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DOI: 10.3791/59679-v
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Nous décrivons une cellule mononucléaire périphérique humaine de sang (PBMC) — modèle humanisé basé de souris de xénogreffe pour la recherche translationnelle d'immuno-oncologie. Ce protocole pourrait servir de ligne directrice générale pour établir et caractériser des modèles similaires pour l'évaluation de la thérapie I-O.
Notre protocole peut servir de ligne directrice générale pour l’établissement de modèles muraux reconstitués avec pbmc humain et tumeurs pour la recherche en immuno-oncologie. Ces procédures fournissent une approche rentable et hautement reproductible pour reconstituer partiellement l’immunité humaine chez les souris tumorales humaines par le biais de sous-cutanées et le mélange de PBMC humain avec des xénogreffes cancéreuses. La démonstration des procédures avec moi sera Xinxin Cui, Yanjuan Zhang, Huichen Bai et Xiaolong Yang, nous a envoyé du département de pharmacologie.
Pour l’épuisement des cellules myéloïdes intra péritonéally livrer 100mg par kilogramme de cyclophosphamide et livrer oralement 125mg par kilogramme de disulfiram à six à huit semaines nod / SCID souris femelles une fois par jour pendant deux jours. 24 heures après la deuxième dose de cyclophosphamide et de disulfiram, resuspendez cinq fois 10 des six PBMC humains fraîchement isolés et 2,5 fois 10 des six cellules cellulaires tumorales humaines et 200 microlitres de PBS plus 50% de métrogel par animal et injectez tout le volume sous-cutanément dans le flanc droit de chaque animal expérimental. Mesurez et enregistrez le volume primaire de tumeur deux fois par semaine pendant quatre à six semaines.
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