Name: Acupuncture dans un modèle de rat de l’asthme (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2020-08-25T15:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 14 s
Description: Découvrez une méthode d'acupuncture pour étudier l'asthme chez le rat en utilisant une plateforme élevée et la plethysmographie corporelle. Ce protocole permet de mesurer les fonctions respiratoires en temps réel.

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Ces travaux ont été soutenus par la National Natural Science Foundation of China (no 81922076, 81973951, 81873373), projet de construction de l’innovation collaborative de Shanghai (No. ZYJKFW201811010, ZYJKFW201701005).

Toutes les expériences sur les animaux ont été examinées et approuvées par le Comité sur l’éthique des expériences animales de l’Université de médecine traditionnelle chinoise de Shanghai (numéro de dédouanement éthique PZSHUTCM190308020).
1. Fabrication de la plate-forme haute
<ol><li>Réglez la longueur et la largeur du dispositif de soutien à 86 cm x 17 cm (figure 1).</li>
	<li>Fixez l’appareil de connexion verticalement à l’appareil de soutien. Le dispositif de raccordement doit avoir une longueur d’environ 30 cm pour empêcher le rat de courir jusqu’à la surface supérieure de la plate-forme haute et avoir une largeur de 14 cm.</li>
	<li>Fixez la pédale horizontale (5 cm x 5 cm) à l’appareil de raccordement. La hauteur suspendue au bas de la pédale horizontale doit être supérieure ou égale à 50 cm. REMARQUE : Selon le nombre de rats expérimentaux, plusieurs pédales horizontales peuvent être utilisées, avec un rat placé sur chaque pédale.</li>
</ol>2. Établissement d’un modèle de rat de l’asthme
<ol><li>Sensibilisation des rats avec OVA<ol>
<li>Préparez la solution de sensibilisation le jour 0. Préparer chaque 1 mL de la solution de sensibilisation avec 1 mg d’OVA et 10 mg d’hydroxyde d’aluminium, avec la solution saline normale comme solvant.</li>
		<li>Injectez intraperitoneally chaque rat avec 1 mL de la solution de sensibilisation le jour 0. Dessinez la solution de sensibilisation avec une seringue appropriée pour une utilisation ultérieure.</li>
		<li>Prenez la queue et soulevez le rat, placez-le sur une surface rugueuse, et tirez doucement la queue en arrière. Saisissez la peau des oreilles et du cou avec le pouce gauche et l’index tout en retenant étroitement la peau arrière avec les trois doigts et paumes restants (veillez à vous abstenir d’appliquer une force excessive qui étouffera le rat).</li>
		<li>Avec la main droite, effectuer une injection intraperitoneal dans le rat avec la seringue préparée avec 1 mL de la solution de sensibilisation.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Rats provocants avec OVA<ol>
<li>Sélectionnez une boîte avec un couvercle (la longueur, la largeur et la hauteur sont de 39 cm x 28 cm x 23 cm), et percez un petit trou sur le côté. Connectez la boîte scellée, la tasse nébulisante et le nébuliseur de compression avec un tube en caoutchouc( Figure supplémentaire 1). REMARQUE : La taille nébulisée des particules du nébuliseur comprimé est de 1 à 5 μm, le taux de nébulisation est supérieur à 0,2 mL/min, et la pression ultime est de 205 kPa.</li>
		<li>Le 14ème jour après la sensibilisation, ouvrez le couvercle de la boîte scellée maison et placez le rat dans la boîte (la boîte peut accueillir 5 rats), puis mettez la boîte scellée dans une armoire de biosécurité.</li>
		<li>Préparez la solution de défi. Bien mélanger 300 mg d’OVA avec 30 mL de solution saline normale.</li>
		<li>Allumez le nébuliseur ultrasonique et ajoutez 30 mL de la solution de défi dans la tasse nébulisante. Ajuster la posologie de la solution défi et le nombre de rats en fonction du volume de la boîte scellée maison.</li>
		<li>Répétez la nébulisation plusieurs fois (une fois par jour) ou ajustez la procédure en fonction de la gravité des symptômes d’asthme.</li>
	</ol>
</li>
