8 mai 2020
Présenté ici est un protocole pour étudier la dépression comme et le comportement anhédonique chez les rats. Il combine deux méthodes comportementales bien établies, la préférence du saccharose et les tests d’hypophagie induits par la nouveauté, avec un système automatisé de surveillance de l’apport alimentaire et liquide, pour étudier indirectement le comportement des rongeurs à l’aide de paramètres de substitution.
Les tests de préférence saccharose et d’hypophagie induite par la nouveauté sont des techniques établies pour évaluer l’anhédonie. Leur combinaison avec le système automatisé de surveillance des prises, permet une analyse détaillée avec une grande précision. Ce protocole réduit l’incidence des erreurs, en intégrant le déversement dans l’analyse des données empêchant le harding, et en réduisant la perte involontaire de liquide.
En outre, le protocole permet d’évaluer la microstructure d’admission. Cette technique vise à répondre au besoin de tests valides, la détection de l’anhédonie chez les rongeurs. Compte tenu de la prévalence croissante des troubles dépressifs.
Il peut également être utilisé pour étudier les effets antidépresseurs des médicaments. Lors de l’utilisation du système automatisé de surveillance des prises, il est important de se rappeler qu’il doit être entretenu et nettoyé correctement sur une base quotidienne, afin de fournir des données précises. Pour effectuer la formation, fermez toutes les portes et retirez le contenant de nourriture et la bouteille d’eau des microbalances.
Placez les aliments pré-pesés sur le dessus de la cage et documentez son poids tous les jours. Remplissez une bouteille d’eau propre d’environ 100 millilitres d’eau et placez-la sur la trémie. Remplissez une deuxième bouteille de 100 millilitres de solution de saccharose fraîchement faite à 1 %, et placez-la sur la trémie.
S’assurer de marquer les bouteilles, et de documenter leurs emplacements. Documentez le début de la formation dans le système de surveillance et ouvrez toutes les portes. Laissez les portes ouvertes pendant 24 heures, ce qui entraîne des maxes de libido annonce pour les deux bouteilles.
Documentez ensuite la fin de l’entraînement et fermez les portes. Préparez une solution de saccharose frais tous les jours et assurez-vous de nettoyer et de remplir les bouteilles toutes les 24 heures. Changer la position des bouteilles pour éviter l’accoutumabilité.
Effectuer la formation pendant au moins 48 heures. Seulement procéder à l’essai, Lorsque les ratios de préférence saccharose atteignent environ un. 24 heures avant l’essai, retirez la bouteille avec la solution de saccharose, de sorte que le rat ait accès au chow standard et à l’eau seulement.
Avant les essais, préparez une bouteille fraîche remplie d’eau du robinet et une autre remplie de saccharose à 1 %. Fermez toutes les portes. Retirez le contenant de nourriture de la trémie et remplacez-le par les bouteilles d’eau préparées et le saccharose.
Documentez ensuite le début du test dans le système de surveillance et ouvrez toutes les portes. Laissez les portes ouvertes pendant 60 minutes. Documentez ensuite la fin du test et fermez-les.
Pour se préparer à la période d’entraînement, fermez toutes les portes et retirez la trémie avec le chow standard. Remplissez une trémie fraîche d’une collation agréable au goût, en insérant soigneusement les craquelins pour éviter qu’ils ne s’effondrent. Placez ensuite la trémie sur le support de la cage au-dessus du microbalance.
Documentez le début de la formation dans le système de surveillance et ouvrez les portes pendant 30 minutes afin que le rat ait des maxes ad libitum à la collation et à l’eau. Après 30 minutes, documenter la fin de l’entraînement et fermer les portes. Remplacez ensuite la collation par un chow standard.
Répétez l’entraînement tous les jours jusqu’à ce qu’une base stable de la consommation de collations acceptables soit atteinte et ne diffère pas statistiquement entre les jours d’entraînement. Lorsque vous êtes prêt à effectuer le test, préparez une cage vide fraîchement nettoyée sans literie ni enrichissement et fixez-la au système automatisé de surveillance de l’apport alimentaire. Placez une trémie avec une bouteille d’eau du robinet et une trémie avec une collation agréable au goût sur les supports de la cage.
Retirez le rat de la cage de la maison et placez-le dans la nouvelle cage. Ouvrez les portes pendant 30 minutes. S’assurer de documenter le début et la fin des tests.
Une fois terminé, remettre le rat dans sa cage d’origine. Un test de préférence de saccharose administré à huit rats, a montré une augmentation de la consommation de saccharose et une diminution de la consommation d’eau au cours de la période d’essai. Le ratio de préférence du saccharose est passé d’une moyenne de 0,8 le premier jour à 0,99 le deuxième jour.
La microstructure de prise de saccharose a été évaluée automatiquement utilisant le système de surveillance. La taille des repas, la durée des repas, le nombre de repas et neuf autres paramètres ont été automatiquement mesurés. Pour démontrer les avantages de l’utilisation du système automatisé de surveillance des prises, des mesures automatisées ont été comparées à celles obtenues à l’aide d’évaluations manuelles conventionnelles.
Toutes les mesures étaient différentes d’un groupe à l’autre. Peut-être en raison d’une mesure ou d’un déversement erronément élevé lorsqu’il est évalué manuellement. Pendant la période de formation pour le test d’hypophagie induite par la nouveauté, la prise globale des casse-croûte acceptables a augmenté régulièrement, indiquant une adaptation pendant les deux à trois premiers jours.
De même, la taille des repas tendait vers une augmentation entre les jours d’entraînement, alors que la durée du repas ne l’était pas. Le jour de l’essai, les rats naïfs exposés à la collation et à un nouvel environnement ont montré une collation agréable au goût d’environ un gramme. D’autres paramètres de la microstructure d’apport alimentaire, tels que la durée des repas, le temps passé dans les repas et la latence au premier combat, ont également été évalués automatiquement.
Lors de l’exécution de ce protocole, documenter toutes les procédures, dans une section commune du logiciel de surveillance, pour gagner du temps du début et de la fin de chaque session. Documentez toujours quelle substance est placée sur quel équilibre. Puisque cette méthode n’est pas associée au stress, la tâche peut être répétée après un temps approprié de formation entre les tests.
Après avoir établi cette technique, il a été utilisé pour explorer les caractéristiques anhédoniques, de différents neuropeptides et animaux non perturbés, en élargissant la connaissance de leurs fonctions.
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Ce protocole présente une méthode pour étudier les comportements de type dépressif et l'anhédonie chez les rats en combinant les tests de préférence pour le saccharose et d'hypophagie induite par la nouveauté à un système de surveillance automatisé. Cette approche permet une analyse détaillée et précise du comportement des rongeurs.
Les tests automatisés de préférence pour le saccharose et d'hypophagie induite par la nouveauté chez le rat fournissent un phénotypage comportemental haute résolution de l'anhédonie, un symptôme central pertinent pour la découverte de médicaments neuropsychiatriques. L'intégration d'une surveillance automatisée de l'ingestion réduit les erreurs de mesure et permet d'obtenir des critères d'évaluation quantitatifs et reproductibles pour la validation précoce de cibles thérapeutiques et l'analyse des mécanismes afin d'en réduire les risques. Ces capacités renforcent la fiabilité prédictive des modèles précliniques, orientant ainsi la sélection de portefeuilles et assurant une continuité translationnelle pour les thérapeutiques du système nerveux central.
Cette plateforme automatisée de phénotypage comportemental s'inscrit dans la continuité entre la découverte précoce et la validation préclinique pour le développement de médicaments du système nerveux central.