Name: Optimisation de la technique de manchette pour la transplantation cardiaque murine (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2020-06-26T13:00:00.000+00:00
Duration: 14 min 1 s
Description: Découvrez une approche innovante par tube interne pour optimiser la technique de manchette lors de la transplantation cardiaque chez la souris. Cette méthode améliore l'éversion vasculaire et réduit significativement le temps opératoire.

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Ce travail a été soutenu par le Fujian Provincial Health Education Joint Research Project (WKJ2016-2-20), la National Natural Science Foundation of China (81771271 et 81800664), le National Key R&D Program of China (2018YFA0108304) et le Projet d’éducation et de recherche scientifique pour les jeunes et les enseignants d’âge moyen dans la province du Fujian (JAT170714), la Fondation des sciences naturelles de la province du Hunan en Chine (2019JJ50842) et les jeunes talents de Huxiang de la province du Hunan (2019RS2013).

Les animaux (BALB/c, C57BL/6, mâle, 8-12 semaines) sont logés dans une installation spécifique sans pathogènes au Laboratoire animal de l’Université de Xiamen. C57BL/6 est utilisé comme receveur et BALB/c est utilisé comme donneur. Toutes les procédures sont effectuées conformément aux lignes directrices du Comité institutionnel de soins et d’utilisation des animaux (IACUC).
REMARQUE : Un ensemble d’instruments microchirurgicaux, y compris un micro ciseaux, des micro forceps droits, des forceps micro incurvés et des supports de micro aiguille, sont nécessaires pour l’opération (Table et Matériaux, Figure 1B, C, D, E). Une paire de pinces à bouledogue à usage unique (Figure 1F) est nécessaire. Deux poignets pour la veine jugulaire externe et l’artère carotide sont préparés en coupant les tubes de polyamide personnalisés avec un scalpel no 10 sous un microscope. Le diamètre de la veine et du brassard d’artère est de 0,9 mm et 0,55 mm, respectivement. En outre, le diamètre du tube intérieur pour le brassard veineux correspondant est de 0,6 mm, et ceux-ci du tube intérieur pour le brassard d’artère correspondant est de 0,28 mm (figure 1G).
1. Préparation des bénéficiaires
<ol><li>Anesthésiez la souris destinataire avec du pentobarbital (60 mg/kg, i.p). Utilisez des tondeuses mécaniques atraumatiques pour enlever les cheveux à la région cervicale latérale droite.</li>
	<li>Utilisez un applicateur de pointe de coton stérile pour essuyer la zone chirurgicale avec l’antiseptique d’iode suivi de 70% d’éthanol.</li>
	<li>Placez la souris en position supination sur la plate-forme d’opération. Couvrir la souris de gaze stérile.</li>
	<li>Utilisez un ciseaux ophtalmique pour faire une incision transversale de la ligne médiane inférieure d’un tiers du cou à l’articulation droite épaule-clavicule.</li>
	<li>Isoler la veine jugulaire externe droite avec des forceps micro incurvés pour exposer suffisamment de longueur, couper les branches par électrocoagulation, et lier le navire à l’extrémité distale à l’aide d’une suture de soie 6-0.</li>
	<li>Pincez la veine jugulaire externe à l’aide d’une pince de bouledogue, puis transectez la veine proximalement à la ligature à l’aide d’un micro ciseaux.</li>
	<li>Laver le lumen du navire avec 100 U/mL 0-4 °C héparinisé saline pour enlever tout sang résiduel.</li>
	<li>Tirez la veine jugulaire externe à travers le brassard veineux à l’aide de micro forceps droits; insérer le tube intérieur de la veine dans le lumen comme stent, et evert le mur du navire sur le brassard avec des forceps micro droites (Figure 2A).</li>
	<li>Fixer l’endothélium du navire everted à l’extrémité proximale de la manchette à l’aide d’un 8-0 circonférentiel suture en soie (figure 2B).</li>
	<li>Utilisez des micro forceps droites pour retirer le tube intérieur de la veine du vaisseau veineux.</li>
	<li>Effectuer une dissection émoussée avec des forceps micro incurvés pour isoler l’artère carotide droite adjacente au bord intérieur du sternocleidomastoid.</li>
	<li>Pincez l’artère carotide droite à l’aide d’une pince de bouledogue, liverge l’artère carotide distally à l’aide d’une suture de soie 6-0, et utilisez un micro ciseaux pour transect l’artère carotide proximally à la ligature.</li>
	<li>Laver l’artère carotide avec 100 U/mL 0-4 °C héparinisé saline pour enlever tout sang résiduel.</li>
	<li>Passer l’artère carotide par le brassard de l’artère et insérer le tube interne de l’artère dans le vaisseau de l’artère à l’aide de micro forceps droits (Figure 2C).</li>