</ol>3. Traitement d’acupuncture
<ol><li>Choisissez des acupoints, y compris GV14, BL12 bilatérale et bilatérale BL13, selon la théorie de la médecine traditionnelle chinoise pour le traitement de l’asthme (Figure supplémentaire 2). Administrer l’acupuncture manuelle le jour 2 et effectuer une fois tous les deux jours pour un total de 7 séances( Figure 2) .
	<ol>
<li>Acupuncture du GV14 situé entre la septième vertèbre cervicale et la première vertèbre thoracique (le creux de l’omoplate), sur la ligne médiane du dos (figure 3).</li>
		<li>Acupuncture du BL13 situé sous la troisième vertèbre thoracique, des deux côtés des espaces intercostals (bord inférieur de l’omoplate).</li>
		<li>Acupuncture du BL12 situé sous la deuxième vertèbre thoracique, des deux côtés des espaces intercostals (au-dessous de l’omoplate, position identifiée selon BL13).</li>
	</ol>
</li>
	<li>Saisissez les rats et placez-les sur la plate-forme haute.</li>
	<li>Tenez l’aiguille en acier inoxydable jetable (0,3 mm x 13,0 mm, figure supplémentaire 3)avec le pouce et l’index de la main droite, et appuyez sur l’arrière du rat avec la paume de la main droite. REMARQUE : Les aiguilles jetables ne doivent être utilisées qu’une seule fois. Parce que l’utilisation répétée va émousser l’aiguille, ce qui conduit à une douleur accrue chez les rats.</li>
	<li>Touchez la dépression au milieu du bord supérieur (GV14) ou le bord inférieur de l’omoplate (BL12 et BL13), puis piquez doucement la peau du rat avec la pointe de l’aiguille pour localiser les acupoints.</li>
	<li>Insérez rapidement l’aiguille après avoir déterminé l’emplacement spécifique de l’acupoint et retirez rapidement la main droite.</li>
	<li>A tordu uniformément les aiguilles d’environ 360° à une vitesse de 60 fois/min pendant 10 à 20 s, manipulez-les toutes les 5 minutes, puis retirez-les après 20 à 30 min(figure supplémentaire 4).</li>
</ol>4. La mesure Penh
<ol><li>Préparer la méthacholine : Placer 100 mg de méthacholine dans un tube de centrifugeuse de 5 mL et ajouter le PBS à un volume de 2 mL (50 mg/mL de méthacholine). Ensuite, diluer la solution de méthacholine de 50 mg/mL à 25 mg/mL, 12,5 mg/mL, 6,25 mg/mL et 3,125 mg/mL.</li>
	<li>Inspection des instruments<ol>
<li>Allumez l’amplificateur de signal (le système de distribution des aérosols et le système d’alimentation par biais de rongeurs sont tous éteints, et le connecteur de nébulisation est fermé).</li>
		<li>Vérifiez les canaux : Cliquez sur Calibrate,retournez la ligne de base d’ajustement grossier à 0 et passez à la position de courant direct (DC). Affiner la ligne de base à 0 et injecter 5 mL de gaz avec une seringue. Ensuite, passez à la position de courant alternatif (AC).</li>
		<li>Après vérification des canaux, assurez-vous que la valeur d’erreur est inférieure à 0,5 %.</li>
	</ol>
</li>
	<li>Paramètres de réglage<ol>
<li>Allumez le système de distribution des aérosols et le système d’approvisionnement en flux de biais de rongeurs. Ajuster le débit à 4,5 mL en fonction du niveau de liquide sur la boule de mercure.</li>
		<li>Cliquez sur Créer des options d’étude et sélectionnez Dose Response Study, sélectionnez Rat d’espèces et cliquez sur Suivant.</li>
		<li>Sélectionnez Simple Dose List, réglez le nombre de doses à 6 et cliquez sur Suivant.</li>
		<li>Sélectionnez les paramètres Penh et Area : Réglez le temps d’adaptation des animaux à 5 min, le temps de nébulisation à 2 min, le temps de réponse à 3 min et le temps de récupération à 2 min.</li>
		<li>Ajoutez séquentiellement les solutions suivantes au nébuliseur (200 μL par rat) : méthacholine (0 mg/mL, 3,125 mg/mL, 6,25 mg/mL, 12,5 mg/mL, 25 mg/mL et 50 mg/mL). Des changements en temps réel dans Penh peuvent être observés( Figure 4).</li>
		<li>Une fois que les 6 solutions avec différentes concentrations ont été réagies, cliquez sur Fichier et Session de fin pour compléter l’expérience.</li>
	</ol>
</li>
</ol>

