Name: Surveillance en temps réel de la migration cellulaire des gliomes humains sur les co-cultures dAxon-Oligodendrocyte de Ganglion de racine dorsal (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2019-12-13T12:00:00.000+00:00
Duration: 6 min 51 s
Description: Apprenez à étudier la migration des cellules de gliome humain en temps réel grâce à un système de co-culture ex vivo avec des axones de ganglion de racine dorsale. Cette méthode permet d'analyser les interactions tumorales et de tester l'efficacité de nouveaux traitements.

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Ce travail a été soutenu par des fonds internes du Département de neurochirurgie de l'Université Brown à N.T.

<ol><li>Stupp, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Radiotherapy+plus+concomitant+and+adjuvant+temozolomide+for+glioblastoma%5BTitle%5D)+AND+%22New+England+Journal+of+Medicine%22%5BJournal%5D)">Radiotherapy plus concomitant and adjuvant temozolomide for glioblastoma.</a> New England Journal of Medicine. 352 (10), 987-996 (2005).</li>
<li>Stupp, R., Weber, D. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+role+of+radio-+and+chemotherapy+in+glioblastoma%5BTitle%5D)+AND+%22Onkologie%22%5BJournal%5D)">The role of radio- and chemotherapy in glioblastoma.</a> Onkologie. 28 (6-7), 315-317 (2005).</li>
<li>Wick, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Pathway+inhibition%3A+emerging+molecular+targets+for+treating+glioblastoma%5BTitle%5D)+AND+%22Neuro-Oncology%22%5BJournal%5D)">Pathway inhibition: emerging molecular targets for treating glioblastoma.</a> Neuro-Oncology. 13 (6), 566-579 (2011).</li>
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<li>Lee, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Tumor+stem+cells+derived+from+glioblastomas+cultured+in+bFGF+and+EGF+more+closely+mirror+the+phenotype+and+genotype+of+primary+tumors+than+do+serum-cultured+cell+lines%5BTitle%5D)+AND+%22Cancer+Cell%22%5BJournal%5D)">Tumor stem cells derived from glioblastomas cultured in bFGF and EGF more closely mirror the phenotype and genotype of primary tumors than do serum-cultured cell lines.</a> Cancer Cell. 9 (5), 391-403 (2006).</li>
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<li>Sanai, N., Alvarez-Buylla, A., Berger, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Neural+stem+cells+and+the+origin+of+gliomas%5BTitle%5D)+AND+%22New+England+Journal+of+Medicine%22%5BJournal%5D)">Neural stem cells and the origin of gliomas.</a> New England Journal of Medicine. 353 (8), 811-822 (2005).</li>
<li>Chen, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+restricted+cell+population+propagates+glioblastoma+growth+after+chemotherapy%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">A restricted cell population propagates glioblastoma growth after chemotherapy.</a> Nature. 488 (7412), 522-526 (2012).</li>
<li>Bao, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Glioma+stem+cells+promote+radioresistance+by+preferential+activation+of+the+DNA+damage+response%5BTitle%5D)+AND+%22Nature%22%5BJournal%5D)">Glioma stem cells promote radioresistance by preferential activation of the DNA damage response.</a> Nature. 444 (7120), 756-760 (2006).</li>
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<li>Wood, P. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Separation+of+functional+Schwann+cells+and+neurons+from+normal+peripheral+nerve+tissue%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Research%22%5BJournal%5D)">Separation of functional Schwann cells and neurons from normal peripheral nerve tissue.</a> Brain Research. 115 (3), 361-375 (1976).</li>
<li>Rambukkana, A., Zanazzi, G., Tapinos, N., Salzer, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Contact-dependent+demyelination+by+Mycobacterium+leprae+in+the+absence+of+immune+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Science%22%5BJournal%5D)">Contact-dependent demyelination by Mycobacterium leprae in the absence of immune cells.</a> Science. 296 (5569), 927-931 (2002).</li>
<li>Tapinos, N., Ohnishi, M., Rambukkana, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((ErbB2+receptor+tyrosine+kinase+signaling+mediates+early+demyelination+induced+by+leprosy+bacilli%5BTitle%5D)+AND+%22Nature+Medicine%22%5BJournal%5D)">ErbB2 receptor tyrosine kinase signaling mediates early demyelination induced by leprosy bacilli.</a> Nature Medicine. 12 (8), 961-966 (2006).</li>
<li>Chan, J. R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((NGF+controls+axonal+receptivity+to+myelination+by+Schwann+cells+or+oligodendrocytes%5BTitle%5D)+AND+%22Neuron%22%5BJournal%5D)">NGF controls axonal receptivity to myelination by Schwann cells or oligodendrocytes.</a> Neuron. 43 (2), 183-191 (2004).</li>