	<li>Evert le navire sur le brassard à l’aide de micro forceps droites; fixer l’endothélium du navire everted à l’aide d’un 8-0 circonférentiel suture en soie (Figure 2D).</li>
	<li>Retirez le tube interne de l’artère du vaisseau de l’artère avec des forceps micro droites. REMARQUE : Préserver la glande submandibulaire du receveur.</li>
</ol>2. Préparation des donneurs
<ol><li>Anesthésiez la souris donneuse au pentobarbital (60 mg/kg, i.p). Utilisez des tondeuses mécaniques atraumatiques pour enlever les cheveux à la région abdominale.</li>
	<li>Placez la souris en position supination sur la plate-forme d’opération. Couvrir la souris de gaze stérile.</li>
	<li>Utilisez un applicateur de pointe de coton stérile pour essuyer la zone chirurgicale avec l’antiseptique d’iode suivi de 70% d’éthanol.</li>
	<li>Faire une incision abdominale de ligne médiane avec un ciseaux ophtalmique et exposer la cavité abdominale.</li>
	<li>Utilisez des forceps micro incurvés pour exposer la vena cava inférieure, puis injectez par voie intraveineuse 200 μL de 100 U/mL 0-4 °C héparinisé saline par 20 g de poids corporel par le vena cava inférieur.</li>
	<li>Effectuer la thoracotomie avec des ciseaux ophtalmiques, couper les côtes par les incisions bilatérales de ligne midaxillaire, retourner la paroi thoracique antérieure vers l’extérieur pour exposer la cavité thoracique.</li>
	<li>Exciser le thymus avec des forceps micro incurvés.</li>
	<li>Exposer l’aorte, puis perfuse 200 μL de 100 U/mL 0-4 °C héparinisé saline à l’artère coronaire par l’arc aortique. REMARQUE : Évitez de perfuser des bulles de gaz dans le cœur du donneur.</li>
	<li>Utilisez un micro ciseau pour transecter l’aorte ascendante au début de l’arc aortique.</li>
	<li>Transect l’artère pulmonaire au début des deux branches principales avec un micro ciseaux.</li>
	<li>Lier la vena cava supérieure et la vena cava inférieure à l’aide d’une suture de soie 6-0 et utiliser un micro ciseaux pour transect veiner distally à la ligature.</li>
	<li>Lier les veines pulmonaires ensemble, circonférentiellement, en utilisant une seule suture de soie 6-0, et couper les branches veineuses distally à la ligature à l’aide d’un micro ciseaux.</li>
	<li>Retirer la greffe cardiaque des tissus mous environnants; le conserver en 0-4 °C héparinisé saline.</li>
</ol>3. Implantation cardiaque
<ol><li>Placez le cœur du donneur à l’envers dans la région du cou droit du receveur.</li>
	<li>Entrez l’artère pulmonaire du cœur du donneur à une boucle de soie 6-0 avec des forceps micro droites.</li>
	<li>Enroulez le lumen du navire autour du brassard veineux, puis serrez les boucles de suture de soie 6-0 autour du brassard pour bander le joint du navire.</li>
	<li>Effectuer l’anastomose de l’aorte de la greffe et de la manchette de l’artère en suivant les étapes décrites à l’étape 3.2.</li>
	<li>Relâchez la veine jugulaire serrée suivie de l’artère jugulaire serrée. Gardez l’articulation du vaisseau non coulé et assurez-vous que le flux sanguin est dégagé. REMARQUE : Le rythme des sinus qui revient à plus de 200 fois en 1 min est considéré comme normal.</li>
	<li>Humidifiez le cœur du donneur à l’aide d’une solution saline chaude (37 °C) et inspectez si la greffe saigne. Placez la greffe cardiaque pulsante dans l’espace sous-cutane, puis suturez l’incision.</li>
</ol>4. Évaluation des soins postopératoires et de la greffe
<ol><li>Enregistrez le temps au rythme normal des sinus et la préservation du rythme normal des sinus pendant au moins 5 minutes après la libération de la pince pour surveiller la fonction de greffe postopératoire.</li>
	<li>Placez le destinataire seul sur une couverture chaude jusqu’à ce que le receveur se réveille de l’anesthésie. Administrer l’analgésie de buprénorphine, 0,05 mg/kg, s.c, à la fin de la chirurgie et toutes les 12 heures pendant 72 heures après la chirurgie.</li>
	<li>Enregistrez quotidiennement le poids et l’état de récupération postopératoire du receveur. En cas de perte de poids >15% par rapport à celle de la date de la chirurgie, paralysie hémiplégique, ou infection, euthanasier le destinataire par inhalation isoflurane terminale21.</li>
	<li>Surveiller la survie de greffe par palpation quotidienne. La chirurgie est considérée comme un succès si l’allogreffe murine survit pendant >72 heures. Grader la fonction de greffe, comme précédemment rapporté22: Échelle 3 - pulsation vigoureuse et fréquence ; Échelle 2 - moins de pulsation; Échelle 1- fibrillation et rejet imminent; ou Échelle - 0, perte de rythme cardiaque et rejet complet.</li>
</ol>