<ol><li>Papi, A., Brightling, C., Pedersen, S. E., Reddel, H. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Asthma%5BTitle%5D)+AND+%22Lancet%22%5BJournal%5D)">Asthma.</a> Lancet. 391 (10122), 783-800 (2018).</li>
<li>Global Initiative for Asthma, 2019. Global strategy for asthma management and prevention. , Available from: 
 <a target="_blank" href="https://ginasthma.org/gina-reports/">https://ginasthma.org/gina-reports/</a> (2019).</li>
<li>Enilari, O., Sinha, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+Global+Impact+of+Asthma+in+Adult+Populations%5BTitle%5D)+AND+%22Annals+of+Global+Health%22%5BJournal%5D)">The Global Impact of Asthma in Adult Populations.</a> Annals of Global Health. 85 (1), (2019).</li>
<li>Global Initiative for Asthma, 2020. Global strategy for asthma management and prevention. , Available from: 
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<li>Yang, Y. Q., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Considerations+for+use+of+acupuncture+as+supplemental+therapy+for+patients+with+allergic+asthma%5BTitle%5D)+AND+%22Clinical+Reviews+in+Allergy+%26+Immunology%22%5BJournal%5D)">Considerations for use of acupuncture as supplemental therapy for patients with allergic asthma.</a> Clinical Reviews in Allergy & Immunology. 44 (3), 254-261 (2013).</li>
<li>Nurwati, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Reduction+of+interleukin-17+level+by+acupuncture+at+Feishu+%28BL13%29+is+strengthened+by+acupuncture+at+Zusanli+%28ST36%29+in+a+mouse+model+of+chronic+asthma%3A+An+experimental+study%5BTitle%5D)+AND+%22Medical+Acupuncture%22%5BJournal%5D)">Reduction of interleukin-17 level by acupuncture at Feishu (BL13) is strengthened by acupuncture at Zusanli (ST36) in a mouse model of chronic asthma: An experimental study.</a> Medical Acupuncture. 27 (4), 278-282 (2015).</li>
<li>Nurwati, I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Improvement+in+inflammation+and+airway+remodelling+after+acupuncture+at+BL13+and+ST36+in+a+mouse+model+of+chronic+asthma%5BTitle%5D)+AND+%22Acupuncture+in+Medicine%22%5BJournal%5D)">Improvement in inflammation and airway remodelling after acupuncture at BL13 and ST36 in a mouse model of chronic asthma.</a> Acupuncture in Medicine. 37 (4), 228-236 (2019).</li>
<li>Reddy, A. T., Lakshmi, S. P., Reddy, R. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Murine+model+of+allergen+induced+asthma%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Murine model of allergen induced asthma.</a> Journal of Visualized Experiments. (63), e3771(2012).</li>
<li>Zhou, D. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Metallothionein-2+is+associated+with+the+amelioration+of+asthmatic+pulmonary+function+by+acupuncture+through+protein+phosphorylation%5BTitle%5D)+AND+%22Biomedicine+%26+Pharmacotherapy%22%5BJournal%5D)">Metallothionein-2 is associated with the amelioration of asthmatic pulmonary function by acupuncture through protein phosphorylation.</a> Biomedicine & Pharmacotherapy. 123, 109785(2020).</li>
<li>Yin, L. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Transgelin-2+as+a+therapeutic+target+for+asthmatic+pulmonary+resistance%5BTitle%5D)+AND+%22Science+Translational+Medicine%22%5BJournal%5D)">Transgelin-2 as a therapeutic target for asthmatic pulmonary resistance.</a> Science Translational Medicine. 10 (427), (2018).</li>
