Name: Injection d’échafaudages de biomatériaux d’hydrogel au cerveau après un AVC (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2020-10-01T13:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 41 s
Description: Découvrez l'injection d'échafaudages d'hydrogel dans un modèle d'AVC photothrombotique chez le rongeur. Cette méthode permet d'étudier la régénération tissulaire et la récupération motrice post-AVC.

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Nous tenons à remercier les National Institutes of Health et le National Institute of Neurological Disorders and Stroke pour leur financement (R01NS079691).

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Les auteurs déclarent que TS est l’un des fondateurs de Tempo Therapeutics, qui cherche à commercialiser des hydrogels MAP.

Ici, nous démontrons un modèle d’AVC permanent, peu invasif et facilement reproductible et décrivons comment injecter un biomatériau dans l’infarctus cinq jours après l’AVC. L’utilisation du colorant photothrombotique Rose Bengal et d’un laser collimaté de 520 nm connecté au dispositif stéréotaxique nous donne la possibilité de positionner le coup au niveau du cortex moteur de la souris avec une précision accrue. Cinq jours après l’AVC, l’emplacement de l’infarctus est visible à l’œil nu au centre de l’irradiation, à 2,0...

L’AVC est la principale cause d’invalidité et la cinquième cause de décès aux États-Unis1. Environ 87% de tous les accidents vasculaires cérébraux sont ischémiques, tandis que la majorité des 13% restants sont hémorragiques2. Un AVC ischémique est défini comme le blocage du flux sanguin dans une artère vers le tissu environnant. Cette occlusion entraîne une privation d’oxygène et une nécrose subséquente qui entraîne souvent une invalidité permanente chez les patients survivants. Bien qu’il y ait eu une diminution du taux de mortalité des accidents vasculaires cérébraux3,sa prévalence devrait augmenter pour atteindre 3,4 millions de personnes d’ici 20304. Cette augmentation du nombre de survivants handicapés et le fardeau économique qui en résulte ont conduit à une poussée pour la recherche sur les accidents vasculaires cérébraux qui se concentre sur les mécanismes de réparation neuronale. Après un AVC, il y a une période inflammatoire qui conduit à la formation d’une cicatrice qui empêche la région nécrotique de se développer. La région entourant le noyau nécrotique est appelée « péri-infarctus » et il existe des preuves solides que la plasticité dans cette région, qui comprend une augmentation de l’angiogenèse, de la neurogenèse et de la germination axonale, est directement liée à la récupération observée chez les modèles animaux et les humains5. Comme il n’existe pas de modèles in vitro capables de reproduire correctement les interactions complexes qui suivent un AVC, les modèles animaux sont essentiels pour la recherche sur l’AVC.
Il existe plusieurs modèles in vivo qui peuvent être utilisés pour produire un AVC ischémique. L’un des modèles les plus couramment utilisés chez la souris est l’occlusion de l’artère cérébrale moyenne, ou MCAo, par occlusion distale ou proximale (via un filament intra-artériel). Le modèle proximal, également connu sous le nom de filament MCAo (fMCAo), entraîne généralement de grands accidents vasculaires cérébraux ischémiques qui englobent de 5% à 50% de l’hémisphère cérébral, en fonction du nombre de facteurs6. Dans ces modèles, une suture ou un filament est avancé de l’artère carotide interne à la base de l’artère cérébrale moyenne (ACM) et maintenu en place pendant une période de temps spécifique. Cette méthode d’occlusion, qui peut être rendue temporaire ou permanente, produit un infarctus centré dans le striatum et peut ou non impliquer une sus-couche du cortex6. La taille de la course résultante est très variable et des techniques d’imagerie, telles que le doppler laser, sont nécessaires pour confirmer l’efficacité de la procédure chez chaque souris. L’occlusion de filament intra-artérielle ou intra-luminale qui dure plus de 30 minutes produit des traits à l’extrémité la plus large de la plage de taille. Certains chercheurs se sont concentrés sur des temps d’occlusion de filament plus courts, ce qui nécessite une mise au point expérimentale substantielle et une validation en laboratoire7. Les modèles de filament MCAo chez la souris suivent des stades similaires de mort cellulaire, de progression ischémique et de formation d’une région de péri-infarctus comme on le voit dans les cas d’accident vasculaire cérébral humain; cependant, les accidents vasculaires cérébraux plus importants ressemblent davantage à l’état pathologique des infarctus cérébraux malins, qui sont moins fréquents, moins traitables accidents vasculaires cérébraux humains6. Pendant ce temps, l’occlusion distale de MCA nécessite une chirurgie et une craniectomie plus impliquées. Dans ce modèle, la partie distale du MCA qui longe la surface du cerveau est directement obstruée par une attache de suture ou une cautérisation. Dans certaines variantes de la technique, les artères carotides sont obstruées unilatéralement ou transitoirement-bilatéralement. Un avantage du MCAo distal est qu’il produit une course corticale de taille moins variable que le modèle de filament. Cependant, le modèle distal produit un rendement comportemental plus faible en raison de la transsection de l’artère carotide externe (ECA), ce qui est également une préoccupation avec fMCAo6.