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</ol>

Les auteurs n’ont rien à divulguer.

Les modèles de transplantation cardiaque de souris sont des outils importants pour la recherche en immunologie des greffes, car des outils et des matériaux pour évaluer les mécanismes immunitaires de ce modèle et un grand nombre de souris modifiées par les gènes sont disponibles. Cependant, les défis techniques microchirurgicaux, tels que la suture et l’eversion des navires, ont limité son utilisation généralisée. Dans la présente étude, nous avons étudié certains défis techniques fondamentaux de la transplantation cardi...

L’établissement de la transplantation cardiaque hétérotopique de souris par anastomose de bout en bout dans l’abdomen en 1973 a été une étape importante dans la recherche fondamentale d’immunologie de greffe1. Ce modèle a fourni un outil important et valide pour analyser les mécanismes de la blessure de reperfusion d’ischémie2, rejet immunologique, et tolérance3,4. Cependant, la nature complexe et longue de la chirurgie ainsi que le potentiel d’infections peuvent entraîner des adhérences abdominales périopératoires graves et des réactions inflammatoires, résultant en une faible efficacité pour le modèle de transplantation cardiaque hétérotopique.
La technique de transplantation cardiaque hétérotopique cervicale a été décrite pour la première fois par Chen en 19915. Dans ce modèle, la veine jugulaire externe du destinataire est anestomosed à l’artère pulmonaire de la greffe et l’artère carotide est anestomosed à l’aorte ascendante. Les principaux avantages de cette méthode sont la commodité de la surveillance et la réduction des traumatismes pour le destinataire. Dans la même année, Matsuura décrit une technique améliorée, dans laquelle la fin de la veine jugulaire externe et l’artère carotide ont été jamaissées sur un brassard de téflon et fixé avec une ligature de soie circonférentielle6. Certains chercheurs ont également fixé le brassard à l’artère pulmonaire droite dans le cœur du donneur avant d’insérer le brassard dans la veine jugulaire externe du receveur7. Jusqu’à présent, la technique de manchette a été largement appliquée dans divers modèles vasculaires de greffe de pédicle, y compris ceux pour le poumon8, foie9, et la transplantation rénale10.
À ce jour, il y a plusieurs difficultés associées à la technique de manchette. Par exemple, l’artère carotide est difficile à evert sur le brassard en raison de l’élasticité supplémentaire, ce qui entraîne le tissu se retourner vers l’arrière. Par conséquent, une pratique supplémentaire et un dilatateur microchirurgical peuvent être nécessaires pour compléter cette étape. En outre, la préparation du col de l’utérus peut prendre jusqu’à 25 minutes.
Pour résoudre ces problèmes, nous introduisons la technique du tube intérieur, qui est basée sur la technique de manchette et comprend la fixation de la manchette sur la veine jugulaire externe et l’artère carotide à l’aide d’un tube intérieur pour aider à la eversion de la paroi du navire. En outre, avec une formation simple, la préparation des bénéficiaires est réduite à 15,5 minutes. Cette technique réduit la complexité de l’opération et ne nécessite pas de pratique supplémentaire ou l’utilisation d’un dilatateur vasculaire. Il peut être appliqué dans toutes les recherches immunitaires de transplantation, en particulier pour vérifier la tolérance immunitaire de tiers au cours de laquelle le receveur reçoit deux allogreffes cardiaques, l’un dans l’abdomen et l’autre dans le cou11. Nous recommandons également la coopération entre deux chirurgiens qualifiés pour établir ce modèle, avec un chirurgien préparant l’animal receveur et l’autre récoltant et implantant le coeur de donneur. Une telle collaboration peut réduire le temps d’opération à 25 minutes. En utilisant cette procédure optimisée, nous avons établi syngeneic, allogénique12,13,14,15,16,17,18,19, et xénogénéique modèles de transplantation cardiaque de souris20.
La raison d’être du développement de la technique du tube intérieur était de réduire le temps d’opération pour l’établissement d’un modèle de transplantation cardiaque de souris avec un taux de réussite élevé. L’optimisation du modèle de transplantation cardiaque cervicale facilite l’acquisition de taux de réussite élevés dans une courte période de temps de chirurgie par rapport à la technique traditionnelle de suture et de manchette21. En outre, le modèle de coopération peut réduire davantage le temps ischémique chaud du cœur du donneur par rapport aux chirurgies effectuées avec un seul opérateur.