<li>Dugas, J. C., Tai, Y. C., Speed, T. P., Ngai, J., Barres, B. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Functional+genomic+analysis+of+oligodendrocyte+differentiation%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Neuroscience%22%5BJournal%5D)">Functional genomic analysis of oligodendrocyte differentiation.</a> Journal of Neuroscience. 26 (43), 10967-10983 (2006).</li>
<li>Ruffini, F., Arbour, N., Blain, M., Olivier, A., Antel, J. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Distinctive+properties+of+human+adult+brain-derived+myelin+progenitor+cells%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Pathology%22%5BJournal%5D)">Distinctive properties of human adult brain-derived myelin progenitor cells.</a> American Journal of Pathology. 165 (6), 2167-2175 (2004).</li>
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<li>Merz, F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Organotypic+slice+cultures+of+human+glioblastoma+reveal+different+susceptibilities+to+treatments%5BTitle%5D)+AND+%22Neuro-Oncology%22%5BJournal%5D)">Organotypic slice cultures of human glioblastoma reveal different susceptibilities to treatments.</a> Neuro-Oncology. 15 (6), 670-681 (2013).</li>
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<li>Aubert, M., Badoual, M., Christov, C., Grammaticos, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+model+for+glioma+cell+migration+on+collagen+and+astrocytes%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+the+Royal+Society+Interface%22%5BJournal%5D)">A model for glioma cell migration on collagen and astrocytes.</a> Journal of the Royal Society Interface. 5 (18), 75-83 (2008).</li>
<li>Jia, W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+three-dimensional+collagen+scaffolds+on+the+expression+profiles+and+biological+functions+of+glioma+cells%5BTitle%5D)+AND+%22International+Journal+of+Oncology%22%5BJournal%5D)">Effects of three-dimensional collagen scaffolds on the expression profiles and biological functions of glioma cells.</a> International Journal of Oncology. 52 (6), 1787-1800 (2018).</li>
<li>Kaphle, P., Li, Y., Yao, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+mechanical+and+pharmacological+regulation+of+glioblastoma+cell+migration+in+3D+matrices%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cellular+Physiology%22%5BJournal%5D)">The mechanical and pharmacological regulation of glioblastoma cell migration in 3D matrices.</a> Journal of Cellular Physiology. 234 (4), 3948-3960 (2019).</li>
<li>Gritsenko, P., Leenders, W., Friedl, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recapitulating+in+vivo-like+plasticity+of+glioma+cell+invasion+along+blood+vessels+and+in+astrocyte-rich+stroma%5BTitle%5D)+AND+%22Histochemistry+and+Cell+Biology%22%5BJournal%5D)">Recapitulating in vivo-like plasticity of glioma cell invasion along blood vessels and in astrocyte-rich stroma.</a> Histochemistry and Cell Biology. 148 (4), 395-406 (2017).</li>
<li>Gritsenko, P. G., Friedl, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Adaptive+adhesion+systems+mediate+glioma+cell+invasion+in+complex+environments%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Cell+Science%22%5BJournal%5D)">Adaptive adhesion systems mediate glioma cell invasion in complex environments.</a> Journal of Cell Science. 131 (15), (2018).</li>
<li>Kaur, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Cadherin-11%2C+a+marker+of+the+mesenchymal+phenotype%2C+regulates+glioblastoma+cell+migration+and+survival+in+vivo%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+Cancer+Research%22%5BJournal%5D)">Cadherin-11, a marker of the mesenchymal phenotype, regulates glioblastoma cell migration and survival in vivo.</a> Molecular Cancer Research. 10 (3), 293-304 (2012).</li>
<li>Rao, S. S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mimicking+white+matter+tract+topography+using+core-shell+electrospun+nanofibers+to+examine+migration+of+malignant+brain+tumors%5BTitle%5D)+AND+%22Biomaterials%22%5BJournal%5D)">Mimicking white matter tract topography using core-shell electrospun nanofibers to examine migration of malignant brain tumors.</a> Biomaterials. 34 (21), 5181-5190 (2013).</li>
<li>Huang, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Three-dimensional+hydrogel+is+suitable+for+targeted+investigation+of+amoeboid+migration+of+glioma+cells%5BTitle%5D)+AND+%22Molecular+Medicine+Reports%22%5BJournal%5D)">Three-dimensional hydrogel is suitable for targeted investigation of amoeboid migration of glioma cells.</a> Molecular Medicine Reports. 17 (1), 250-256 (2018).</li>
</ol>