Un modèle d’AVC alternatif connu pour être moins invasif est le modèle photothrombotique (PT). Le modèle PT donne un emplacement bien défini de l’ischémie et est associé à un taux de survie élevé8. La technique repose sur un colorant photosensible injecté par voie intrapéritonéale qui permet la photo-oxydation intravasculaire simplement en irradiant le tissu désiré avec une lumière ou un laser9. Lors de l’excitation, des radicaux d’oxygène se forment qui causent des dommages endothéliaux, ce qui active l’agrégation plaquettaire et la formation de caillots dans la zone irradiée8,9. Le contrôle étroit de la taille et de l’emplacement de la course, ainsi que la reproductibilité élevée du modèle PT, le rendent idéal pour l’étude des biomatériaux. Bien que la précision soit rendue possible à l’aide d’un laser et de coordonnées stéréotaxiques, certains inconvénients peuvent rendre ce modèle moins idéal pour peu d’études. Contrairement au modèle fMCAo, le modèle PT stroke ne peut pas être réaffûté. Par conséquent, les matériaux pour étudier les agents neuroprotecteurs spécifiques aux dommages après la reperfusion ou les mécanismes suivant la reperfusion ne seraient pas utiles ici8. De plus, en raison de l’insulte microvasculaire du modèle PT, une pénombre ischémique relativement petite est observée. Au lieu de cela, un œdème vasogénique local se produit, ce qui n’est pas caractéristique de l’accident vasculaire cérébral humain, ce qui rend ce modèle indésirable pour les études précliniques sur les médicaments axées sur la zone du péri-infarctus6,8.
L’objectif global des stratégies de biomatériaux dans l’AVC est soit de fournir des agents bioactifs, soit d’agir comme une matrice extracellulaire de substitution pour la croissance des tissus cérébraux. Une stratégie que nous explorerons à l’aide de nos méthodes consiste à administrer de l’hydrogel directement dans le noyau de l’AVC, par opposition au tissu péri-infarctus où de nombreuses thérapies cellulaires actuelles sont administrées10. La raison d’être de cette approche est que l’administration dans le tissu nécrotique trouvé dans le noyau évitera de perturber le tissu sain ou en convalescence environnant. Nous supposons que la diffusion de tous les agents actifs inclus dans le biomatériau pourra atteindre le péri-infarctus à partir du noyau, d’autant plus que nous constatons que la livraison de biomatériaux hydrogel réduit l’épaisseur de la cicatricegliale 11. Ceci est important car il a été démontré que la région du péri-infarctus présente une neuroplasticité après un AVC, ce qui en fait une cible attrayante. En outre, l’administration d’une matrice de substitution au noyau de l’AVC peut être chargée de facteurs angiogéniques12 ou neurogènes13 pour guider la formation de nouveaux tissus, ainsi que de cellules pour l’accouchement14. L’administration cellulaire est grandement améliorée par l’utilisation d’une matrice car elle protège les cellules des forces d’injection sévères et de l’environnement local présents pendant l’accouchement, ainsi que favorise la différenciation et la greffe15.
Ces biomatériaux thérapeutiques injectables ont une pertinence clinique dans les applications d’AVC, car il n’existe actuellement aucune thérapie médicale qui stimule la récupération neuronale après un AVC. Les circuits neuronaux sous-jacents impliqués dans la récupération se trouvent dans le tissu cérébral adjacent au noyau de l’AVC16, tandis que le noyau de l’AVC lui-même est dépourvu de tissu neural viable. Nous prévoyons que l’administration d’un biomatériau dans le noyau de l’AVC nécrotique a le potentiel de stimuler le tissu adjacent vers des processus de régénération par un certain nombre de mécanismes mentionnés précédemment, y compris la libération de dépôt de facteurs de croissance13, la stimulation de la croissance tissulaire et la promotion de la récupération du développement du tissu cérébral11,12, l’altération des réponses immunitaires17, et l’administration de thérapies dérivées de cellules souches14, 18. Cependant, pour étudier efficacement la possibilité de ces applications, une méthode cohérente et reproductible pour induire un AVC et injecter des biomatériaux est nécessaire. Le modèle de course PT utilise des techniques qui offrent un contrôle précis sur l’orientation et l’emplacement de la course. Un laser fixé au dispositif stéréotaxique guide les orientations et des pompes fixées aux dispositifs stéréotaxiques contrôlent le taux d’injection du matériau sans avoir besoin de formes supplémentaires d’imagerie. Par conséquent, nous avons choisi de décrire les méthodes permettant d’effectuer un AVC PT dans les cortex moteurs de souris et d’injecter des biomatériaux dans le noyau de l’AVC. Ici, nous utilisons des hydrogels de particules recuites microporeuses (MAP) comme biomatériau pour injection sans cellules ni facteurs de croissance ajoutés. De plus, nous expliquons comment récupérer avec succès le cerveau avec des biomatériaux intacts et nous discutons des tests d’immunochimie utilisés pour analyser le résultat de l’AVC avec et sans injection de biomatériaux.