<table><tbody><tr><td>Ballon artériel</td> Tube en polyamide <td>fait</td><td></td> maison<td>. diamètre : 0,55 mm, longueur : 1,0 mm</td></tr><tr><td>Tube intérieur d’artère</td><td>Tube</td> en polyamide fait <td></td> maison<td>. Diamètre : 0,28 mm</td></tr><tr><td>Micro pince incurvée</td><td>Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. Surgical Instruments Factory</td><td>WA3050</td><td>1/8 arc, pointe de 0,3 mm sans crochet</td></tr><tr><td>Micro porte-aiguilles</td><td>Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. Surgical Instruments Factory</td><td>WA2050</td><td>Pointe de 0,2 mm</td></tr><tr><td>Micro-ciseaux</td><td>Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. Surgical Instruments Factory</td><td>WA1050</td><td>Droit, longueur de la lame : 10 mm</td></tr><tr><td>Micro pince droite</td><td>Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp. Surgical Instruments Factory</td><td>WA3060</td><td>Pointe de 0,15 mm sans crochet</td></tr><tr><td>Scanlan Vascu-Statt Bulldog Clamps</td><td>Scanlan International Inc</td><td>1001-531</td><td>Pression de serrage 20&ndash ; 25 grammes</td></tr><tr><td>Brassard veineux</td> Tube en polyamide <td>fait</td><td></td> maison<td>. diamètre : 0,9 mm, longueur : 1,2 mm</td></tr><tr><td>Tube intérieur veineux</td> tube en polyamide <td>fait</td><td></td> maison<td>. Diamètre : 0,6 mm</td></tr></tbody></table>

optimisation de la technique de manchette pour la transplantation cardiaque murine

Optimization of the Cuff Technique for Murine Heart Transplantation

La transplantation cardiaque de Murine a été exécutée pendant plus de 40 ans. Avec les progrès de la microchirurgie, certaines nouvelles techniques ont été utilisées pour améliorer l’efficacité chirurgicale. Dans notre laboratoire, nous avons optimisé la technique de manchette avec deux étapes importantes. Tout d’abord, nous avons utilisé la technique du tube interne pour insérer un tube intérieur temporaire dans la veine jugulaire externe et le vaisseau sanguin de l’artère carotide pour faciliter l’ensonation du vaisseau au-dessus du brassard. Deuxièmement, nous avons exécuté la transplantation cardiaque hétérotopique complète par la collaboration de deux chirurgiens expérimentés. Ces modifications ont effectivement réduit le temps d’exploitation à 25 minutes, avec un taux de réussite de 95%. Dans ce rapport, nous décrivons ces procédures en détail et fournissons une vidéo supplémentaire. Nous croyons que ce rapport sur la technique améliorée de manchette offrira des conseils pratiques pour la transplantation de coeur hétérotopique de murine et améliorera l’utilité de ce modèle de souris pour la recherche fondamentale.