Les auteurs n'ont rien à révéler.

Les études de migration pour les hGC peuvent être exécutées en utilisant des systèmes de chambre De Boyden ou des essais de rayures. Cependant, tandis que ces expériences ne donnent aucune information concernant les interactions des cellules de tumeur avec d'autres tissus environnants, le système actuel peut récapituler des interactions de GC avec les fibres myélinisés et non-myélinisés. En outre, pour étudier la formation de tumeur et la migration de point final, les cultures organotypic de tranche du cerveau de rongeur...

Le glioblastome est l'une des tumeurs les plus agressives et mortelles du cerveau humain. La norme actuelle de soins comprend la résection chirurgicale de la tumeur suivie par le rayonnement1 plus l'administration concomitante et adjuvante de temozolomide2. Même avec cette approche multi-thérapeutique, la répétition de tumeur est inévitable3. Cela est dû en partie à la nature migratoire étendue des cellules tumorales, qui envahissent le parenchyme cérébral créant de multiples projections en tant que doigt dans le cerveau4 qui rendent la résection complète peu probable.
Ces dernières années, il est devenu évident que l'agressivité du glioblastome est due, en partie, à la présence d'une population de cellules souches cancéreuses dans la masse tumorale5,6, qui présentent un potentiel migratoire élevé7,8, la résistance à la chimiothérapie et le rayonnement9,10 et la capacité de former des tumeurs secondaires11. Les CGC sont capables de récapituler les tumeurs polyclonales originales lorsqu'elles sont xénogreffes sur des souris nues5.
Malgré la richesse des connaissances sur le contexte génétique des glioblastomes, les études sur la migration des cellules de gliome (GC) sont actuellement entravées par un manque de modèles de migration in vitro ou in vivo efficaces. Notamment, tandis que les interactions cellules-axonales de glioma modulées par des facteurs cellulaires et environnementaux sont une composante fondamentale de l'invasion de gliome, à notre connaissance il n'y a actuellement aucun système expérimental avec la capacité de modéliser ces interactions12,13,14. Pour répondre à cette insuffisance, nous avons développé un système de culture ex vivo des hGCs primaires co-cultivés avec les axon-oligodendrocytes purifiés de DRG qui a comme conséquence l'expression élevée des marqueurs différenciés de tumeur aussi bien que la migration et l'interaction étendues des hGCs avec les fibres myélinies et non myélinies. Cette plate-forme ex vivo, en raison de sa disposition compartimentée, est adaptée pour tester les effets de nouvelles thérapies sur les modèles de migration hGC.,