<table><tbody><tr><td>10 % Normal Sérum de Chèvre</td><td>VWR</td><td>100504-028</td><td>Pour tampon de blocage</td></tr><tr><td>Pré-tampon d’alcool 2 plis, Stérile, Moyenne</td><td>Medline</td><td>MDS090735</td><td></td></tr><tr><td>25uL Seringue Hamilton 702RN, sans aiguille</td><td>Fishcer Scientific</td><td>14824663</td><td>Seringues utilisées pour injecter des biomatériaux</td></tr><tr><td>25uL Pipette à déplacement positif</td><td>Gilson</td><td>M-25</td><td></td></tr><tr><td>2x Beam Expander, 400-650nm</td><td>Thorlabs</td><td>GBE02-A</td><td>Expandeur de faisceau laser</td></tr><tr><td>Plate-forme de scène réglable</td><td>Kopf Instruments</td><td>901</td><td></td></tr><tr><td>Anti-Glucose Transporter GLUT1 anticorps, lapin</td><td>Abcam</td><td>ab113435</td><td></td></tr><tr><td>Anti-Iba1 Anticorps, chèvre</td><td>abcam</td><td>ab5076</td><td></td></tr><tr><td>BD Vacutainer Safety-Lok Blood Collection Sets. 25G, 12"</td><td>Medsupply</td><td>367294</td><td>pour perfusions</td></tr><tr><td>BKF12- Feuille d’aluminium noir mat</td><td>Thorlabs</td><td>BKF12</td><td>Pour couvrir tout ce qui est réfléchissant lors de l’utilisation du laser.</td></tr><tr><td>Mini ciseaux Bone Iris - 3-1/2"</td><td>Instruments chirurgicaux Sklar</td><td>64-2035</td><td></td></tr><tr><td>C57BL/6 Mice</td><td>Jackson Laboratory</td><td>000664</td><td>8-12 semaines</td></tr><tr><td>Cage Assembly Rob</td><td>Thorlabs</td><td>ER3-P4</td><td>3 » Long, diamètre 6mm, paquet de 4 - pour fixer le laser au stérotax</td></tr><tr><td>Meules en acier au carbone -0,5mm de diamètre</td><td>Outils de sciences fines</td><td>19007-05</td><td>Pour créer un trou de bavure</td></tr><tr><td>Sulfate de chrome(III) de potassium dodécahydraté</td><td>VWR</td><td>EM1.01036.0250</td><td></td></tr><tr><td>Contrôleur compact pour lasers à queue de cochon</td><td>Thorlabs</td><td>CLD1010LP</td><td></td></tr><tr><td>cotons-tiges</td><td>VWR</td><td>89031-288</td><td></td></tr><tr><td>CP 25 pointes de pipette</td><td>Gilson</td><td>F148012</td><td></td></tr><tr><td>Donkey anti-chèvre IgG H& L (488)</td><td>abcam</td><td>ab150129</td><td></td></tr><tr><td>Âne Anti-lapin IgG H& L (647)</td><td>abcam</td><td>ab150075</td><td></td></tr><tr><td>Âne Anti-rat IgG H& L (555)</td><td>abcam</td><td>ab150154</td><td></td></tr><tr><td>EMS DPX Mountant</td><td>Elecron Microscopy Sciences</td><td>13512</td><td>Solution de montage pour lames</td></tr><tr><td>EMS Gelatin Powder Type A 300 Bloom</td><td>Electron Microscopy Sciences</td><td>16564</td><td>Pour le revêtement de gélatine</td></tr><tr><td>lames EMS Paraformaldéhyde, Granulaire</td><td>VWR</td><td>100504-162</td><td>Pour la fabrication de 45 PFA</td></tr><tr><td>ESD Worstation kit</td><td>Elmstat</td><td>WSKK5324SB</td><td>Besoin de configurer le laser</td></tr><tr><td>Plaque murale de banc en fibre, non filetée</td><td>Thorlabs</td><td>HCA3</td><td>Besoin de connecter le laser à l’arbre Kopf</td></tr><tr><td>FiberPort</td><td>Thorlabs</td><td>PAF-X-5-A</td><td>FC/APC& APC, f=4.6mm, 350-700nm, diamètre 0.75mm</td></tr><tr><td>Ciseaux fins - droits/tranchants-émoussés/10cm</td><td>Outils de science fine</td><td>14028-10</td><td></td></tr><tr><td>Anticorps GFAP, rat</td><td>Thermo Fisher Scientific</td><td>13-0300</td><td></td></tr><tr><td>Plaque chauffante</td><td>Kopf Instruments</td><td>HP-4M</td><td></td></tr><tr><td>ImmEdge Stylo barrière hydrophobe</td><td>Vector Laboratories</td><td>H-4000</td><td>Pour la coloration des lames</td></tr><tr><td>IMPAC 6-Integrated Multi Patient Anesthesia Center</td><td>VetEquip</td><td>901808</td><td></td></tr><tr><td>Coussinets de préparation à l’iode</td><td>Medx Supple</td><td>MED MDS093917H</td><td></td></tr><tr><td>Jewlers Forceps #5</td><td>GFS chemicals</td><td>46085</td><td></td></tr><tr><td>Lunettes de sécurité laser</td><td>Thorlabs</td><td>LG10B</td><td>Amber