Temps d’opération chirurgicale
Après la formation, un chirurgien qualifié peut effectuer avec succès l’opération dans les 35 minutes en utilisant la technique du tube interne, dans le cadre de laquelle environ 15,5 minutes sont nécessaires pour la préparation du receveur, 10,9 minutes sont nécessaires pour la préparation du donneur, et 4,4 minutes sont nécessaires pour les anastomoses cardiaques du donneur. Le temps d’ischémie froid et chaud (de la préparation du donneur à l’i...

Nous introduisons une approche de tube interne à la technique de manchette pour la transplantation de coeur hétérotopique cervical de souris pour aider evert le vaisseau au-dessus de la manchette. Nous avons constaté que la coopération entre deux chirurgiens expérimentés raccourcit nettement le temps d’opération.

Optimisation de la technique de manchette pour la transplantation cardiaque murine

Murine cardiac transplantation has been performed for more than 40 years. With advancements in microsurgery, certain new techniques have been used to ...

Bonjour, tout le monde. Mon nom est Dr.Zhongquan Qi.It est largement connu que la technique du brassard a été utilisé comme transplantation cardiaque depuis en 1991. Bien qu’il y ait eu de grands progrès dans la chirurgie médicale et la nouvelle technique chirurgicale, il y a encore quelques difficultés basées sur la technique de manchette.C’est une forme de dévoilement, où ils vous montreront une demi-technique optimotique, qui peut significativement égaler l’efficacité chirurgicale. Les procédures principales consiste à insérer temporairement un tube dans la visière. La preuve a lu l’ISO près de la moitié.Insertion de la technique du tube. Un chirurgien qualifié peut effectuer l’opération en 35 minutes avec un taux de réussite de 95%. Ensuite, ils peuvent utiliser le module d’opération du chirurgien thermique, ce qui améliore encore l’efficacité de l’opération montrant dans le skeptimic et le temps d’opération sera raccourci à environ 35 minutes.Merci. Et c’est ce qui lie la recette et des miles avec pentobarbital. Utilisez des tondeuses mécaniques atraumatiques pour enlever les cheveux à droite plus tard dans la région cervicale.Utilisez un applicateur stérile de pointe de coton pour essuyer la zone chirurgicale avec l’antiseptique d’iode suivi de 70% d’éthanol. Placez la souris en position supine sur la plate-forme d’opération. Couvrir la souris de gaze stérile.Utilisez un ciseaux ophtalmique pour faire une incision transversale de la ligne inférieure d’un tiers nacmec à l’articulation de la clavicule de l’épaule droite. Isoler la veine jungular externe droite avec des forceps micro incurvés pour exposer suffisamment de longueur. Couper les brunchs par coagulation électro.Et localiser le navire à la disto et en utilisant un six 2 0 six suture. Serrez la veine junglaire externe de façon proximale à l’aide d’une pince en poudre. Et puis traduire la veine à proximité de la ligature à l’aide d’un micro ciseaux.Laver le lumen navire avec 100 unités par millilitre 02 quatre degrés Celsius héparine saillant pour enlever tout sang résiduel. Tirez la veine junglar externe à travers le cava vena à l’aide de micro forceps droits. Insérez le tube intérieur veineux dans le lumen comme un enfilage et sur la paroi du navire au-dessus de la courbe avec des forceps micro droites.Fixer l’endothélium irritant faso à l’extrémité proximale de la courbe à l’aide d’une suture circonférentielle de huit à 06. Utilisez des forceps micro droites pour retirer le tube intérieur veineux du vaisseau veineux. Effectuez une dissection émoussée avec des micro forceps pour isoler l’artère carotide droite, adjacente au bord intérieur du sternocleidomastoid.Serrez l’artère carotide droite proximalement à l’aide d’une pince babcock. Localiser l’artère carotide distally à l’aide d’une suture de six à 06. Et utilisez un micro ciseaux pour transiger l’artère carotide à proximité de la ligature.Laver l’artère carotide avec 100 unités par millilitre 02 quatre Celsius héparine saillant pour enlever tout sang résiduel. Passez l’artère carotide à travers la courbe de l’artère et insérez le tube intérieur de l’artère dans le récipient de l’artère à l’aide de micro forceps droits. Visez le navire au-dessus de la courbe à l’aide