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DOI: 10.3791/60197-v
Please note that some of the translations on this page are AI generated. Click here for the English version.
This study presents a protocol utilizing laser capture microdissection (LCM) to extract high-quality RNA from bone cells in mouse femurs, facilitating gene expression analysis. While focused on mouse bone tissues, the method is adaptable for examining gene expression in hard tissues across various species.
Un protocole de microdissection de capture laser (LCM) a été développé pour obtenir une quantité suffisante d'ARN de haute qualité pour l'analyse d'expression génique dans les cellules osseuses. L'étude actuelle se concentre sur les sections de fémur de souris. Cependant, le protocole LCM rapporté ici peut être utilisé pour étudier l'expression des gènes dans les cellules de tout tissu dur.
Avez-vous déjà pensé à exploiter la puissance de la microdissection de capture laser pour l’analyse de l’expression des gènes dans des cellules osseuses spécifiques dans leur environnement naturel? Ici, nous décrivons un protocole qui vous permettra d’obtenir des quantités suffisantes d’ARN de haute qualité à partir de cryosections d’os de souris. Cette technologie est un excellent outil pour examiner les changements dans l’expression des gènes dans des cellules osseuses spécifiques dans des modèles de souris génétiquement modifiés ou dans des modèles de maladies.
Le protocole décrit ici est axé sur les os de souris, mais peut être utilisé pour étudier in situ une expression génétique dans les cellules de n’importe quel tissu dur chez n’importe quelle espèce. Christiane Schueler, technicienne de mon laboratoire, aidera à démontrer cette procédure. Après avoir euthanasié des souris par exsanguination sous anesthésie générale, enlevez rapidement les fémurs entiers.
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