Lenses, 35 % de lumière visible (versions de lunettes disponibles également)</td></tr><tr><td>M27-1084 Powerful LED Dual Goose-neck</td><td>United Scope</td><td>LED-11C</td><td></td></tr><tr><td>Medical USP Grade Oxygen Airgas</td><td></td><td>OX USP250</td><td></td></tr><tr><td>Miltex Adson Pince à pansement, disséquante</td><td>Intefra Miltex</td><td>V96-118</td><td></td></tr><tr><td>Mini Cord/Cordless Small Animal Trimmer</td><td>Harvard aparatus</td><td>72-6110</td><td></td></tr><tr><td>Mini-pompe à débit variable</td><td>Thomas Scientific</td><td>70730-064</td><td>Pompe pour perfusions</td></tr><tr><td>Cerveau de souris Matrices, Coupes Coronales, 1mm</td><td>Kent Scientific</td><td>RBMA-200c</td><td>Pour les tranches TTC</td></tr><tr><td>Souris Gaz Anethésie Support de Tête Kopf</td><td>Instruments</td><td>923-B</td><td></td></tr><tr><td>Nanojet Boîtier de Contrôle</td><td>Chemyx</td><td>10050</td><td></td></tr><tr><td>En-tête de pompe Nanojet</td><td>Chemxy</td><td>10051</td><td>Fixer à un dispositif stéréotaxique pour l’injection de biomatériau</td></tr><tr><td>Aiguille RN 30G PT STY 3, 0,5 pouce</td><td>Fishcer Scientific</td><td></td><td></td>NC9459562</tr><tr><td>Barres auriculaires non rompantes 60&ordm ;</td><td>Kopf Instruments</td><td>922</td><td></td></tr><tr><td>Tampon PBS pH 7.4</td><td>VWR</td><td>97062 338</td><td></td></tr><tr><td>Laser pigtaled 520 nm, 100mW, 5G Pin</td><td>Thorlabs</td><td>LP520-MF100</td><td></td></tr><tr><td>Lames en verre à charge positive</td><td>Hareta</td><td>AHS90-WH</td><td></td></tr><tr><td>Compteur</td><td>d’énergie Thorlabs</td><td>PM100D</td><td>Utilisé pour mesurer votre sortie laser mW</td></tr><tr><td>Puralube Vet Ointment</td><td>Dr. Foster Smith</td><td>9N-76855</td><td></td></tr><tr><td>Sonde rectale Souris</td><td>kopf Instruments</td><td>Ret-3-ISO</td><td></td></tr><tr><td>Rose Bengal Dye 95 %</td><td>Sigma-Aldrich</td><td>330000-5G</td><td></td></tr><tr><td>Shaft Modified 8-32 trou fileté 1/2" profondeur</td><td>Kopf Instruments</td><td>1770-02</td><td>Pour connecter le laser à un dispositif stérotaxique</td></tr><tr><td>Capteur de puissance à photodiode mince</td><td>Thorlabs</td><td>S130VC</td><td>Utilisé avec énergie de puissance mètre</td></tr><tr><td>SM1-Threaed 30 mm Cage Plate 0.35" d’épaisseur 2 Rétention</td><td>Thorlabs</td><td>CP02</td><td>Pour connecter l’expanseur laser</td></tr><tr><td>Sol-M U-100 Seringue insuline avec marquages unitaires 0.5 mL</td><td>VWR</td><td>10002-726</td><td>Pour injecter rose bengale</td></tr><tr><td>StainTray Slide Staining System</td><td>Simport Scientific</td><td>M920-2</td><td>Pour la coloration des lames</td></tr><tr><td>Dispositif stérotaxique</td><td>Kopf Instruments</td><td>940</td><td>Instrument stéréotaxique pour petits animaux</td></tr><tr><td>Pince Adson pour étudiants - 1x2 dents</td><td>Outils pour les sciences fines</td><td>91127-12</td><td></td></tr><tr><td>Pince pour les étudiants - tiges droites/larges</td><td>Outils pour les sciences fines</td><td>91113-10</td><td></td></tr><tr><td>Contrôleur de température</td><td>Kopf Instruments</td><td>TCAT-2LV</td><td></td></tr><tr><td>Tissue-Tek OCT</td><td>composé VWR</td><td>25608-930</td><td></td></tr><tr><td>Triton X-100</td><td>VWR</td><td>97063-864</td><td></td></tr><tr><td>Pince de support supérieur</td><td>Kopf Instruments</td><td>1770-c</td><td>Pour connecter le laser à un dispositif stérotaxique</td></tr><tr><td>Vetbond Tissue Adhessive 3mL</td><td>Santa Cruz Biotechnology</td><td>sc-361931</td><td></td></tr><tr><td>Vogue Professional My Manucurist</td><td>Bargin Source</td><td>6400</td><td>Pour Burrs</td></tr><tr><td>VWR Stérilisateurs à billes</td><td>VWR VWR</td><td>75999-328</td><td></td></tr><tr><td>Tissue Tek OCT composé</td><td>Sakura</td><td>4583</td><td>Pour l’enrobage de tissus</td></tr></tbody></table>