<table><tbody><tr><td>Plat de culture en suspension de 100 mm</td><td>Corning</td><td>430591</td><td></td></tr><tr><td>2.5S NGF</td><td>ENVIGO</td><td>B.5025</td><td></td></tr><tr><td>Plat de culture en suspension de 60 mm</td><td>Corning</td><td>430589</td><td></td></tr><tr><td>ACK Tampon de lyse</td><td>Thermo Fisher</td><td>A1049201</td><td></td>Solution d’hydroxyde</tr><tr><td>d’ammonium</td><td>Fisher Scientific</td><td>A669-500</td><td>Concentré</td></tr><tr><td>Sans animaux EGF humain recombinant</td><td>Peprotech</td><td>AF-100-15</td><td></td></tr><tr><td>Exempt d’animaux FGF humain recombinant (154 a.a.)</td><td>Peprotech</td><td>AF-100-18B</td><td></td></tr><tr><td>Microbilles anti-A2B5, humain, souris, rat</td><td>Miltenyi Biotec</td><td>130-093-392</td><td></td></tr><tr><td>Antibiotique-antimycosique (100X)</td><td>Thermo Fisher</td><td>15240062</td><td></td></tr><tr><td>AutoMACS Rinsing Solution (PBS, pH 7,2)</td><td>Miltenyi Biotec</td><td>130-091-222</td><td></td></tr><tr><td>B27 Supplément</td><td>Thermo Fisher</td><td>17504044</td><td></td></tr><tr><td>B27 Supplément, moins la vitamine A</td><td>Thermo Fisher</td><td>12587001</td><td></td></tr><tr><td>Plaque bactériologique</td><td>BD Falcon</td><td>351029</td><td></td></tr><tr><td>Biotine</td><td>Sigma</td><td>B4639</td><td></td></tr><tr><td>BSA</td><td>Sigma</td><td>A9418</td><td></td></tr><tr><td>Chambre Campenot</td><td>Tyler Research</td><td>CAMP-10</td><td></td></tr><tr><td>Plat de culture cellulaire</td><td>Corning</td><td>430165</td><td>35mm X 10mm</td></tr><tr><td>Passoire cellulaire</td><td>BD Falcon</td><td>352350</td><td>70 uM,</td></tr><tr><td>Crépine cellulaire</td> en nylon <td>BD Falcon</td><td>352340</td><td>30 uM,</td></tr><tr><td>Collagénase/Dispase</td><td>en nylon Roche</td><td>11097113001</td><td></td></tr><tr><td>Cultrex Rat Collagen I</td><td>Trevigen</td><td>3440-100-01</td><td></td></tr><tr><td>D-Glucose</td><td>Sigma</td><td>G5146</td><td></td></tr><tr><td>DMEM</td><td>Thermo Fisher</td><td>10313021</td><td></td></tr><tr><td>DNase I</td><td>Sigma</td><td>D7291</td><td></td></tr><tr><td>Dow Corning Graisse sous vide</td><td>poussé Fisher Scientific</td><td>14-635-5D</td><td></td></tr><tr><td>Dumont #5 Pince</td><td>Roboz</td><td>RS-5045</td><td></td></tr><tr><td>E16 Enceinte Temporisée Sprague Dawley Rat</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>EBSS</td><td>Sigma</td><td>E7510</td><td></td></tr><tr><td>EGTA</td><td>Sigma</td><td>E3889</td><td></td></tr><tr><td>FBS</td><td>Hyclone</td><td>SH30070.02</td><td></td></tr><tr><td>FUDR</td><td>Sigma</td><td>F0503</td><td></td></tr><tr><td>GlutaMAX Supplément</td><td>Thermo Fisher</td><td>35050061</td><td></td></tr><tr><td>Ham’s F-12 Nutrient Mix</td><td>Thermo Fisher</td><td>11765054</td><td></td></tr><tr><td>HBSS</td><td>Thermo Fisher</td><td>14175095</td><td></td></tr><tr><td>Pince hémostatique</td><td>Roboz</td><td>RS-7035</td><td></td></tr><tr><td>Héparine Sel de sodium, 0,2 % dans PBS</td><td>Stem Cell Technologies</td><td>07980</td><td></td></tr><tr><td>Aiguille hypodermique, 18G</td><td>BD</td><td>511097</td><td></td></tr><tr><td>Insuline-Transférrine-Sélénium G</td><td>Thermo Fisher</td><td>41400045</td><td></td></tr><tr><td>L-Cysteine</td><td>Sigma</td><td>C7477</td><td></td></tr><tr><td>L-Glutamine</td><td>Thermo Fisher</td><td>25030081</td><td></td></tr><tr><td>Leibovitz’s L-15 Medium</td><td>Thermo Fisher</td><td>11415064</td><td></td></tr><tr><td>MACS BSA Solution Mère</td><td>Miltenyi Biotec</td><td>130-091-376</td><td></td></tr><tr><td>MACS MultiStand</td><td>Miltenyi Biotec</td><td>130-042-303</td><td></td></tr><tr><td>MEM</td><td>Thermo Fisher</td><td>1190081</td><td></td></tr><tr><td>Mg2SO4</td><td>Sigma</td><td>M2643</td><td></td></tr><tr><td>Séparateur MiniMACS</td><td>Miltenyi Biotec</td><td>130-042-102</td><td></td></tr><tr><td>MS Colonnes plus tubes</td><td>Miltenyi Biotec</td><td>130-041-301</td><td></td></tr><tr><td>NAC</td><td>Sigma</td><td>A8199</td><td></td></tr><tr><td>NaHCO3</td><td>Sigma</td><td>S5761</td><td></td></tr><tr><td>Neurobasal</td><td>Medium Thermo Fisher</td><td>21103049</td><td></td></tr><tr><td>Neurobasal-A Medium</td><td>Thermo Fisher</td><td>10888022</td><td></td></tr><tr><td>Pince ordinaire</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>P2 Sprague Dawley Rat Pups</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Papain</td><td>Worthington</td><td>LS003126</td><td></td></tr><tr><td>Pénicilline-Streptomycine</td><td>Thermo Fisher</td><td>15140148</td><td></td></tr><tr><td>Pin Rake</td><td>Tyler Research</td><td>CAMP-PR</td><td></td></tr><tr><td>Progestérone</td><td>Sigma</td><td>P8783</td><td></td></tr><tr><td>StemPro Accutase Réactif de dissociation cellulaire</td><td>Thermo Fisher</td><td></td><td></td>A1110501</tr><tr><td>Applicateur de graisse Syrine</td><td>Tyler Research</td><td>CAMP-GLSS</td><td></td></tr><tr><td>Transferrin</td><td>Sigma</td><td>T2036</td><td></td></tr><tr><td>Uridine</td><td>Sigma</td><td>U3003</td><td></td></tr></tbody></table>

