Name: Modèle rapide pour évaluer le potentiel anti-obésité d’une combinaison de Syzygium aromaticum (clou de girofle) et de Cuminun cyminum (Cumin) sur C57BL6/j Souris nourries régime riche en graisses (Vidéo) | JoVE Journal
Uploaded: 2021-07-31T13:00:00.000+00:00
Duration: 13 min 9 s
Description: Découvrez un protocole rapide d'évaluation anti-obésité utilisant un extrait combiné de Syzygium aromaticum et Cuminum cyminum sur des souris C57BL6/J nourries au régime riche en graisses.

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Cette recherche a été soutenue par l’Instituto Politécnico Nacional México.

Toutes les expérimentations animales ont été approuvées par le Comité d’expérimentation animale de l’Escuela Nacional de Ciencias Biologicas (IPN; Protocole no 2732).
1. Préparation de l’extrait de la combinaison de clous de girofle et de cumin
REMARQUE: Les plantes comestibles, Syzygium aromaticum (clou de girofle) et Cuminum cyminum (cumin) ont été achetées auprès de Central de Abastos CDMX, au Mexique.
<ol><li>Broyer 500 g de graines des plantes et effectuer une extraction assistée par ultrasons. Soniquez-les (320 Watts; fréquence 24 kHz, 30 min) avec de l’éthanol: eau (60:40 v / v) à une plage de températures de 30 ± 4 ° C.13
</li>
	<li>Filtrez les solides à l’aide de papier filtre Whatman numéro 2 sous vide et concentrez l’extrait avec un évaporateur rotatif.</li>
	<li>Mesurer le spectre UV-vis de l’extrait des deux plantes (CC).</li>
</ol>2. Animaux
<ol><li>Utilisez des souris C57BL6/J mâles âgées de six semaines (48 au total, poids corporel 24-29 g) pour l’étude.</li>
	<li>Loger les animaux en groupes de huit dans des conditions de laboratoire standard: température (20-22 ± 1 °C), humidité relative (45-54 ± 2%), éclairage (08:00-20:00 h) avec de la nourriture et de l’eau ad libitum. Acclimater les souris dans ces conditions pendant une semaine avant l’expérience.</li>
</ol>3. Procédure expérimentale
<ol><li>Préparez le régime riche en graisses14 comme dans le tableau 1.</li>
	<li>Au début du test, soumettre chacun des groupes formés (n = 8) à différents traitements: Groupe d’alimentation 1 sur un régime normal; Groupe 2, sur un régime riche en graisses; Groupe 3, sur un régime riche en graisses + 100 mg/kg d’extrait de CC; Groupe 4, sur un régime riche en graisses + 250 mg/kg d’extrait de CC; Groupe 5, sur le régime riche en graisses + 450 mg/kg d’extrait de CC ; Groupe 6, sur le régime riche en graisses + phentermine (un médicament antiobésity utilisé comme contrôle positif)15.</li>
	<li>Nourrissez tous les groupes de souris pendant 5 semaines et enregistrez la quantité de nourriture consommée quotidiennement.<ol>
<li>Dans un tube à essai avec bouchon, homogénéiser l’extrait ou le médicament avec la dose d’eau correspondant au groupe auquel le traitement est administré. Cela se fait avec vortex shaker.</li>
		<li>Une fois homogénéisé, ajoutez tout le traitement correspondant dans le buveur de chaque groupe.</li>
	</ol>
</li>
</ol>4. Prélèvement d’échantillons
<ol><li>Mesurer à la fois l’apport alimentaire et le poids corporel une fois par semaine. Jeûne les souris pendant la nuit pendant une période de 5 semaines.</li>
	<li>Sacrifiez-les par luxation cervicale et nécropsie.</li>
	<li>Une fois que les souris ont été sacrifiées, immobilisez-les en décubitus dorsal.</li>
	<li>À l’aide d’une pince chirurgicale propre et de ciseaux, localisez et soulevez la peau centrale près des organes génitaux et faites une petite incision de 0,2 mm.</li>
	<li>Insérez les ciseaux plats horizontalement dans l’incision et séparez soigneusement la peau abdominale de la paroi abdominale.</li>
	<li>Avec la pince, soulevez la peau centrale et avec les ciseaux chirurgicaux, coupez-la au niveau de la cage thoracique. Ensuite, coupez la peau au-dessus des deux membres postérieurs pour faciliter la collecte du tissu adipeux.</li>
	<li>Assurer la collecte de tout le tissu adipeux du corps par dissection émoussé avec des ciseaux et des pinces. Une fois recueilli, placez le tissu adipeux dans du papier d’aluminium. N’oubliez pas de recueillir la graisse autour des organes reproducteurs. Évitez l’accumulation de cheveux et de peau pour ne pas altérer les résultats.</li>
	<li>Pour accéder au tissu adipeux viscéral, coupez le muscle abdominal avec des ciseaux chirurgicaux des organes génitaux à la cage thoracique, en faisant une incision dans les muscles abdominaux des organes génitaux vers le dos de la souris.</li>
	<li>Effectuer une hépatectomie pour enlever 100 % du foie. Pour extérioriser le foie, retirez les organes inutiles et coupez les veines et les artères hépatiques pour séparer le foie du reste du corps. Comme dernière étape, extraire précisément la vésicule biliaire du foie16.</li>
	<li>Mesurer l’hypercholestérolémie (cholestérol) et l’hypertriglycéridémie (triglycérides) à l’aide de trousses d’analyse commerciales selon les indications du fabricant.</li>
</ol>5. Analyse statistique
NOTA : Tous les résultats expérimentaux doivent être représentatifs de trois essais indépendants, exprimés en moyenne ±'écart type.
<ol><li>Calculer l’erreur type à l’aide d’une analyse ANOVA à sens unique de la variance suivie du test de portée de Tukey. Considérez un P< 0,05 comme statistiquement significatif.</li>
</ol>