injection d’échafaudages de biomatériaux d’hydrogel au cerveau après un avc

Injection of Hydrogel Biomaterial Scaffolds to The Brain After Stroke

L’AVC est la principale cause d’invalidité et la cinquième cause de décès aux États-Unis. Environ 87% de tous les accidents vasculaires cérébraux sont des accidents vasculaires cérébraux ischémiques et sont définis comme le blocage soudain d’un vaisseau fournissant du sang au cerveau. Dans les minutes qui suivent le blocage, les cellules commencent à mourir et entraînent des lésions tissulaires irréparables. Les traitements thérapeutiques actuels se concentrent sur l’élimination des caillots ou la lyse pour permettre la reperfusion et prévenir des lésions cérébrales plus graves. Bien que la plasticité cérébrale transitoire puisse sauver une partie des tissus endommagés au fil du temps, des fractions importantes de patients se retrouvent avec des déficits neurologiques qui ne disparaîtront jamais. Il y a un manque d’options thérapeutiques pour traiter les déficits neurologiques causés par un ACCIDENT VASCULAIRE CÉRÉBRAL, ce qui souligne la nécessité de développer de nouvelles stratégies pour traiter cette population croissante de patients. Les biomatériaux injectables sont actuellement conçus pour améliorer la plasticité cérébrale et améliorer la réparation endogène grâce à l’administration d’agents actifs ou de cellules souches. Une méthode pour tester ces approches consiste à utiliser un modèle d’AVC de rongeur, à injecter le biomatériau dans le noyau de l’AVC et à évaluer la réparation. Connaître l’emplacement précis du noyau de l’AVC est impératif pour le traitement précis après l’AVC, par conséquent, un modèle d’AVC qui aboutit à un emplacement prévisible de l’AVC est préférable pour éviter le besoin d’imagerie avant l’injection. Le protocole suivant couvrira comment induire un accident vasculaire cérébral photothrombotique, comment injecter un hydrogel de manière contrôlée et précise, et comment extraire et cryosectionner le cerveau tout en gardant le biomatériau intact. En outre, nous soulignerons comment ces mêmes matériaux d’hydrogel peuvent être utilisés pour la co-administration de cellules souches. Ce protocole peut être généralisé à l’utilisation d’autres biomatériaux injectables dans le noyau de l’AVC.