de micro forceps droits.Fixer l’endothélium facile inversé à l’aide d’une suture circonférentielle de huit à 06. Retirer la pointe intérieure de l’artère du récipient de l’artère avec des micro forceps droits. L’anesthésie et son infection sont les mêmes que le receveur.Faire une incision abdominale de mi-ligne avec un ciseaux ophtalmique et exposer la cavité abdominale. Utilisez des forceps micro courbe pour exposer le cava vena inférieur. Et puis injecter par voie intraveineuse 200 microlitres de 100 unités par millilitre 02 quatre degrés Celsius héparine saillant par 20 grammes de poids corporel à travers le cava vena inférieur.Effectuer la thoracotomie avec des ciseaux ophtalmiques. Couper les côtes à travers les palettes Romita incisions légères axillaires. Flav la paroi thoracique antérieure vers l’extérieur pour exposer la cavité thoracique.Exciser le thymus avec des micro forceps. Exposer l’aorte, puis profuse 200 microlitres de 100 unités par millilitre 02 quatre degrés Celsius héparine saillant à l’artère coronaire à travers l’arc aortique. Utilisez un micro ciseaux pour transecter l’aorte ascendante au début de l’arc aortique.Transect l’artère pulmonaire au début des deux branches principales avec un micro ciseaux. Localiser le cava vena supérieur et le cava vena inférieur approximativement à l’aide d’une suture de six à 02 et utiliser un micro ciseaux pour transecter le distillat veineux à la ligature. Localiser les veines pulmonaires ensemble circonférentiellement à l’aide d’un seul six, à 06 suture et couper les branches veineuses distally à la ligature à l’aide d’un micro ciseaux.Retirer la greffe cardiaque des tissus mous environnants. Placez le cœur du donneur à l’envers dans la région du cou droit du receveur. Entrez l’artère pulmonaire du coeur de donneur à une boucle de six à 06 avec des forceps droits micro.Enroulez le lumen du navire autour de la cava vena, puis serrez la boucle de suture de six à 06 autour du veau pour plier l’articulation du navire. Effectuer une anastomose de l’aorte de la greffe et la courbe de l’artère. Relâchez la veine jugulaire agglutinée suivie d’une artère jugulaire agglutinée.Gardez le vaisseau joint et tordu et assurez-vous que le flux sanguin n’est pas obstrué. Placez la greffe cardiaque qui passe dans l’espace sous-cutané, puis suturez l’incision. Enregistrez le temps au rythme normal de sinus et la conservation du rythme normal de sinus pendant au moins cinq minutes après la libération de pince pour surveiller la fonction postopératoire de greffe.Placez le receveur seul sur la couverture jusqu’à ce que le receveur se réveille de l’anesthésie. Pris ensemble, bien que notre chirurgie utilise des techniques de manchette qui ont été rapportés, nous avons établi la technique du noyau interne basé sur cela. Réduisez la difficulté de la chirurgie et raccourcissez le temps d’anastomose par la technique d’optimisation.Nous avons suggéré la devise d’incorporation de double chirurgie pour améliorer davantage l’efficacité de l’opération montrée dans le schéma. Et le temps de fonctionnement sera réduit à environ 25 minutes. Un coeur d’allograft balbc complètement mhc dépareillé peut être rejeté avec huit jours après transplantation dans les souris destinataires de C57BL6.Les greffes cardiaques syngénéiques utilisées dans notre recherche ont survécu plus de 100 jours excepté un cas rare dû à une perte de poids de 15% comparée au poids normal avant l’opération. L’histopathologie de l’allograft le septième jour a indiqué les dispositifs typiques du rejet aigu, y compris un cellulaire lourd infiltrer avec la nécrose de tissu. Les greffes syngénéiques sont presque normales sans aucune évidence de nécrose de myocyte ou d’infiltration inflammatoire de cellules.100 jours après greffe cardiaque syngénétique, l’endothélium vasculaire du site d’anastomosis peut être rassemblé et taché par immunofluorescent. Dans cette analyse, aucun hargne défavorable de la paroi vasculaire, de la thrombose ou de l’épaississement de l’intima n’a été observé. La formation image microscopique électro a indiqué qu’un endothélium lisse et une formation longitudinale régulière de croûte avec les cellules endothéliales arrangées soigneusement et étroitement sans sédiment évident à la surface.

