Une technique de lésion mini-invasive pour les muscles intrinsèques à l'odontophore d'Aplysia californica

Le système d’alimentation d’Aplysia a longtemps été utilisé comme un système modèle pour l’étude du contrôle moteur et de la biomécanique du corps mou. Cependant, les muscles profondément à l’intérieur du saisisseur d’alimentation ont été inaccessibles à la manipulation in vivo. Cette chirurgie nous permet d’accéder à ces muscles chez des animaux qui se comportent autrement intacts.

Non seulement cela nous permet d’accéder in vivo pour la première fois, mais la technique implique une incision unique à une seule partie d’une limace, ce qui signifie que les dommages aux autres régions sont relativement faibles. La meilleure préparation est de faire des dissections soigneuses de la masse buccale et de bien se familiariser avec l’anatomie. Sélectionnez un animal actif en lui offrant des algues et en confirmant que les intervalles de morsure ne sont pas supérieurs à cinq secondes.

10 minutes après l’anesthésie, essayez doucement d’insérer une épingle dans les branchies et le rhinophore, en vérifiant que ceux-ci ne se rétractent pas pour assurer une anesthésie suffisante. Assurez-vous que les lèvres de la limace sont lisses, indiquant que les mâchoires sont complètement détendues. De cette façon, l’odontophore est exposé.

Dans le cas où le froissement apparaît sur les lèvres, les lèvres et la mâchoire de l’animal ne sont pas suffisamment détendues pour l’intervention chirurgicale. Consultez le manuscrit pour obtenir des conseils sur l’incitation à la relaxation des lèvres. Placez la limace de sorte que la tête pend vers le bas, permettant à la masse buccale de s’installer contre les mâchoires.

Appliquez une pression avec le pouce et l’index pour pousser la masse buccale vers les mâchoires, en maintenant la masse buccale en place. Faites pivoter la mâchoire pour qu’elle soit visible. Dans le même temps, maintenir la pression sur la masse buccale de sorte que la protente de la masse buccale est visible à travers les mâchoires.

Travaillez doucement les extrémités des forceps contondants dans la fente de l’odontophore et utilisez-les pour lever la surface radulaire à travers les mâchoires. Si les mâchoires ne sont pas suffisamment détendues, utilisez les forceps pour saisir doucement le bord de la fente pour faciliter ce processus. Une fois la surface exposée, travaillez les mâchoires à l’extérieur de la partie antérieure de la surface radulaire tout autour du périmètre.

Cela rend l’odontophore moins susceptible de se rétracter. Assurez-vous qu’au plus la moitié des parois de l’odontophore ne sont pas exposées. Une fois que la surface radulaire est entièrement exposée, disposer la limace sous un microscope de dissection pour la chirurgie.

Pour les scientifiques ayant moins d’expérience, utilisez un large élastique et une troisième main pour stabiliser les mâchoires et la surface radulaire pour la chirurgie. Placez la surface radulaire de sorte que le côté fissure fait face à l’enquêteur. Saisissez doucement la surface radulaire près de la base radulaire de sorte qu’un pli horizontal soit créé perpendiculairement au pli anatomique.

Utilisez des ciseaux fins pour couper à travers ce pli, faire une incision le long du pli anatomique. Étendre cette incision initiale à trois à cinq centimètres pour permettre l’accès à l’intérieur de la masse buccale. Réglez la lumière de sorte qu’elle pointe directement en arrière par cette incision.

Partie des bords de l’incision de sorte que le dos du lumen de l’odontophore et les brins verticaux minces du muscle I7 sont visibles. Atteindre dans l’incision. Saisissez les deux brins d’I7 et tirez-les vers le haut par l’incision, où autant de muscle peut être coupé que c’est pratique.

Après que les lésions ont été exécutées, saisissez les tentacules antérieurs et poussez-les vers le bas sur la surface radular pour retourner la limace à sa configuration originale. Placez les animaux post-chirurgicaux dans un environnement protégé avec un bon débit d’eau. Assurez-vous que les animaux sont alertes et réactifs le lendemain de la chirurgie.

Le premier ou le deuxième jour après la chirurgie, les animaux commencent à se nourrir. Pour effectuer la lésion sub-radular de fibre après incision chirurgicale, insérez la pointe d’une petite lame droite de scalpel par l’incision avec le bord pointu incliné vers le haut. Racler délicatement les fibres musculaires fines du dessous de la surface radulaire.

Ensuite, effectuez des soins postopératoires comme précédemment. Dans cette étude anatomique, les lésions factices n’ont eu aucun effet significatif sur la largeur de l’ouverture au sommet du mordant. Alors que les lésions fibreuse i7 et sous-radulaires ont réduit considérablement la largeur de morsure.

La chose la plus importante à retenir est que les lèvres et les mâchoires de l’animal sont complètement détendues avant de tenter de pousser le saisisseur à travers les mâchoires. Très probablement, i7 et les fibres sous-radulaires sont des muscles multifonctionnels et nous avons seulement identifié certains aspects du comportement auquel ils contribuent. En outre, cette technique de protraction de l’odontophore donne accès à des parties entières de l’anatomie qui étaient auparavant inaccessibles.

En plus d’ouvrir les régions anatomiques et la biomécanique du corps mou, nous espérons que cela pourrait servir de base pour d’autres chercheurs qui travaillent avec des structures molles qui pourraient être autrement difficiles à étudier.