surveillance en temps réel de la migration cellulaire des gliomes humains sur les co-cultures d'axon-oligodendrocyte de ganglion de racine dorsal

Real-Time Monitoring of Human Glioma Cell Migration on Dorsal Root Ganglion Axon-Oligodendrocyte Co-Cultures

Le glioblastome est l'un des cancers humains les plus agressifs en raison de l'hétérogénéité cellulaire étendue et des propriétés de migration des hGCs. Afin de mieux comprendre les mécanismes moléculaires sous-jacents à la migration des cellules du gliome, une capacité d'étudier l'interaction entre les hGCs et les axones dans le microenvironnement tumoral est essentielle. Afin de modéliser cette interaction cellulaire, nous avons développé un système de culture mixte composé de hGCs et ganglions de racine dorsal (DRG) axone-oligodendrocyte co-cultures. Les cultures DRG ont été sélectionnées parce qu'elles peuvent être isolées efficacement et peuvent former des projections longues et étendues qui sont idéales pour des études de migration de cette nature. Des oligodendrocytes purifiés de rat ont alors été ajoutés sur les axones purifiés de DRG de rat et induits à myélinéine. Après avoir confirmé la formation de myéline compacte, les hGC ont finalement été ajoutés à la co-culture et leurs interactions avec les axones DRG et les oligodendrocytes ont été surveillés en temps réel à l'aide de la microscopie en time-lapse. Dans ces conditions, les hGC forment des structures agrégées tumorales qui expriment GFAP et Ki67, migrent le long des pistes axonales myélinisés et non myélinisés et interagissent avec ces axones par la formation de pseudopodia. Notre système de co-culture ex vivo peut être utilisé pour identifier de nouveaux mécanismes cellulaires et moléculaires de la migration hGC et pourrait potentiellement être utilisé pour les tests d'efficacité des médicaments in vitro.