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Research

Recherche

JoVE Journal

Immunology and Infection

Immunologie et infection

Le modèle de transplantation cardiaque col de l'utérus de souris est bien adapté pour immunologique ainsi que des études de lésions d'ischémie reperfusion. Nous avons modifié la procédure en utilisant une technique de manchette non-suture et effectué plus de 1.000 transplantations réussies avec cette approche.  Ici, nous fournissons des détails supplémentaires de cette technique pour compléter la vidéo.

Murin col de l&#39;utérus Cœur, la transplantation en utilisant une technique de modification de manchette

Le manuscrit décrit les étapes nécessaires pour effectuer la transplantation cardiaque hétérotopique chez la souris.

Murin de transplantation cardiaque hétérotopique Technique

La technique du brassard raccourcit et facilite le modèle de transplantation cardiaque cervicale hétérotopique chez la souris en évitant les anastomoses de suture techniquement difficiles des petits vaisseaux. Les détails techniques présentés dans cet article vidéo devraient permettre aux chercheurs d’établir ce modèle dans leurs laboratoires.

Heterotopic col de l&#39;utérus chez la souris Transplantation cardiaque

Ici, nous présentons un protocole de la transplantation aortique hétérotopique chez les souris utilisant la technique de manchette de non-suture dans un modèle murin cervical. Ce modèle peut être utilisé pour étudier la pathologie sous-jacente de la vasculopathie chronique d'allogreffe (CAV) et peut aider à évaluer de nouveaux agents thérapeutiques afin de prévenir sa formation.

Modèle de transplantation aortique cervicale de Murine utilisant une technique modifiée de manchette de non-suture

Dans le présent protocole, un modèle de transplantation cardiaque de souris est utilisé pour étudier le mécanisme du rejet de l’allogreffe cardiaque. Dans ce modèle de transplantation cardiaque hétérotopique, l’efficacité de l’opération est améliorée et la survie des greffons cardiaques est assurée par une anastomose cervicale de bout en bout de l’implantation cardiaque à l’aide d’une technique de brassard modifiée.

Une technique de brassard modifiée pour un modèle de transplantation cardiaque hétérotopique cervicale de souris

Les modèles de transplantation cardiaque de souris représentent des outils de recherche précieux pour étudier l’immunologie de la transplantation. Le présent protocole détaille la transplantation cardiaque cervicale hétérotopique chez la souris qui implique la mise en place de brassards sur l’artère carotide commune du receveur et le tronc de l’artère pulmonaire du donneur pour permettre le flux sanguin laminaire.

Transplantation cardiaque cervicale hétérotopique de souris utilisant des brassards vasculaires

Ce protocole fournit des informations techniques pour la reconstruction vasculaire à l’aide de la technique du brassard dans la transplantation hépatique orthotopique de souris.

Reconstruction vasculaire avec la technique du brassard dans la transplantation hépatique orthotopique de souris

Ce protocole présente une technique de transplantation hétérotope cervicale hétérotopique, sans brassard, conçue pour permettre la pose fiable d’un second greffon cardiaque hétérotope afin d’évaluer la tolérance immunitaire spécifique au donneur dans des conditions physiologiques avec un minimum d’interférences de matériel étranger.

Modèle cervical sans suture de brassard pour la transplantation cardiaque hétérotope secondaire afin d’évaluer la tolérance immunitaire spécifique au donneur chez la souris

Ce protocole présente une technique simplifiée d’anastomose de suture de bout en côté pour la transplantation de cœur cervical murin, fournissant un modèle robuste et reproductible pour l’étude de l’immunologie de la transplantation.

Transplantation cardiaque hétérotope cervicale de souris utilisant la technique d’anastomose de bout en côté pour étudier l’immunologie de la transplantation

Dans cette vidéo, nous démontrons la procédure d'activation de CD40-et à l'expansion des cellules B murines à partir de splénocytes de souris C57BL / 6, qui peut être utilisé comme un modèle de cellule présentatrice d'antigène (APC) pour étudier l'induction de l'immunité.

Modèle murin de CD40-activation des cellules B

Découvrez une approche innovante par tube interne pour optimiser la technique de manchette lors de la transplantation cardiaque chez la souris. Cette méthode améliore l'éversion vasculaire et réduit significativement le temps opératoire.

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