<li>Shin, Y. S., Takeda, K., Gelfand, E. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Understanding+asthma+using+animal+models%5BTitle%5D)+AND+%22Allergy+Asthma+%26+Immunology+Research%22%5BJournal%5D)">Understanding asthma using animal models.</a> Allergy Asthma & Immunology Research. 1 (1), 10-18 (2009).</li>
<li>Cui, K. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Electro-acupuncture+relieves+chronic+visceral+hyperalgesia+in+rats%5BTitle%5D)+AND+%22Neuroscience+Letters%22%5BJournal%5D)">Electro-acupuncture relieves chronic visceral hyperalgesia in rats.</a> Neuroscience Letters. 376 (1), 20-23 (2005).</li>
<li>Tobin, J. R., Martin, L. D., Breslow, M. J., Traystman, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Selective+anesthetic+inhibition+of+brain+nitric+oxide+synthase%5BTitle%5D)+AND+%22Anesthesiology%22%5BJournal%5D)">Selective anesthetic inhibition of brain nitric oxide synthase.</a> Anesthesiology. 81 (5), 1264-1269 (1994).</li>
<li>Dimitrov, N., Sivrev, D., Atanasova, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Method+of+rat+immobilization+during+experimental+acupuncture%5BTitle%5D)+AND+%22Scripta+Scientifica+Medica%22%5BJournal%5D)">Method of rat immobilization during experimental acupuncture.</a> Scripta Scientifica Medica. 45, 105-108 (2013).</li>
<li>Aguilar, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((emotional+reactivity+and+fear+of+heights%3A+a+factor+analytic+map+from+a+large+F%282%29+intercross+of+Roman+rat+strains%5BTitle%5D)+AND+%22Brain+Research+Bulletin%22%5BJournal%5D)">emotional reactivity and fear of heights: a factor analytic map from a large F(2) intercross of Roman rat strains.</a> Brain Research Bulletin. 57 (2), 17-26 (2002).</li>
<li>Lai, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Proteomic+response+to+acupuncture+treatment+in+spontaneously+hypertensive+rats%5BTitle%5D)+AND+%22PloS+One%22%5BJournal%5D)">Proteomic response to acupuncture treatment in spontaneously hypertensive rats.</a> PloS One. 7 (9), 44216(2012).</li>
<li>Niu, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+novel+uni-acupoint+electroacupuncture+stimulation+method+for+pain+relief%5BTitle%5D)+AND+%22Evidence-Based+Complementary+and+Alternative+Medicine%22%5BJournal%5D)">A novel uni-acupoint electroacupuncture stimulation method for pain relief.</a> Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine. 2011, 209879(2011).</li>
<li>McFadden, E. R., Luparello, T., Lyons, H. A., Bleecker, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+mechanism+of+action+of+suggestion+in+the+induction+of+acute+asthma+attacks%5BTitle%5D)+AND+%22Psychosomatic+Medicine%22%5BJournal%5D)">The mechanism of action of suggestion in the induction of acute asthma attacks.</a> Psychosomatic Medicine. 31 (2), 134-143 (1969).</li>
<li>Savov, J. D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Ozone-induced+acute+pulmonary+injury+in+inbred+mouse+strains%5BTitle%5D)+AND+%22American+Journal+of+Respiratory+Cell+and+Molecular+Biology%22%5BJournal%5D)">Ozone-induced acute pulmonary injury in inbred mouse strains.</a> American Journal of Respiratory Cell and Molecular Biology. 31 (1), 69-77 (2004).</li>
</ol>

