est plus élevé. En outre, l’examen histologique montre que la fibrose cardiaque dans la zone couverte par les cardiomyocytes sont plus grandes dans le groupe de constriction d’artère pulmonaire que dans le groupe de Sham. La partie la plus importante de la procédure est de s’assurer que l’artère pulmonaire est séparée correctement et complètement.

Pour éviter une séparation incorrecte, le point de séparation doit être près de la branche de l’artère pulmonaire, où le tissu conjonctif entre les artères sera plus lâche. Avec cette méthode, nous avons fourni une approche plus commode et efficace pour induire l’hypertrophie ventriculaire droite. En général, la procédure chirurgicale et les approches d’évaluation sont très sûres.