<ol><li>Singla, P., Bardoloi, A., Parkash, A. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Metabolic+effects+of+obesity%3A+A+review%5BTitle%5D)+AND+%22World+Journal+of+Diabetes%22%5BJournal%5D)">Metabolic effects of obesity: A review.</a> World Journal of Diabetes. 1 (1), 76-88 (2010).</li>
<li>Ojulari, O. V., Lee, S. G., Nam, J. O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Beneficial+Effects+of+Natural+Bioactive+Compounds+from+Hibiscus+sabdariffa+L.+on+Obesity%5BTitle%5D)+AND+%22Molecules%22%5BJournal%5D)">Beneficial Effects of Natural Bioactive Compounds from Hibiscus sabdariffa L. on Obesity.</a> Molecules. 24 (1), 210(2019).</li>
<li>Bahmani, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Obesity+phytotherapy%3A+review+of+native+herbs+used+in+traditional+medicine+for+obesity%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Evidence-Based+Integrative+Medicine%22%5BJournal%5D)">Obesity phytotherapy: review of native herbs used in traditional medicine for obesity.</a> Journal of Evidence-Based Integrative Medicine. 21 (3), 228-234 (2016).</li>
<li>Ríos-Hoyo, A., Gutiérrez-Salmeán, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((New+Dietary+Supplements+for+Obesity%3A+What+We+Currently+Know%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Obesity+Reports%22%5BJournal%5D)">New Dietary Supplements for Obesity: What We Currently Know.</a> Current Obesity Reports. 5 (2), 262-270 (2016).</li>
<li>Hasani-Ranjbar, S., Nayebi, N., Larijani, B., Abdollahi, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((A+systematic+review+of+the+efficacy+and+safety+of+herbal+medicines+used+in+the+treatment+of+obesity%5BTitle%5D)+AND+%22World+Journal+Gastroenterology%22%5BJournal%5D)">A systematic review of the efficacy and safety of herbal medicines used in the treatment of obesity.</a> World Journal Gastroenterology. 15 (25), 3073-3085 (2009).</li>
<li>Hardeman, W., Griffin, S., Johnston, M., Kinmonth, A. L., Wareham, N. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Interventions+to+prevent+weight+gain%3A+a+systematic+review+of+psychological+models+and+behaviour+change+methods%5BTitle%5D)+AND+%22Nternational+Journal+of+Obesity+and+Related+Metabolic+Disorders%22%5BJournal%5D)">Interventions to prevent weight gain: a systematic review of psychological models and behaviour change methods.</a> Nternational Journal of Obesity and Related Metabolic Disorders. 24 (1), 131-143 (2000).</li>
<li>Dinda, B., Dinda, M., Roy, A., Dinda, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Dietary+plant+flavonoids+in+prevention+of+obesity+and+diabetes%5BTitle%5D)+AND+%22Advances+in+Protein+Chemistry+and+Structural+Biology%22%5BJournal%5D)">Dietary plant flavonoids in prevention of obesity and diabetes.</a> Advances in Protein Chemistry and Structural Biology. 120, 159-235 (2020).</li>
<li>Mayer, M. A., Hocht, C., Puyo, A., Taira, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Recent+advances+in+obesity+pharmacotherapy%5BTitle%5D)+AND+%22Current+Clinical+Pharmacology%22%5BJournal%5D)">Recent advances in obesity pharmacotherapy.</a> Current Clinical Pharmacology. 4 (1), 53-61 (2009).</li>
<li>Rafie, A. Z. M., Syahir, A., Ahmad, W. A. N. W., Mustafa, M. Z., Mariatulqabtiah, A. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((2018+supplementation+of+stingless+bee+honey+from+heterotrigona+itama+improves+antiobesity+parameters+in+high-fat+diet+induced+obese+rat+model%5BTitle%5D)+AND+%22Evidence-Based+Complementary+and+Alternative+Medicine%22%5BJournal%5D)">2018 supplementation of stingless bee honey from heterotrigona itama improves antiobesity parameters in high-fat diet induced obese rat model.</a> Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine. , 6371582(2018).</li>