Les auteurs n’ont rien à divulguer.

Les acupoints GV14, bilatéraux BL12 et bilatéraux BL13 utilisés dans cette étude sont situés à l’arrière, et donc la plate-forme haute est appropriée pour fixer les rats. Dans d’autres études, une méthode de fixation adéquate doit être choisie en fonction de la position des acupoints15. Pour les acupoints sur l’abdomen, le rat peut être placé vers le bas dans un cône noir (semblable à un sac à pâtisserie utilisé par les boulangers)17. Une chaîne est fixée au cône de retenue...

L’asthme est une maladie chronique caractérisée par la bronchoconstriction et l’hyperréactivité des voiesrespiratoires 1. Environ 339,4 millions de personnes dans le monde reçoivent un diagnosticd’asthme 2. La prévalence de l’asthme augmente à l’échelle mondiale, avec 100 millions de nouveaux cas attendus au cours de laprochaine décennie 3. Les corticostéroïdes inhalés et les β à action β2-agonistes ne contrôlent pas efficacement les symptômes de tous les patients4. Par conséquent, l’utilisation de thérapies alternatives telles que l’acupuncture pour traiter l’asthme a reçu une attentionaccrue 5. Une méthode efficace pour traiter l’asthme est d’aiguiller GV14 (Dazhui), bilatérale BL12 (Fengmen) et bilatérale BL13 (Feishu)6. L’acupuncture réduit considérablement les niveaux d’immunoglobuline sécrétoire A (SIgA) dans la salive et les sécrétions nasales des patients souffrant d’asthme allergique et réduit le nombre d’éosinophiles sanguins périphériques avec un taux effectif total de 85%6. L’acupuncture à BL13 et ST36 (Zusanli) chez les souris souffrant d’asthme chronique diminue le niveau d’IL-17 de 40% et diminue l’épaisseur musculaire lisse de 33% par rapport à celle du groupe ovalbumin (OVA), et soulageant ainsi les symptômes d’inflammation7,8. Cependant, le mécanisme du traitement d’acupuncture pour l’asthme n’est pas complètement clair.
Les modèles animaux sont un outil important pour la recherche surl’asthme 9 parce que le modèle animal peut être utilisé pour la mesure continue de la fonction respiratoire afin d’évaluer l’efficacité du traitement del’asthme 10. Pendant ce temps, les études de la pathophysiologie de l’asthme nécessitent des échantillons d’essai, y compris des échantillons de la trachée, poumon et bronchoalveolar lavage pour vérifier les changements dans les niveaux des facteursclés 11. Les modèles de rat de l’asthme sont couramment utilisés pour évaluer la pathophysiologie de l’asthme parce qu’ils produisent des réponses durables des voies respiratoires et montrent des réponses immédiates et tardives des voiesrespiratoires 12. Cependant, en raison de la stimulation expérimentale répétée, les rats deviennent souvent irritables. Par conséquent, une méthode appropriée pour fixer les rats est nécessaire. Les méthodes couramment utilisées pour la fixation des rats comprennent l’anesthésie et lafixation 13. Bien que la méthode d’anesthésie offre une meilleure exposition des acupoints, elle peut affecter la conduction nerveuse et finalement affecter les résultats expérimentaux14. La méthode de liaison n’induit pas les mêmes effets physiologiques que l’anesthésie, mais les rats retenus éprouveront une tension musculaire squelettique. En outre, l’aiguille ne peut pas facilement atteindre la positiondésignée 15. Ici, nous introduisons une plate-forme haute qui peut être utilisé pour fixer les rats sans les restreindre et exposer pleinement les acupoints sur le dos. Les rats peuvent être placés sur la plate-forme élevée pendant l’administration de l’acupuncture. La plate-forme haute est capable d’accueillir le rat seulement pendant qu’il est debout, et comme il est placé à une certaine distance du sol, les rats ne se déplaceront pas en raison d’une peur deshauteurs 16.
Cet article décrit en détail la fabrication de la plate-forme haute, la mise en place d’un modèle de rat de l’asthme, le fonctionnement d’un rat sur la plate-forme haute et la mesure de la fonction respiratoire à l’aide d’un système de pléthysmographie du corps entier (WBP).