Le but de cette méthode était de démontrer comment injecter des biomatériaux dans le cerveau après un AVC. Un modèle photothrombotique avec du bengale rose et un laser de 520 nm a été utilisé pour contrôler l’orientation de la lésion de course en taille et en emplacement. Cinq jours après l’AVC, l’infarctus a pu être visualisé pendant la chirurgie(Figure 1B)et par TTC et imagerie des lames colorées par IHC (Figure 2). Une augmentation du diamètre du laser avec u...

L’AVC est un problème mondial avec des options de traitement minimales et aucune thérapie clinique actuelle pour régénérer le tissu cérébral perdu. Nous décrivons ici des méthodes pour créer un AVC photothrombotique précis dans le cortex moteur des rongeurs et l’injection ultérieure de biomatériaux d’hydrogel pour étudier leurs effets sur la régénération tissulaire après un AVC.

Injection d’échafaudages de biomatériaux d’hydrogel au cerveau après un AVC

Stroke is the leading cause of disability and the fifth-leading cause of death in the United States. Approximately 87% of all strokes are ischemic strokes ...

L’injection reproductible d’échafaudages d’hydrogel dans un modèle d’AVC ischémique chez le rongeur permet d’étudier comment les matériaux et autres traitements administrent l’effet de la réparation du cerveau, de la régénération et de l’amélioration du comportement. Les principaux avantages de l’utilisation du modèle d’AVC photothrombotique pour étudier les interactions entre les matériaux du cerveau sont l’emplacement et la taille reproductibles. Ce qui permet l’injection de matériaux dans le noyau de l’AVC sans imagerie.Le modèle d’AVC photothrombotique est conçu pour être un modèle pertinent pour l’AVC ischémique, dans une région du cerveau, le cortex moteur, qui est couramment affectée par l’AVC chez l’homme. Et de fournir une lecture comportementale pertinente pour l’AVC, qui est le contrôle moteur du membre. Afin d’évaluer un candidat thérapeutique, comme un hydrogel biopolymère.Confirmer une absence de réponse au pincement des orteils chez une souris anesthésiée. Ensuite, pesez la souris pour déterminer la quantité de colorant Rose Bengal à injecter et fixez-la à un dispositif stéréotaxique équipé d’un laser. Après avoir rasé et désinfecté la zone chirurgicale, utilisez une

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Source : Wilson, K.L., et al. Injection d’échafaudages de biomatériau d’hydrogel dans le cerveau après un accident vasculaire cérébral.  J. Vis. Exp. (2020)Cette vidéo démontre l’injection stéréotaxique d’un hydrogel dans le noyau de l’AVC d’une souris post-AVC, soulignant son rôle dans la formation d’un échafaudage qui imite la matrice extracellulaire, favorise l’infiltration cellulaire et soutient l’angiogenèse, soulignant son potentiel neurothérapeutique dans le rétablissement de l’AVC.

Injection stéréotaxique d’hydrogel dans un modèle murin post-AVC

des matrices de fibrine contenant des facteurs de croissance ont été utilisés pour conserver des cellules souches neurales dans des sites greffés complète de transection de la moelle épinière. Cellules greffées complètement remplis la cavité de la lésion et différenciées en plusieurs types de cellules neurales, y compris les neurones qui s'étendaient axones dans la moelle épinière hôte sur de longues distances.