Afin d'étudier l'interaction des hGCs avec des axones, nous avons généré des axones DRG purifiés comme précédemment décrit15,16,17,18. Ces axones DRG purifiés ont ensuite été ensedus de hGCs, qui formaient des structures tumorales GFAPMD/Ki67MD intégrées dans le réseau axonal, tandis que les hGC individuels migrent soit en association, soit entre les axones (figure 2). Pour dét...

Ici, nous présentons un système de culture monocouche mixte ex-vivo pour l'étude de la migration des cellules de gliome humain (hGC) en temps réel. Ce modèle permet d'observer les interactions entre les hGC et les axones myélinisés et non myélinisés dans une chambre compartimentée.

Surveillance en temps réel de la migration cellulaire des gliomes humains sur les co-cultures d'Axon-Oligodendrocyte de Ganglion de racine dorsal

Glioblastoma is one of the most aggressive human cancers due to extensive cellular heterogeneity and the migration properties of hGCs. In order to better ...

Ce système de co-culture ex vivo peut être utilisé pour identifier de nouveaux mécanismes cellulaires et moléculaires de la migration cellulaire du gliome humain et pourrait potentiellement être utilisé pour des tests d’efficacité in vitro des médicaments. Le principal avantage de cette technique est la capacité d’étudier les interactions entre les cellules du glioblastome humain et les axones en temps réel. John Zepecki, un étudiant diplômé de mon laboratoire, démontrera la procédure.Pour assembler des plats de culture compartimentés, diluer la solution de bouillon de collagène à 500 microgrammes par millilitre dans de l’eau distillée stérile et bien mélanger. Avec une pipette de transfert stérile, remplir un plat de culture de 35 millimètres avec deux millilitres de la solution de collagène dilué. Inclinez légèrement le plat et retirez la solution en laissant derrière elle un mince film de collagène.Distribuez la solution dans le plat suivant de 35 millimètres. Répétez ce processus, en ajoutant plus de solution de collagène au besoin jusqu’à ce que tous les plats aient été enduits. Pour polymériser le collagène, dans un capot d’écoulement laminaire, les tampons de gaze humide ave

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Dans ce protocole, nous avons décrit une nouvelle méthode pour étudier l'influence de l'hétérogénéité des cellules gliales sur la croissance des axones avec...

Étudier l&#39;influence gliales hétérogénéité cellulaire sur la croissance axonale aide d&#39;une méthode coculture Nouveau

Imagerie laps de temps de culture de tissu en 3D permet d'étudier le comportement migratoire des cellules individuelles en provenance éminence ganglionnaire en réaction à extraire la protéine fractionnée à partir du cortex cérébral.

Comportement migratoire des cellules générées dans les cultures éminence ganglionnaire

Cette étude décrit les procédures de mise en place d'un axone des neurones et roman (astro) glie plate-forme de co-culture. Dans ce système de co-culture, la manipulation de l'interaction directe entre un axone unique (et unique cellule gliale) devient possible, ce qui permet une analyse mécaniste du neurone mutuelle à la signalisation gliales.

Analyse en Imagerie du Neuron à l&#39;interaction Glia dans la plate-forme microfluidique Culture (MCP) à base neuronale et Axon Glia co-culture système

Dans cette vidéo, nous démontrons la procédure de développement d’un modèle d’invasion de cellules cancéreuses périneurales in vitro en co-cultivant des cellules cancéreuses de la racine dorsale de souris et des cellules cancéreuses neurotropes. Le modèle peut être utilisé pour effectuer des tests de cancer, produisant des résultats rapides et reproductibles.