<table><tbody><tr><td>Aiguille d’acupuncture 0,3 mm x 13,0 mm</td><td>Chine Suzhou Medical Device Factory</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Al(OH)3</td><td>American Thermo</td><td>77161</td><td></td></tr><tr><td>Nébuliseur à compression</td><td>Jiangsu Lude Medical Electronics Co., Ltd.</td><td>NB-212C</td><td></td></tr><tr><td>Fine Pointe V2.0</td><td>American Buxco</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Unité de séchage de gaz de laboratoire</td><td>American Drierite</td><td>26800</td><td></td></tr><tr><td>Méthacholine</td><td>American Sigma</td><td>MKCF6054</td><td></td></tr><tr><td>Ovalbumine</td><td>American Sigma</td><td>A5503-25G</td><td></td></tr><tr><td>Solution tampon de phosphate (1x)</td><td>Gelifesciences</td><td>SH30256.01</td><td></td></tr><tr><td>Boîte scellée</td><td>IRIS Corporation of Japan</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Système de mesure de la fonction respiratoire pléthysmographie</td> corps <td>entier American Buxco</td><td></td><td></td></tr></tbody></table>

acupuncture dans un modèle de rat de l’asthme

Acupuncture in a Rat Model of Asthma

Une plate-forme haute peut fixer les rats sans restriction et exposer complètement les acupoints sur le dos pendant la manipulation d’acupuncture. Cet article décrit les méthodes de fabrication de la plate-forme haute, établit un modèle de rat de l’asthme et mesure les changements dans la fonction respiratoire à l’aide d’un système non invasif et en temps réel de pléthysmographie du corps entier (WBP).

Avec l’acupuncture au GV14, le BL12 bilatéral et les points bilatéraux de BL13, le rat maintient une position encline. Le rat ne peut tordre sa tête qu’à l’extérieur et non à l’intérieur parce qu’une direction est bloquée par une planche de bois (figure 5).
À mesure que la concentration de méthacholine augmentait, Penh montre une tendance à la hausse et le taux de croissance augmente graduellement. À des concentrations de 3,125 mg/mL, 6,25 mg/mL, 12,5 mg/mL, 25 mg...

Acupuncture dans un modèle de rat de l’asthme

A high platform can fix rats without restriction and completely expose the acupoints on the back during acupuncture manipulation. This article describes ...