<li>Song, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Anti-obesity+effects+of+the+flower+of+prunus+persica+in+high-fat+diet-induced+obese+mice%5BTitle%5D)+AND+%22Nutrients%22%5BJournal%5D)">Anti-obesity effects of the flower of prunus persica in high-fat diet-induced obese mice.</a> Nutrients. 11, 2176(2019).</li>
<li>Jung, C. H., Ahn, J., Jeon, T. -I., Kim, T. W., Ha, T. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Syzygium+aromaticum+ethanol+extract+reduces+high-fat+diet-induced+obesity+in+mice+through+downregulation+of+adipogenic+and+lipogenic+gene+expression%5BTitle%5D)+AND+%22Experimental+and+Therapeutic+Medicine%22%5BJournal%5D)">Syzygium aromaticum ethanol extract reduces high-fat diet-induced obesity in mice through downregulation of adipogenic and lipogenic gene expression.</a> Experimental and Therapeutic Medicine. 4 (3), 409-414 (2012).</li>
<li>Said, O., Saad, B., Fulder, S., Khalil, K., Kassis, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Weight+Loss+in+Animals+and+Humans+Treated+with+%22Weigh+level%22%2C+a+Combination+of+Four+Medicinal+Plants+Used+in+Traditional+Arabic+and+Islamic+Medicine%5BTitle%5D)+AND+%22Evidence-Based+Complementary+and+Alternative+Medicine%22%5BJournal%5D)">Weight Loss in Animals and Humans Treated with "Weigh level", a Combination of Four Medicinal Plants Used in Traditional Arabic and Islamic Medicine.</a> Evidence-Based Complementary and Alternative Medicine. , 874538(2011).</li>
<li>Anaya-Esparza, L. M., Ramos-Aguirre, D., Zamora-Gasga, V. M., Yahia, E., Montalvo-Gonzalez, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Optimization+of+ultrasonic-assisted+extraction+of+phenolic+compounds+from+Justicia+spicigera+leaves%5BTitle%5D)+AND+%22Food+Science+and+Biotechnology%22%5BJournal%5D)">Optimization of ultrasonic-assisted extraction of phenolic compounds from Justicia spicigera leaves.</a> Food Science and Biotechnology. 27 (4), 1093-1102 (2018).</li>
<li>Ayoub, R. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((The+effect+of+anthocyanin-rich+purple+vegetable+diets+on+metabolic+syndrome+in+obese+Zucker%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Medical+Food%22%5BJournal%5D)">The effect of anthocyanin-rich purple vegetable diets on metabolic syndrome in obese Zucker.</a> Journal of Medical Food. , (2017).</li>
<li>Go, R., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Effects+of+anti-obesity+drugs%2C+phentermine+and+mahuang%2C+on+the+behavioral+patterns+in+Sprague-Dawley+rat+model%5BTitle%5D)+AND+%22Laboratory+of+Animals+Research%22%5BJournal%5D)">Effects of anti-obesity drugs, phentermine and mahuang, on the behavioral patterns in Sprague-Dawley rat model.</a> Laboratory of Animals Research. 30 (2), 73-78 (2014).</li>
<li>Tan, P., Pepin, É, Lavoie, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Mouse+Adipose+Tissue+Collection+and+Processing+for+RNA+analysis%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Visualized+Experiments%22%5BJournal%5D)">Mouse Adipose Tissue Collection and Processing for RNA analysis.</a> Journal of Visualized Experiments. (13), e57026(2018).</li>
<li>Bjorndal, B., Burri, L., Staalesen, V., Skorve, J., Berge, R. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed?term=((Different+adipose+depots%3A+Their+role+in+the+development+of+metabolic+syndrome+and+mitochondrial+response+to+hypolipidemic+agents%5BTitle%5D)+AND+%22Journal+of+Obesity%22%5BJournal%5D)">Different adipose depots: Their role in the development of metabolic syndrome and mitochondrial response to hypolipidemic agents.</a> Journal of Obesity. 2011, 490650(2011).</li>
</ol>