Promotion de la survie et de la différenciation des cellules souches neurales de fibrine et du facteur de croissance Cocktails après Spinal Cord Injury sévère

Ce protocole vise à atténuer la limitation de la mauvaise greffe cellulaire pour le traitement des infarctus du myocarde par cellules souches grâce à l’utilisation d’un système d’hydrogel et d’une colle à base de fibrine. Grâce à cette approche, le contact entre les cellules et les tissus après l’infarctus peut être maintenu, ce qui augmente le potentiel thérapeutique des agents bénéfiques sur le site de la lésion.

Un hydrogel construire et de fibrine-colle à base son approche et proposer Therapeutics dans un infarctus du myocarde murin modèle.

Afin d’étudier la réorganisation du cerveau dans des conditions pathologiques, nous avons utilisé des pompes miniosmotiques pour l’administration directe de protéines dans le cerveau, en contournant la barrière hémato-encéphalique. Des traceurs de voies sont ensuite injectés pour étudier les altérations de la connectivité cérébrale sous l’influence de la protéine.

Implantation de miniosmotique Pompes et livraison de traceurs pour étudier la réorganisation des secteurs du cerveau dans des conditions physiopathologiques

Nous vous présentons le développement des faisceaux auto-assemblés, en trois dimensions du corps alignés longitudinalement astrocytaires cellulaires et des processus dans un enrobage de nouveaux biomatériaux. Ces engineered « vie échafaudages », présentant le diamètre micron-échelle mais qui s’étend de centimètres de longueur, peut servir de bancs d’essai pour étudier les mécanismes du développement neurologique ou faciliter la neurorégénération en direction de la migration neuronale et/ou...

Dimensions des tissus conçus alignement Astrocyte réseaux pour récapituler les mécanismes du développement et de faciliter la régénération du système nerveux

Ici, nous présentons un protocole pour la culture 3D du rat encéphales gliales, y compris les astrocytes, la microglie et les oligodendrocytes. Nous démontrons la culture cellulaire primaire, synthèse de l’acide hyaluronique methacrylated (HAMA) hydrogel, HAMAphoto-polymérisation et le cell encapsulation et traitement d’imagerie microscopique confocal et balayage électronique des échantillons.

Amélioré l’Hydrogel 3D des Cultures de cellules gliales primaires pour In Vitro la modélisation du neuro-inflammation

Ce protocole décrit la fabrication d’un système de culture cellulaire pour permettre à l’ensemencement des cellules souches sur un échafaudage de polymère conducteur pour in vitro la stimulation électrique et subséquent en vivo l’implantation de l’échafaudage graines cellules souches en utilisant un technique mini-invasive.

Échafaudage conductrice de moduler et de fournir des cellules souches

La thérapie à base de cellules souches est apparue comme une stratégie efficace pour réparer les tissus cardiaques blessés après l’infarctus du myocarde. Nous fournissons une application in vivo optimale pour la transplantation de cellules souches utilisant des hydrogels de gélatine qui peuvent être enzymatiquement liés.

Transplantation intramyocardique d’hydrogels injectables à chargement MSC après l’infarctus du myocarde dans un modèle murin

Dans ce manuscrit, nous démontrons la préparation d’une bioencre d’hydrogel biohybride contenant du graphène pour une utilisation dans l’ingénierie tissulaire périphérique. À l’aide de ce matériau biohybride 3D, le protocole de différenciation neuronale des cellules souches est effectué. Cela peut être une étape importante dans l’introduction de biomatériaux similaires à la clinique.

Préparation et caractérisation de bio-encre d’hydrogel biohybride 3D à base de graphène pour la neuro-ingénierie périphérique

Le présent protocole établit un modèle post-résection de rechute de glioblastome (GBM) utilisant la microscopie pour étudier l’effet thérapeutique d’un hydrogel injectable et biosensible in vivo.

Modèle post-résection de rechute de glioblastome pour les examens thérapeutiques de l’hydrogel

Dans cette étude, des hydrogels composites mimétiques nerveux ont été développés et caractérisés qui peuvent être utilisés pour étudier et capitaliser sur le comportement pro-régénératif des cellules souches dérivées du tissu adipeux pour la réparation des lésions de la moelle épinière.

Développement de thérapies combinatoires pour les lésions de la moelle épinière à l’aide de l’administration de cellules souches

Découvrez l'injection d'échafaudages d'hydrogel dans un modèle d'AVC photothrombotique chez le rongeur. Cette méthode permet d'étudier la régénération tissulaire et la récupération motrice post-AVC.

Injection d’échafaudages de biomatériaux d’hydrogel au cerveau après un AVC

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