Établissement d’un modèle de co-culture tridimensionnelle de ganglions de la racine dorsale murine et de cellules cancéreuses : un modèle in vitro pour étudier l’invasion des cellules cancéreuses périneurales

Cette vidéo décrit un test de co-culture de cellules de glioblastome sur des neurones à micropattern, qui imitent l’invasion des voies neuronales myélinisées par les cellules souches de type glioblastome lorsqu’elles migrent sur les neurones dans les espaces péritumoraux. Ce test peut aider à analyser les effets des médicaments pharmacologiques qui inhibent la migration des cellules de glioblastome sur les neurones d'un gliome.

Co-culture de cellules de glioblastome sur des neurones à motifs : une technique pour surveiller la migration des cellules de glioblastome sur les neurones de l’hippocampe du rat in vitro

Cette vidéo montre la construction d’un système de culture cellulaire à trois compartiments à l’aide de collagène et de graisse non réactive. Ce système est utilisé pour observer les interactions entre les cellules de gliome et les axones en temps réel.

Préparation de boîtes de culture compartimentées enrobées de collagène pour la culture de cellules neuronales

Cet article vidéo montre l’utilisation du modèle de cellules cancéreuses et ganglions de la racine dorsale (DRG)/cancer dans l’adénocarcinome canalaire pancréatique.

In Vitro Modélisation de Cancerous Neural Invasion: Le ganglion de racine dorsale Modèle

Les modèles existants ex vivo de glioblastome (GBM) ne sont pas optimisés pour une étude physiologiquement pertinente de l'invasion de tumeur humaine. Ici, nous présentons un protocole pour la génération et la maintenance de cultures de tranches organotypiques à partir de tissu GBM humain frais. Une description de la microscopie temporelle et des techniques quantitatives d'analyse de la migration cellulaire est fournie.

Un modèle de culture de coupe organotypique du glioblastome humain pour l&#39;étude de la migration des cellules tumorales et des effets spécifiques des patients contre les médicaments anti-invasifs

Nous décrivons ici les techniques d’imagerie de cellules vivantes pour mesurer quantitativement la migration et l’invasion du glioblastome cerveau tumeur des cellules souches au fil du temps et dans plusieurs conditions de traitement.

Épreuves d’imagerie de cellules vivantes pour étude glioblastome Brain Tumor Stem Cell Migration et Invasion

Ici, nous présentons un test de co-culture facile à utiliser pour analyser la migration du glioblastome (GBM) sur des neurones à motifs. Nous avons développé une macro dans le logiciel FiJi pour une quantification facile de la migration des cellules GBM sur les neurones, et avons observé que les neurones modifient la capacité invasive des cellules GBM.

Co-culture de cellules souches de glioblastome sur des neurones à motifs pour étudier la migration et les interactions cellulaires

Cette étude présente un protocole d’immunocytochimie de cellules 3D vivantes appliqué à une lignée cellulaire de gliome diffus pédiatrique, utile pour étudier en temps réel l’expression des protéines sur la membrane plasmique au cours de processus dynamiques tels que l’invasion et la migration des cellules 3D.

Tests d’immunocytochimie sur cellules 3D vivantes du gliome médian diffus pédiatrique

Apprenez à étudier la migration des cellules de gliome humain en temps réel grâce à un système de co-culture ex vivo avec des axones de ganglion de racine dorsale. Cette méthode permet d'analyser les interactions tumorales et de tester l'efficacité de nouveaux traitements.

Surveillance en temps réel de la migration cellulaire des gliomes humains sur les co-cultures dAxon-Oligodendrocyte de Ganglion de racine dorsal (Vidéo) | JoVE Journal

Surveillance en temps réel de la migration cellulaire des gliomes humains sur les co-cultures d'Axon-Oligodendrocyte de Ganglion de racine dorsal

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