Les auteurs ne déclarent aucun conflit d’intérêts.

Dans cette étude nous avons évalué, pour la première fois, l’effet de l’administration orale d’une combinaison de clous de girofle et d’extrait de cumin (CC) sur des profils lipidiques et l’obésité chez les souris alimentées avec un régime à haute teneur en graisses pendant 5 semaines. Les résultats ont indiqué que les groupes HFD ont montré un gain de poids corporel significativement plus élevé comparé au groupe ND, qui a prouvé que l’induction de l’obésité dans le modèle obèse était réussie. La dose administrée de CC (...

L’accumulation excessive de graisse corporelle est une caractéristique de l’obésité. Le déséquilibre entre l’apport énergétique et la consommation conduit au stockage de l’excès d’énergie dans les adipocytes, qui est lié aux facteurs de risque métaboliques d’hyperglycémie et de résistance à l’insuline dans le diabète de type 2, l’hypertension, l’hypercholestérolémie et les maladiescardiovasculaires 1,2.
Les produits naturels avec un minimum d’effets secondaires et un faible coût ont reçu une attention accrue depuis que des études précédentes ont rapporté des composés phytochimiques bioactifs et des agents anti-obésité potentiels avec des mécanismes qui inversent ou retardent le syndrome métabolique et les pathologies associées8.
Plusieurs plantes médicinales ont été étudiées pour prévenir l’obésité et les maladies connexes. Parmi eux, Syzygium aromaticum a été étudié pour son potentiel anti-obésité dans un traitement in vitro sur des cellules 3T3-L1 et un traitement in vivo sur des souris nourries avec un régime riche en graisses11. En outre, des effets anti-surpoids significatifs ont été observés dans un essai ouvert multicentrique de Cuminum cyminum sur des sujets extrêmement obèses12. Dans cette étude, des souris C57BL6/J ont été utilisées pour étudier le modèle rapide expérimental afin d’évaluer un agent anti-obésité potentiel en utilisant une combinaison des deux plantes comestibles.

<table><tbody><tr><td>Eau distillée</td><td>N</td><td>/A N/a</td><td>Disponible également pour d’autres fournisseurs</td></tr><tr><td>Éthanol</td><td>Fermont</td><td>6063</td><td>Pureté à 99,8 %</td></tr> <tr><td>< forte > Régime alimentaire Ingrédients</forte></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>caséine</td><td>Tout fournisseur</td><td>n/a</td><td></td></tr><tr><td>Cellulose</td><td>Tout fournisseur</td><td>n/a</td><td></td></tr><tr><td>Centrum balance multivitamine</td><td>Pfizer</td><td>n/a</td><td></td></tr><tr><td>Bitartrate de choline</td><td>Tout fournisseur</td><td>n/a</td><td></td></tr><tr><td>L-cystein</td><td>Sigma Aldrich</td><td>168149</td><td>Disponible également pour d’autres fournisseurs</td></tr><tr><td>Saindoux</td><td>N/</td><td>A</td><td></td></tr><tr><td>Maltodextrine 10</td><td>N’importe quel fournisseur</td><td>N/A</td><td></td></tr><tr><td>Granulés Nutricubos</td><td>Purina</td><td>n/a</td><td>Disponible pour d’autres fournisseurs ainsi que pour Huile</td></tr> de <tr>soja <td>N</td><td>/a</td><td></td><td></td></tr><tr><td>Sucrose</td><td>N</td><td>/a</td><td></td></tr><tr><td>Équipement d’extraction</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Rotavapor</td><td>Buchi</td><td>R-300</td><td></td></tr><tr><td>Shimadzu UV-1800 Spectrophotomètre à balayage UV/Visible</td><td>Cole Parmer</td><td>T-83400-20</td><td>Disponible pour d’autres fournisseurs ainsi que pour d’autres fournisseurs</td></tr><tr><td>Unité à ultrasons</td><td>Elma</td><td>TI-H-20</td><td>Disponible pour d’autres fournisseurs ainsi que pour d’autres fournisseurs Pompe à</td></tr><tr><td>vide</td><td>Buchi</td><td>V-100</td><td></td></tr></tbody></table>

modèle rapide pour évaluer le potentiel anti-obésité d’une combinaison de syzygium aromaticum (clou de girofle) et de cuminun cyminum (cumin) sur c57bl6/j souris nourries régime riche en graisses

