Plate-forme de transplantation de moelle osseuse pour étudier le rôle des cellules dendritiques dans la maladie de greffe-contre-hôte

Ce nouveau protocole de greffe de moelle osseuse peut être utilisé pour étudier comment les cellules dendritiques de l’hôte régulent les réponses greffe contre hôte et greffe contre leucémie après la transplantation. Les régénérations cellulaires ex vivo permettent d’adapter ce protocole pour tester le rôle d’autres cellules immunitaires telles que le macrophage et les neutrophiles simplement en modifiant l’état de la culture. Krystal Hossack, directeur de laboratoire, et Sanjeev Gurshaney, premier cycle, feront la démonstration de la procédure avec moi.

Pour la préparation de la moelle osseuse C57BL/6 appauvrie par les cellules T du donneur, récoltez le fémur et le tibia selon les protocoles standard des souris donneurs euthanasiées et transférez les os dans une boîte petri de 92 millimètres de diamètre contenant 1 % de milieu RPMI. À l’aide de ciseaux, retirer les extrémités de chaque os et remplir une seringue de trois millilitres munie d’une aiguille de calibre 26 avec un milieu RPMI frais de 1 %. Insérez l’aiguille dans une extrémité d’un os et pressez le piston pour rincer la moelle osseuse hors de la cavité et dans une passoire cellulaire de collecte.