L’acupuncture est une méthode efficace pour traiter l’asthme. Bien que les mécanismes sous-jacents ne soient pas clairs. Ce protocole imite l’acupuncture en clinique pour étudier ces mécanismes dans un modèle animal.Le principal avantage de cette technique est que la plate-forme haute peut être utilisée pour fixer les rats sans restriction, permettant une exposition complète des points d’acupuncture dorsaux. Les débutants doivent avoir des compétences de base en manipulation des rats et doivent s’entraîner à insérer les aiguilles d’acupuncture dans un morceau de carton avant d’essayer de traiter les animaux. La visualisation de la technique aidera les débutants à se familiariser avec les compétences nécessaires pour mener à bien l’expérience.La longueur et la largeur du dispositif de support doivent être de 86 par 17 centimètres. Fixez verticalement un dispositif de connexion de 30 centimètres de long sur 14 centimètres de large au dispositif de support et fixez une pédale horizontale de cinq centimètres sur cinq centimètres au dispositif de connexion. La hauteur suspendue au bas de la pédale horizontale doit être supérieure ou égale à 50 centimètres.Pour la sensibilisation aux OVA, saisissez et soulevez la queue d’un rat adulte et placez l’animal sur une surface rugueuse tout en tirant doucement sur la queue. Saisissez fermement mais doucement la peau des oreilles et du cou avec le pouce et l’index gauches tout en tenant fermement la peau du dos avec les trois doigts restants et la paume et utilisez la main droite pour injecter par voie intrapéritonéale un millilitre de solution de sensibilisation fraîchement préparée dans l’abdomen du rat. Le 14e jour après la sensibilisation, percez un petit trou sur le côté d’une boîte de 39 x 28 x 23 centimètres et utilisez un tube en caoutchouc pour connecter la boîte à une coupelle de nébulisation et à un nébuliseur à compression.Placez le rat dans la boîte et placez la boîte dans une enceinte de biosécurité. Allumez le nébuliseur à ultrasons et chargez 30 millilitres d’OVA de 300 milligrammes fraîchement préparés dans une solution saline dans la tasse de nébulisation. La nébulisation peut être répétée plusieurs fois dans la journée ou en fonction de la sévérité des symptômes d’asthme à induire.Pour le traitement de l’acupuncture de l’animal asthmatique, sélectionnez les points d’acupuncture, y compris GV 14, BIL 12 et BL 13 bilatéral, selon la théorie de la médecine traditionnelle chinoise pour traiter l’asthme, et administrez l’acupuncture manuelle le deuxième jour et tous les deux jours pour un total de sept séances après l’établissement de l’asthme. Pour le placement de l’aiguille, transférez le rat sur la plate-forme haute et en saisissant le manche d’une aiguille en acier inoxydable jetable avec le pouce et l’index de la main dominante, appuyez fermement sur le dos du rat avec la paume de la main. Pour le placement de l’aiguille GV 14, touchez la dépression au milieu du bord supérieur de l’omoplate entre la septième vertèbre cervicale et la première vertèbre thoracique sur la ligne médiane du dos et piquez doucement la peau avec la pointe de l’aiguille pour localiser le point d’acupuncture.Ensuite, insérez rapidement l’aiguille et retirez rapidement la main droite. Placez les aiguilles BL 13 sous la troisième vertèbre thoracique des deux côtés des espaces intercostaux et placez les aiguilles BL 12 sous la deuxième vertèbre thoracique des deux côtés des espaces intercostaux, comme démontré. Lorsque toutes les aiguilles ont été placées, tournez chaque aiguille à 360 degrés, 60 fois sur une période de 10 à 20 secondes, toutes les cinq minutes pendant 20 à 30 minutes avant de retirer les aiguilles.Pour mesurer Penh chez les animaux traités par acupuncture. Allumez d’abord l’amplificateur de signal et cliquez sur calibrer pour ramener la ligne de base de réglage de trajectoire à zéro. Passez à la position de courant continu et réglez la ligne de base à zéro.À l’aide d’une seringue, injectez cinq millilitres d’air avant de passer en position de courant alternatif. Après avoir vérifié les canaux, assurez-vous que la valeur d’erreur est inférieure à 0,5 %Ensuite, allumez les systèmes de distribution d’aérosols et de débit de polarisation des rongeurs et ajustez le débit de 4,5 millilitres en fonction du niveau de liquide sur la boule de mercure. Sous Créer des options d’étude, entrez test pour l’étude et sélectionnez rat pour l’espèce.Vérifiez que la liste de doses simple est sélectionnée et définissez le nombre de doses sur six. Pour sélectionner les paramètres Penh et area, cliquez sur suivant et réglez le temps d’adaptation de l’animal sur cinq minutes. Le temps de nébulisation à deux minutes, le temps de réponse à trois minutes et le temps de récupération à deux minutes.Ajoutez ensuite 200 microlitres de chaque concentration de méthacholine fraîchement préparée dans le PBS dans le nébuliseur dans l’ordre indiqué. Les changements en temps réel à Penh doivent être observés. Lorsque les six solutions avec des concentrations différentes ont été livrées et évaluées, cliquez sur Fichier et terminez la session.Avec l’acupuncture aux points GV 14, BL 12 bilatéral et BL 13 bilatéral, le rat maintient une position couchée et ne peut tourner la tête que vers l’extérieur, car une direction est bloquée avec une planche de bois. Comme l’illustre le graphique, après l’induction de l’asthme, à mesure que la concentration de méthacholine augmente, la concentration de Penh augmente, favorisant une augmentation progressive du taux de croissance. Le Western blot et la PCR en temps réel peuvent également être utilisés pour démarrer une protéine spécifique et un changement après un traitement d’acupuncture.Cette technique peut aider les chercheurs à explorer des changements spécifiques dans des facteurs clés et une voie de signal en utilisant l’asthme après l’acupuncture.