Rapid Model to Evaluate the Anti-Obesity Potential of a Combination of Syzygium aromaticum (Clove) and Cuminun cyminum (Cumin) on C57BL6/j Mice Fed High-Fat Diet

Plusieurs études ont démontré que le contenu phytochimique des plantes sont des agents anti-obésité potentiels. Dans cette étude nous examinons l’effet d’utiliser une combinaison de boutons secs de Syzygium aromaticum et de graines de Cuminum cyminum (CC) sur des souris C57BL6/J induites avec l’obésité par l’intermédiaire du haut-fat-diet (HFD). Le but de cette étude est de démontrer que la méthode proposée dans l’étude a réduit l’obésité de manière significative après plusieurs semaines d’expérimentation. L’extrait des deux plantes a été extrait à l’aide d’ultrasons pour améliorer l’extraction de composés phytochimiques. Des conditions d’extraction optimales ont été obtenues avec de l’éthanol comme suit: 50:50 v /v d’eau avec une puissance ultrasonore de 300 W et un temps d’ultrasons de 30 minutes. L’administration simultanée de l’extrait de CC dans HFD pendant 5 semaines a mené à la régulation des profils lipidiques (cholestérol et triglycérides), à la réduction de la prise de nourriture, au gain de poids, au tissu adipeux et au poids de foie. Les résultats obtenus par ce modèle obèse indiquent que l’extrait de CC peut empêcher l’obésité. Par rapport à la méthode traditionnelle de 16 semaines (8 semaines pour grossir et 8 semaines pour perdre du poids), des résultats similaires ont été obtenus dans le modèle obèse de la présente étude en moins de temps d’expérimentation.

Extraction assistée par ultrasons La condition d’extraction optimale pour l’extraction était éthanol:eau (50:50, v/v) avec une puissance ultrasonore de 300 W et un temps d’ultrasons de 30 min. De cette façon, l’extraction était plus rapide que les méthodes d’extraction conventionnelles(tableau 2). L’extrait a montré un pic d’absorption intense à 320 nm dans les spectres UV-visibles(Figure 1).
Apport alimentaire et poids corporel</e...

Ce travail présente un protocole pour explorer l’effet anti-obésité de deux plantes utilisées ensemble, pour une durée de 5 semaines. Il y avait une administration combinée de l’extrait et du haut-fat-diet (HFD) chez les souris obèses. La méthode peut promouvoir les avantages des plantes dans le traitement de l’obésité.

Modèle rapide pour évaluer le potentiel anti-obésité d’une combinaison de Syzygium aromaticum (clou de girofle) et de Cuminun cyminum (Cumin) sur C57BL6/j Souris nourries régime riche en graisses

Several studies have demonstrated that the phytochemical contents of plants are potential anti-obesity agents. In this study we examine the effect of ...

Ce travail présente un protocole pour explorer l’effet anti-obésité de deux plantes utilisées ensemble pendant une durée de cinq semaines. Il y avait une administration combinée de l’extrait et du régime riche en graisses chez les souris obèses. La méthode peut promouvoir les avantages des plantes dans le traitement de l’obésité.L’accumulation modifiée excessive est caractéristique de l’obésité. entre l’apport énergétique et la dépense. Faisons le stockage de l’excès d’énergie dans les adipocytes.En fait, l’obésité est la cause des 78% de diabète de type deux, des 68% de la maladie hypertensive et des 45% des cas d’AVC ischémique. À l’échelle mondiale, on prévoit qu’il y aura 2 000 000 de personnes en surpoids et 1 000 000 de personnes obèses d’ici 2030. Les preuves pour les médicaments anti-obésité ont indiqué une incidence élevée d’effets indésirables et de toxicité.Les interventions chirurgicales, comme la chirurgie bariatrique, ne sont pas toujours traitables. Par conséquent, d’autres études sont nécessaires pour mettre au point de nouveaux traitements qui pourraient être utilisés pour réduire la prévalence de l’obésité. Les plantes médicinales contiennent des composés bioactif

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