Un dispositif contemporain de réchauffement / retenue pour des injections efficaces de la veine de la queue dans un modèle de septicémie fongique murine

Le dispositif de chauffage et de contention offre une technique simplifiée pour effectuer avec succès des injections intraveineuses de la veine de la queue, fournit un chauffage dans un environnement contrôlé et une manipulation efficace pour effectuer l’injection intraveineuse de la veine de la queue. Avant d’essayer la technique, il est important de se familiariser avec le protocole et de s’entraîner avec des injections salines. La démonstration visuelle offre la possibilité de montrer des conseils et des mises en garde pour aider à la procédure.

Junko Yano, postdoctorant dans mon laboratoire, installera l’équipement et je ferai une démonstration de la procédure. Pour initialiser l’appareil de réchauffement, placez l’unité de réchaud sur une paillasse plate et propre, et allumez-la, en vous assurant que le voyant d’alimentation du thermostat est allumé en vert. Placez ensuite le matériau de litière à l’intérieur de la chambre chauffante pour garder la zone sèche et conserver la chaleur.

Pour l’installation du dispositif de retenue, placez l’unité de contention à côté de l’unité de réchauffement et déterminez la taille des cônes appropriée pour l’animal. Ajustez manuellement la largeur de la base du cône en aluminium souple pour fournir une retenue adéquate à l’animal. Vous pouvez également remplacer le cône par des modèles adaptés sur mesure pour accueillir des animaux de différentes tailles.

Réglez le thermostat à la température souhaitée à l’aide du cadran de commande, en vous assurant que le voyant de chauffage est allumé en rouge et que l’ampoule est allumée. Surveillez attentivement l’affichage de la température interne lorsque l’ampoule est allumée. Il s’activera automatiquement une fois la température cible atteinte.

Positionnez la hauteur du cône de la plate-forme de retenue à un niveau optimal pour l’utilisateur à l’aide du bouton de réglage de la hauteur. Une fois la température cible atteinte, transférez doucement les animaux de la cage de logement dans la chambre de réchauffement. La chambre chauffante peut contenir en toute sécurité quatre à six souris ou un rat pendant un maximum de 20 à 30 minutes.

Un traitement thermique de 5 à 10 minutes est suffisant pour induire la vasodilatation et améliorer la visibilité des veines de la queue. Surveillez l’animal pour tout signe de stress thermique aigu tel qu’une respiration rapide, une léthargie ou un comportement d’évasion en sautant. Retirez l’animal de la chambre en le soulevant par la base de la queue et placez-le sur l’ouverture du cône de l’unité de contention.

Lorsque l’animal s’agrippe au bord éloigné du cône avec ses pattes avant, tirez doucement la queue vers l’arrière et passez la queue à travers la fente ouverte. Fixez l’une ou l’autre des pattes arrière qui dépassent du cône de manière à ce que la veine latérale soit visible à la position 12 heures. Saisissez la queue à mi-longueur ou 2/3 avec la main non dominante entre le pouce et l’index, en exerçant une légère tension sur la veine latérale pour maintenir le positionnement de la queue et la vasodilatation.

Essuyez la peau du site d’injection avec une éponge ou un tampon de gaze imbibé d’alcool à 70 %. Tenez la seringue avec la main dominante et positionnez l’aiguille parallèlement à la queue. Insérez l’aiguille dans la direction du flux sanguin à un angle de 10 à 25 degrés et avancez plus loin dans la lumière de la veine en pénétrant de deux à quatre millimètres.

Injectez lentement la solution. En cas de résistance ou de cloques blanches au-dessus du site d’injection, retirez l’aiguille et tentez une deuxième injection à un site situé au-dessus de l’emplacement initial de l’aiguille. Si l’injection d’une veine latérale échoue, repositionnez l’animal du côté opposé et faites d’autres tentatives sur la veine controlatérale.

Retirez l’aiguille et appuyez fermement sur le site d’injection avec le pouce pour empêcher le reflux de la solution injectée ou du sang. Continuez à appliquer une légère compression avec une gaze propre ou une lingette en tissu jusqu’à ce que le saignement cesse. Remettez l’animal dans sa cage et surveillez-le pendant cinq minutes, en vous assurant que l’animal reprend ses activités normales sans autre saignement.

Une fois que le chauffage de la chambre de chauffe a été activé, l’émission de chaleur par l’ampoule augmente rapidement la température interne pendant les 5 à 15 premières minutes, en fonction de la température cible. Le radiateur désactive l’ampoule si la température interne détectée dépasse la température réglée. Par la suite, l’appareil répète automatiquement le cycle de chaleur pour maintenir la température interne.

Dans un modèle murin de candidose sanguine entraînant une septicémie, une provocation intraveineuse avec Candida albicans chez des souris Swiss Webster a provoqué une apparition rapide de la septicémie et la dissémination des organismes, entraînant une mortalité élevée en trois à quatre jours. En revanche, les animaux pourraient être protégés contre la septicémie par une pré-immunisation ou une vaccination avec une souche avirulente Candida dubliniensis, atteignant un taux de survie de plus de 95 % après la provocation IV létale avec des C. albicans virulents. Les animaux non vaccinés atteints d’une infection létale présentaient une augmentation significative de la morbidité induite par la septicémie, tandis que le groupe vacciné présentait des symptômes minimes après la provocation létale.

Les résultats de la mortalité progressive par rapport à la protection médiée par le vaccin ont été obtenus de manière reproductible dans quatre expériences indépendantes. Lorsque vous positionnez l’animal dans le cône, veillez à ce que vous orientiez correctement l’aiguille pour accéder à la veine, à ajuster l’aiguille dans la veine et à injecter la veine. Cette technique simplifiée offre un moyen efficace d’effectuer des injections dans la veine de la queue, ce qui améliorera les résultats scientifiques des chercheurs.