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Des modèles de souris expérimentales de l'asthme allergique offrent de nouvelles possibilités pour l'étude de la pathogenèse des maladies et le développement de nouvelles thérapies. Ces modèles sont bien adaptés à des facteurs de mesure relatives à la réponse immunitaire allergique, inflammation des voies respiratoires, et de la physiopathologie pulmonaire.

Modèle murin de l&#39;asthme induit par les allergènes

Ce protocole présente une procédure curative de moxibustion dans le traitement des patients souffrant d’asthme bronchique.

Une thérapie caractéristique de la médecine traditionnelle chinoise pour l’asthme bronchique : la moxibustion

Nous présentons ici un protocole d’électroacupuncture (EA) efficace et rapide chez la souris ou le jeune rat à l’aide d’un support imprimé en trois dimensions (3D). Cette technique permet une opération simultanée sur plusieurs animaux, ce qui permet de gagner du temps et d’augmenter l’efficacité expérimentale.

Opération d’électroacupuncture en vrac pour souris ou jeunes rats

Nous présentons ici une méthode améliorée de fixation de la suspension à l’aide d’une veste de rat pour immobiliser efficacement les rats lors d’expériences d’acupuncture. De plus, la structure et l’application de cet appareil de fixation, ainsi que les instructions et l’évaluation de son utilisation dans la thérapie d’électroacupuncture, sont élucidées.

Amélioration de la fixation de la suspension à l’aide d’une veste anti-rats dans des expériences d’acupuncture chez les rats

Ici, nous décrivons un protocole pour mettre en œuvre un traitement d’anesthésie légère et d’acupuncture sur un modèle murin d’hypoxie chronique et effectuer des tests comportementaux pour évaluer les altérations cognitives post-traitement.

Traitement d’acupuncture dans un modèle murin de dysfonctionnement cognitif induit par l’hypoxie chronique

Ce protocole détaille la procédure d’enfouissement des points d’acupuncture et démontre son efficacité dans le traitement de la rhinite allergique.

Thérapie d’intégration de l’acupoint catgut dans la médecine traditionnelle chinoise pour la gestion de la rhinite allergique

La thermoplastie bronchique est une procédure non-médicament pour l'asthme persistant sévère qui transmet l'énergie thermique à la paroi des voies respiratoires de façon contrôlée avec précision pour réduire les muscles des voies aériennes excessives lisse. Réduire les muscles lisses des voies aériennes diminue la capacité des voies aériennes de se contracter, ce qui réduit la fréquence des crises d'asthme.

Thermoplastie bronchique: une nouvelle approche thérapeutique pour l&#39;asthme sévère

Le poumon est perfusé à la fois par l'artère systémique bronchique et les artères pulmonaires. Dans la plupart des pathologies pulmonaires, il est le plus petit système vasculaire systémique qui montre une néovascularisation robuste. Interruption du flux sanguin pulmonaire favorise l'angiogenèse bronchique rapide. Nous fournissons des détails chirurgicales pour induire une ischémie artérielle pulmonaire gauche qui favorise la néovascularisation bronchique.

L&#39;angiogenèse dans le poumon de rat ischémique

Un protocole d'infusions chroniques de glucose et Intralipide chez le rat est décrite. Ce modèle peut être utilisé pour étudier l'impact de l'excès de nutriments sur la fonction des organes et des paramètres physiologiques.

Un modèle d&#39;infusion de nutriments chronique chez le rat

Ce manuscrit décrit un modèle chirurgical de pyélonéphrite chez le rat utilisant une infection intrarénale directe par Escherichia coli dans le bassinet du rein. La procédure expérimentale peut être utilisée pour étudier la pathogenèse de la pyélonéphrite ainsi que l’inflammation et la fibrose associées.

Injection Intrarénale de Escherichia coli Dans un modèle de rat de pyélonéphrite

Découvrez une méthode d'acupuncture pour étudier l'asthme chez le rat en utilisant une plateforme élevée et la plethysmographie corporelle. Ce protocole permet de mesurer les fonctions respiratoires en temps réel.

Acupuncture dans un modèle de rat de l’asthme

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